山杏不同外植体愈伤组织的诱导及其体细胞胚胎发生

山杏是北方地区主要的经济树种和生态绿化树种其用途广泛和实用价值,山杏常规繁殖速度慢,并且山杏种子数量受气候影响极大,存在大小年现象,妨碍优良品种的推广与应用。运用植物组织培养技术,具有繁殖系数大,可获得温度优良性状的山杏苗木,是解决山杏繁殖问题的有效途径,本文以叶片、种子、和茎尖为外植体,研究不同外植体愈伤组织的诱导和分化,通过愈伤组织途径建立了再生植株体系、通过诱导胚性愈伤组织分化研究其体细胞胚胎发生,获得了山杏体细胞胚。结果如下:(1)试验筛选结果得出:成熟胚和茎尖分别是山杏愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生的最佳外植体。(2)种子随着消毒时间的增加,感染率降低,诱导率下降,75%酒精30s→2%NaC1O 4min处理种子,感染率为6.6%,但诱导率高达90%,是种子最佳消毒方法;而茎尖在75%酒精30s→0.2%升汞6min →2%NaC10 4min下消毒效果最好。(3)成熟胚在MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5mg/L)培养基中愈伤组织诱导率达100%,当6-BA浓度为2.0mg/L,NAA浓度为0.2mg/L时,愈伤组织的分化率最高为5.88;而成熟胚在光照培养下直接诱导丛生芽,当6-BA(1.0 mg/L)和NAA(0.2 mg/L)组合中芽丛长势旺盛,叶片浓绿,生长良好且分化率高达10.75,是成熟胚诱导丛生芽的最佳培养基;最后将芽丛切下在NAA和IBA作用下诱导生根,NAA配合IBA使用时,芽丛的生根率较低甚至没有生根,基部有大量愈伤,单独使用NAA时,随着NAA的浓度增加,芽丛生根率也随之增加,浓度为0.5mg/L生根率最高为 75%。(4)对胚性愈伤组织增殖试验添加附加物水解乳蛋白、水解酪蛋白和肌醇,添加水解酪蛋白愈伤增殖率为92.2%最高;而胚性愈伤在1.Omg/L 6-BA和0.05mmg/LNAA的激素组合中诱导率最高为40%,作为胚性愈伤适宜分化培养基。