双酶复合法提取大豆蛋白的工艺研究

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本文以低温脱脂豆粕粉为初始原料,通过选酶实验,筛选出两种使豆粕水解度大的酶进行复合水解,通过单因素试验和正交试验,确定酶解的最佳工艺条件,后选出样品进行分析,确定酶解以后分子量的变化趋势以及官能团特征,并分析了酶解后产品的氨基酸种类及含量,得出以下结论:1.以蛋白含量和水解度作为酶解实验的评价指标,选择高效蛋白酶和胰蛋白酶进行复合水解。通过内切酶和外切酶的复合作用,既提高了产物的蛋白含量和水解度,又减轻了产品的苦味,有利于产品在食品工业中的应用。2.通过单因素和正交试验,确定大豆豆粕酶解的最佳工艺条件为:加水量600mL,pH7.5,酶解时间8h,加酶间隔时间3h。反应温度48℃。3.通过红外光谱检测酶解以后产品,在产品的IR图谱中,波数在3648cm-1处,是羟基伸缩振动,波数在2931cm-1处,是-NH2中的N-H伸缩振动,1658 cm-1处,是酰胺基团中的C=O伸缩振动所引起,是肽键存在的典型特征。4.通过SDS(十二烷基硫酸钠)-PAGE(聚丙烯酰胺)电泳实验分析,得到动态的大豆蛋白的酶水解趋势,将豆粕粉和酶解后的产物进行电泳实验,得出结论:豆粕粉在大分子量处谱带较多,大分子量的蛋白含量较高,而酶解以后,除在29.2KDa处有一条谱带以外,在10000Da的以下的蛋白占绝大份额,说明酶解以后的蛋白分子量很小,大多数是以多肽以及氨基酸的形式存在。5.通过氨基酸分析,得出各种氨基酸含量,和大豆分离蛋白的氨基酸组成进行比较,得出结论:酶解后产品和大豆分离蛋白的氨基酸组成基本相同,含量略高,氨基酸的组成更加合理,而且具有大豆蛋白所不具有的特性,易于吸收,更适合添加到各种营养食品中。6.选出两种酶解产品,进行产品元素分析,4#样品所得结果:含氮量为13.44%、含氢量7.469%,含碳量44.49%,含硫量0.815%。5#样品所得结果:含氮量为12.79%,含氢量8.242%,含碳量44.78%,含硫量0.857%。
摘要第2-4页
ABSTRACT第4-5页
1 绪论第8-22页
    1.1 选题背景与意义第8-11页
        1.1.1 选题背景第8-10页
        1.1.2 研究意义第10-11页
    1.2 大豆蛋白简介第11-14页
        1.2.1 大豆蛋白的分离方法第12-14页
        1.2.2 大豆蛋白在食品应用中的现状及应用的目的、作用以及意义第14页
    1.3 大豆多肽的概念第14-15页
    1.4 大豆多肽的功能特性第15-16页
    1.5 大豆肽在食品工业中的应用第16-17页
        1.5.1 大豆肽在营养疗效食品中的应用第16页
        1.5.2 大豆肽在功能和保健食品中的应用第16页
        1.5.3 大豆肽在运动员食品中的应用第16-17页
        1.5.4 大豆肽在发酵工业中的应用第17页
        1.5.5 在其他食品工业中的应用第17页
    1.6 大豆多肽的国内外研究现状第17-19页
    1.7 大豆多肽生产存在的主要问题第19-20页
    1.8 大豆多肽的发展前景第20-21页
    1.9 本课题研究的主要内容第21-22页
2 实验部分第22-30页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 实验试剂第22页
        2.1.2 实验仪器第22-23页
    2.2 实验方法第23-24页
        2.2.1 样品及其制备第23页
        2.2.2 大豆豆粕酶解工艺实验简易流程图第23-24页
        2.2.3 实验步骤第24页
    2.3 蛋白质的含量测定第24-27页
        2.3.1 凯氏定氮的原理第24-25页
        2.3.2 试剂的配制第25页
        2.3.3 实验仪器装置图第25-27页
        2.3.4 蛋白质含氮量测定的操作方法第27页
        2.3.5 蛋白质含氮量测定计算公式第27页
    2.4 蛋白质水解度的测定第27-30页
        2.4.1 蛋白质水解度的测定原理第28页
        2.4.2 蛋白质水解度的测定方法选择第28页
        2.4.3 蛋白质水解度测定的操作方法第28-30页
3 实验结果与讨论第30-42页
    3.1 酶的选择第30-31页
        3.1.1 选酶实验步骤第30-31页
        3.1.2 选酶实验结果第31页
    3.2 单因素实验第31-35页
        3.2.1 酶的最适用量第31-32页
        3.2.2 最适底物浓度的确定第32页
        3.2.3 最适pH的确定第32-33页
        3.2.4 最适酶解时间的确定第33-34页
        3.2.5 最适酶间隔时间的确定第34页
        3.2.6 最适反应温度的确定第34-35页
    3.3 正交实验第35-37页
    3.4 结果与分析第37-42页
        3.4.1 苦味评定第37页
        3.4.2 产品元素分析第37页
        3.4.3 红外光谱图表征第37-38页
        3.4.4 SDS-PAGE电泳第38-39页
        3.4.5 氨基酸含量分析第39-42页
4 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
附录第47页
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