p73基因和CD44基因单核苷酸多态性与乳腺癌生物学特性的相关性研究

目的：探讨p73基因G4C14-to-A4T14（rs2273953和rs1801173位点）和CD44基因rs4756195位点单核苷酸多态性与乳腺癌生物学特性的相关性，同时研究乳腺癌中CD44＋/CD24－/low的表达及其与含蒽环类药物化疗方案敏感性的关系。方法：采用病例-对照研究，利用Sequenom MassARRAY iPLEXGOLD系统检测分别170例乳腺癌患者和178例健康对照者的p73基因G4C14-to-A4T14（rs2273953和rs1801173位点）和CD44基因rs4756195位点单核苷酸多态性，并对检测结果进行t检验、χ2检验和非条件Logistic回归分析。同时选取其中接受含蒽环类药物术前新辅助化疗的乳腺癌91例，23个疗程后进行效果评价；采用双染免疫组织化学方法检测化疗前后CD44＋/CD24－/low的表达，t检验分析化疗前后CD44＋/CD24－/low细胞比例的变化，χ2检验分析乳腺癌CD44+/CD24－/low表型与乳腺癌临床病理参数及化疗疗效的关系。结果：1、p73基因G4C14-to-A4T14多态基因型和等位基因型在乳腺癌组和健康对照组的分布频率差异无统计学意义（χ2=2.750，P=0.253；χ2=2.195，P=0.138）；与携带GC/AT和AT/AT基因型的个体比较，携带GC/GC基因型的个体患三阴性乳腺癌发病风险显著增加（OR=2.992，95%CI=1.300-6.890，P=0.010）。2、CD44基因rs4756195位点AA、AG和GG三种基因型在乳腺癌组和对照组的分布频率差异有统计学意义（χ2=6.272，P=0.043）；与携带AA基因型的个体比较，携带AG、GG基因型的个体乳腺癌的发病风险明显增加（OR=6.035，95%CI=1.262-28.856， P=0.024； OR=5.367，95%CI=1.166-24.709，P=0.031）。3、p73基因多态性与乳腺癌患者的年龄、原发灶大小、绝经状况、TNM分期、病理类型、腋窝淋巴结转移、雌激素受体（estrogen receptor, ER）、孕激素受体（progesterone receptor, PR）、人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor2,HER2）、p53均无明显相关性（P＞0.05）；三阴性乳腺癌（ER、PR和HER2表达均为阴性）中GC/GC基因型频率明显高于非三阴性乳腺癌（78.9%vs57.6%, χ2=5.741, P=0.017）。4、CD44基因rs4756195位点多态性与乳腺癌临床分期、病理类型、停经状况、ER、PR、HER2、p53表达无明显相关性（P＞0.05）；携带AA和AG基因型的乳腺癌腋窝淋巴结转移率为44.7%，携带G/G基因型的乳腺癌腋窝淋巴结转移率为62.6%，两者差异有统计学意义（χ2=4.473，P=0.034）。携带AA和AG基因型的乳腺癌CD44阳性率为68.1%，携带GG基因型的乳腺癌CD44阳性率为45.5%，两者差异有统计学意义（χ2=6.930，P=0.008）；携带AA和AG基因型的乳腺癌CD44＋/CD24－/low阳性率高于携带GG基因型的乳腺癌，但两者差异无统计学意义（P＞0.05）。5、携带p73基因G4C14-to-A4T14多态位点GC/GC基因型的乳腺癌与携带AT/AT和GC/AT基因型的乳腺癌比较，两组间术前新辅助化疗总有效率和病理完全缓解率差异无统计学意义（OR=1.009，95%CI=0.414-2.461， P=0.984； OR=0.970，95%CI=0.372-2.527，P=0.950）。6、携带CD44基因rs4756195多态位点GG基因型和携带AA和AG基因型的乳腺癌患者的术前新辅助化疗总有效率差异无统计学意义（73.6%vs69.0%，χ2=0.240，P=0.625）；携带CD44基因rs4756195多态位点AA和AG基因型的乳腺癌的病理完全缓解率明显高于携带GG基因型的乳腺癌（55.2%vs16.5%，χ2=17,181，P=0.000；OR=13.935，95%CI=4.359-44.541，P=0.000）。7、乳腺癌中CD44＋/CD24－/low阳性表达率为39.6%（36/91），在接受含蒽环类药物的新辅助化疗后乳腺癌中CD44＋/CD24－/low细胞比例较化疗前明显增加（P=0.028）。CD44+/CD24－/low阳性组ER阳性率明显低于CD44+/CD24－/low阴性组（25.0%vs47.3%, P=0.033）。三阴性乳腺癌中CD44+/CD24－/low阳性率明显高于非三阴性乳腺癌（61.9%vs32.9%, P=0.017）。CD44+/CD24－/low表型与年龄、肿瘤大小、临床分期、病理类型、组织学分级等乳腺癌临床病理参数无明显关系（P＞0.05）。CD44+/CD24－/low阳性组的总有效率高于CD44+/CD24－/low阴性组，但两组之间差异无统计学意义（75%vs69.1%, P=0.542）；CD44+/CD24－/low阳性组的病理完全缓解率明显高于CD44+/CD24－/low阴性组（38.9%vs18.2%, P=0.028）。结论：1、p73基因G4C14-to-A4T14多态性与中国重庆地区汉族女性三阴性乳腺癌的发病风险相关，GC/GC基因型是中国重庆地区汉族女性三阴性乳腺癌的易感基因型。2、CD44基因rs4756195位点多态性与中国重庆地区汉族女性乳腺癌的发病风险相关，AG和GG基因型是中国重庆地区汉族女乳腺癌的易感基因型。3、p73基因G4C14-to-A4T14多态性与三阴性乳腺癌显著相关，携带GC/GC基因型的乳腺癌患者可能预后不良。4、CD44基因rs4756195位点多态性与乳腺癌腋窝淋巴结转移、CD44表达相关，提示携带GG基因型的乳腺癌可能预后不良。5、p73基因G4C14-to-A4T14多态性与乳腺癌对含蒽环类药物化疗方案的化疗敏感性无明显相关性。6、CD44基因rs4756195位点多态性与乳腺癌对含蒽环类药物化疗方案的化疗敏感性相关，携带AA和AG基因型的乳腺癌有更高的病理完全缓解率。CD44基因rs4756195位点多态性可能成为乳腺癌化疗疗效的预测指标之一。7、CD44+/CD24－/low细胞仅存在于部分乳腺癌，CD44+/CD24－/low表型与ER（﹣）、三阴性乳腺癌相关，CD44+/CD24－/low表型与乳腺癌对含蒽环类药物化疗方案的敏感性相关，CD44+/CD24－/low表型可能成为乳腺癌临床化疗疗效的预测指标之一。