内蒙古优质传统酸牛奶中乳酸菌分离鉴定及其模拟制作研究
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近年来传统乳制品越来越受到消费者的喜爱,而目前市场上销售的传统乳制品种类和数量都有限,内蒙古地区牧民长期饮用的传统酸牛奶受到当地牧民的喜爱。然而,由于酸牛奶是自然发酵,所以这种酸牛奶存在着安全性和质量不稳定等问题。因此,有必要从传统发酵酸牛奶中分离、鉴定、筛选出优良的乳酸菌发酵剂菌株模拟发酵酸牛奶以改善其品质;为工业化生产酸牛奶提供菌株资源,为开发地域特色的乳酸菌制品奠定基础。本研究对采集的6份样品从安全性和感官特性两方面进行综合评定,筛选出1份最优质样品,以最优质传统发酵酸牛奶样品为研究对象,对其进行乳酸菌的多态性分析。通过传统纯培养法分离出17株菌,并对17株菌进行16S rDNA序列分析、多位点pheS序列分析和生理生化鉴定,并构建了乳酸菌属的系统发育树,根据亲缘关系对乳酸菌进行了鉴定;通过酸度测定,从内蒙古优质传统酸牛奶中分离的17株乳酸菌中筛选出6株发酵酸乳凝乳时间短和凝乳状态好的乳酸菌,进一步研究这6株乳酸菌在乳中的发酵特性,测定菌株在凝乳前的产酸特性及4℃冷藏期间的产酸特性、菌株发酵乳冷藏24h后的质构特性及活菌数变化;以17株乳酸菌为研究对象,详细研究它们的耐胃酸性、耐胆汁盐性;以菌株KLDS4.1109和菌株KLDS1.1101为研究对象进行菌株间的拮抗试验,将菌株KLDS4.1109和菌株KLDS1.1101进行杆菌和球菌之间不同接种比例的组合发酵试验,将组合菌株和单菌株KLDS4.1109分别发酵的传统酸牛奶样品与原传统酸牛奶样品进行感官比较,筛选出了最好的一对组合。17菌株鉴定的结果为11株乳酸乳球菌乳酸亚种、1株格式乳球菌、1株粪肠球菌、2株植物乳杆菌植物亚种及2株弯曲乳杆菌。乳酸乳球菌乳酸亚种为优势菌(占总分离菌株的64.7%),可能正是它们赋予了酸牛奶特殊的风味和质地。发酵特性试验结果表明:菌株KLDS4.1109具有较强的前产酸能力和较弱的后酸化能力;6株乳酸菌发酵乳质构有差异性,且KLDS4.1109发酵乳的质构最佳;在冷藏储存中,活菌数维持在106cfu/ml以上。综述所述,菌株KLDS4.1109发酵特性最好。耐酸耐胆盐试验结果表明:KLDS1.1101具良好的耐酸耐胆汁盐性。模拟发酵传统酸牛奶的最优组合为菌株KLDS4.1109和KLDS1.1101的接种比例为1:2。最优组合样品的酸味适中易被消费者接受,且其组织状态和香气都比原样品要好。最优组合样品的香气易被大众接受,组织状态为均匀细腻、无乳清析出。本研究初步探明了内蒙古传统酸牛奶中乳酸菌的组成,并模拟了其制作,为开发传统乳制品奠定了基础。
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-23页 |
1.1 立题背景 | 第11-13页 |
1.1.1 传统酸牛奶介绍 | 第11-12页 |
1.1.2 传统酸牛奶中的微生物体系 | 第12-13页 |
1.2 文献综述 | 第13-21页 |
1.2.1 乳酸菌概述 | 第13-17页 |
1.2.2 微生物多样性 | 第17-18页 |
1.2.3 优良发酵剂菌株的筛选 | 第18-20页 |
1.2.4 传统乳制品 | 第20-21页 |
1.3 本课题研究的目的与意义 | 第21页 |
1.4 本课题的研究内容 | 第21-22页 |
1.5 课题来源 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 实验原料 | 第23页 |
2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂及其来源 | 第24页 |
2.1.4 仪器设备 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 优质传统酸牛奶的筛选 | 第24-26页 |
2.2.2 优质传统酸牛奶中乳酸菌的分离鉴定 | 第26-29页 |
2.2.3 优良发酵剂菌株的筛选 | 第29-30页 |
2.2.4 传统酸牛奶的模拟制作 | 第30-31页 |
2.2.5 数据处理 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-47页 |
3.1 优质传统酸牛奶筛选结果 | 第32-33页 |
3.1.1 传统酸牛奶感官鉴评结果 | 第32-33页 |
3.1.2 传统酸牛奶安全性评估结果 | 第33页 |
3.2 传统酸牛奶中乳酸菌分离鉴定结果分析 | 第33-39页 |
3.2.1 各菌株 16S rDNA 序列分析 | 第33-37页 |
3.2.2 pheS 基因序列分析 | 第37页 |
3.2.3 乳酸乳球菌生理生化鉴定结果 | 第37-39页 |
3.3 优良发酵剂菌株筛选结果分析 | 第39-46页 |
3.3.1 菌株发酵特性分析 | 第39-44页 |
3.3.2 菌株益生特性分析 | 第44-46页 |
3.4 传统酸牛奶的模拟制作 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-53页 |
4.1 传统酸牛奶样品的安全性评估 | 第47页 |
4.2 传统酸牛奶中乳酸菌的 16S rRNA 基因序列同源性分析 | 第47-48页 |
4.3 传统酸马奶中乳酸菌多样性分析 | 第48-50页 |
4.4 传统酸牛奶中中分离出乳酸菌的生物特性分析 | 第50-51页 |
4.5 对模拟制作的传统酸牛奶的评价 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-75页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75页 |
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