夏枯草注射液对胰腺癌细胞PANC-1凋亡的影响及机制研究
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研究目的:通过研究夏枯草注射液(Injection of Prunella Vulgaris,IPV)对人胰腺癌细胞系PANC 1的干预,观察其对胰腺癌细胞凋亡的影响,并探索其促进胰腺癌细胞凋亡的机制。研究方法:1.体外培养胰腺癌细胞PANC 1,以IPV干预PANC 1细胞。实验共分6组,1个空白对照组和5个药物干预组,干预组分别给予30、60、90、120、150mg/ml五个浓度梯度的IPV,干预12h、24h、36h和48h后,分别通过倒置相差显微镜观察各组胰腺癌细胞生长情况。2. MTT比色法观察PANC 1细胞被药物干预后的存活率,绘制不同干预时间IPV对PANC 1细胞的存活率曲线,并计算半数有效抑制浓度(IC50)。3.应用流式细胞仪技术,通过AnnexinV EGFP/PI双染法检测不同浓度组的IPV对胰腺癌细胞干预24h后的细胞凋亡率。4. RT PCR检测细胞Bax与bcl 2的相对表达量的变化。研究结果:1.倒置显微镜镜观察显示:随着IPV干预剂量的增加,胰腺癌细胞增殖明显受抑制,贴壁细胞逐渐减少。2. MTT检测结果显示:随着药物剂量的增加和干预时间的延长,IPV对PANC 1细胞抑制增殖作用逐渐增强,且在一定剂量范围内,明显具有剂量时间依赖性(P<0.05),具有统计学意义,IC50=47.75mg/ml。3.流式细胞检测结果显示:IPV可以诱导PANC 1细胞凋亡,随着药物剂量的增加,PANC 1细胞的凋亡也随之增加,且诱导凋亡的作用主要表现在早期凋亡。4. RT PCR检测结果显示:在IPV作用24h后,可使PANC 1细胞上调Bax和下调bcl 2基因表达。在一定剂量范围内,随着药物剂量的增加,bcl 2的表达逐渐降低,并呈现浓度依赖性(P<0.05);而Bax的表达逐渐增加,亦呈现浓度依赖性(P<0.05);Bax/bcl 2的比值逐渐增加,亦呈现浓度依赖性(P<0.05)。研究结论:1. IPV能抑制PANC 1胰腺癌细胞的增殖,并在一定剂量范围内呈剂量时间依赖性;2. IPV能诱导PANC 1胰腺癌细胞凋亡;3.其机制:上调了Bax的表达,下调了bcl 2的表达,从而发挥了诱导凋亡、抑制增殖的作用。
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
前言 | 第9-10页 |
实验材料 | 第10-16页 |
实验方法 | 第16-23页 |
实验结果 | 第23-25页 |
讨论 | 第25-27页 |
结论 | 第27-28页 |
附表 | 第28-29页 |
附图 | 第29-33页 |
参考文献 | 第33-35页 |
综述 | 第35-40页 |
参考文献 | 第38-40页 |
个人简介 | 第40-41页 |
负责课题 | 第40页 |
发表论文 | 第40-41页 |
致谢 | 第41页 |
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