Part I: NOGO-A与NG-R在星形胶质细胞瘤中的表达目的通过检测正常人脑组织和星形胶质瘤组织中NOGO-A与NG-R(Nogo-A Receptor)的表达,探讨NOGO-A、NG-R与星形胶质瘤恶性程度的关系及其两者之间的相关性。方法取正常人脑组织8例和星形胶质瘤组织37例,采用免疫组织化学染色法检测各组织中NOGO-A与NG-R蛋白的表达,并用免疫印迹法(Western blot)对各组蛋白进行定量分析;采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组织中NOGO-A与NG-R mRNA水平。结果NOGO-A与NG-R在正常脑组织中仅有少量表达,在星形胶质瘤细胞膜和细胞浆及血管内皮细胞中有显著表达。随着脑胶质瘤病理分级的增高,NOGO-A与NG-R表达明显增强(P<0.05),NOGO-A和NG-R mRNA及蛋白表达均存在正相关(r=0.990,P<0.05;r=0.943,P<0.05)。结论NOGO-A与NG-R在人星形胶质瘤组织中表达强度与其恶性程度呈正相关,且NOGO-A与NG-R的表达之间有内在联系,推测NOGO-A与NG-R共同促进星形胶质瘤的形成与发展。Part II: NOGO-A与NG-R在少突胶质细胞瘤中的表达目的通过检测正常人脑组织和少突胶质细胞瘤组织中NOGO-A与NG-R的表达,探讨NOGO-A、NG-R在少突胶质瘤形成过程中的作用。方法取正常人脑组织8例和少突胶质细胞瘤组织12例,采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学染色方法检测各组织中NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白的表达。结果NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白在正常脑组织中仅有少量表达,在少突胶质细胞瘤中高表达。结论NOGO-A与NG-R在人少突胶质细胞瘤的表达明显高于正常组织,推测NOGO-A与NG-R共同促进少突胶质细胞瘤形成与发展。Part III: NOGO-A与NG-R在神经母细胞瘤的表达目的通过检测正常人脑组织和神经母细胞瘤组织中NOGO-A与NG-R的表达,探讨NOGO-A、NG-R与神经母细胞瘤恶性程度的关系。方法取正常人脑组织8例和神经母细胞瘤组织35例,采用免疫组化染色方法检测各组织中NOGO-A与NG-R的表达。结果NOGO-A与NG-R在正常脑组织中有少量表达,在神经母细胞瘤中高表达。随着神经母细胞瘤病理级别的升高,NOGO-A和NG-R的表达逐渐增强。结论人神经母细胞瘤恶性程度越高,NOGO-A与NG-R表达越强,推测NOGO-A与NG-R共同促进神经母细胞瘤形成与发展。Part IV: NOGO-A与NG-R在原始神经外胚叶肿瘤中的表达目的通过检测正常人脑组织和原始神经外胚叶肿瘤组织中NOGO-A与NG-R的表达,探讨NOGO-A与NG-R在原始神经外胚叶肿瘤形成过程中的作用。方法取正常人脑组织8例和原始神经外胚叶肿瘤组织15例,采用免疫组织化学染色方法检测各组织中NOGO-A与NG-R蛋白的表达。结果NOGO-A与NG-R在正常脑组织中有少量表达,在原始神经外胚叶肿瘤组织中有高表达。结论NOGO-A与NG-R在人原始神经外胚叶肿瘤中强表达,推测NOGO-A与NG-R在人原始神经外胚叶肿瘤的形成与发展过程中有重要作用。Part I: NOGO-A与NG-R对PC12细胞轴突生长发育的影响目的通过检测原始神经元细胞生长分化过程中NOGO-A与NG-R的表达,探讨NOGO-A与NG-R在原始神经元细胞生长发育过程中的作用。方法培养大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞,用神经生长因子诱导其分化。采用免疫荧光染色、逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)等方法检测PC12细胞生长分化过程中NOGO-A与NG-RmRNA及蛋白的表达及变化,并于倒置显微镜下随机取20视野计数观察细胞增值和轴突生长情况。结果未分化的PC12细胞中未检测到NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白表达。经神经生长因子诱导的PC12细胞,细胞轴突不断生长,NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白的表达逐渐增高(P<0.05)。结论PC12细胞向交感神经元分化的过程中NOGO-A与NG-R的表达逐渐增强,推测NOGO-A与NG-R在神经元发育早期可能促进轴突生长。Part II: NOGO-A与NG-R对PC12细胞神经内分泌的影响目的通过检测PC12细胞生长发育过程中多巴胺的分泌及NOGO-A与NG-R的表达,探讨NOGO-A与NG-R对神经元细胞的神经内分泌的调节。方法培养大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞,用神经生长因子诱导其分化。分别取未经诱导、诱导后第一天、第三天、第五天、第七天的细胞培养液,采用ELISA方法检测各组培养液中多巴胺(Dopamine,DA)浓度,同时采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)等方法检测培养液中NOGO-A与NG-RmRNA及蛋白的表达及变化。结果未经诱导的PC12细胞培养液中检测到少量多巴胺,未检测到NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白表达。诱导后第一天、第三天、第五天、第七天的PC12细胞培养液中多巴胺浓度逐渐增高,NOGO-A与NG-R mRNA及蛋白表达也逐渐增强(P<0.05)。结论PC12细胞向交感神经元分化的过程中,NOGO-A与NG-R的表达与多巴胺分泌水平同步升高,推测在神经元细胞的生长发育过程中,NOGO-A与NG-R可能具有调节神经内分泌的作用。
