乙醛酸通路调控促进聚苹果酸合成研究

出芽短梗霉论文 聚苹果酸论文 乙醛酸通路论文 溶剂胁迫论文
论文详情
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词第10-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 出芽短梗霉概述第12页
    1.2 聚苹果酸的研究进展第12-17页
        1.2.1 聚苹果酸理化特性第12-13页
        1.2.2 聚苹果酸应用前景第13-15页
        1.2.3 聚苹果酸的生物合成第15-16页
        1.2.4 聚苹果酸生物合成途径第16-17页
    1.3 外源环境压力第17-19页
        1.3.1 碳源代谢调控第17-18页
        1.3.2 有机溶剂胁迫第18-19页
    1.4 乙醛酸通路调控第19-22页
        1.4.1 乙醛酸通路第19-20页
        1.4.2 Cat8转录因子第20-22页
第二章 引言第22-26页
    2.1 研究背景第22-23页
    2.2 研究目的和意义第23页
    2.3 主要研究内容第23页
    2.4 技术思路第23-26页
第三章 出芽短梗霉碳利用与代谢组分析第26-36页
    3.1 材料与方法第26-29页
        3.1.1 菌株和培养基第26页
        3.1.2 摇瓶发酵第26-27页
        3.1.3 5 L机械搅拌式分批发酵第27页
        3.1.4 PMA、生物量和残糖分析第27页
        3.1.5 总糖测定第27页
        3.1.6 非靶向代谢组GC-MS样品淬灭第27页
        3.1.7 GC-MS前处理和上机分析[133]第27-28页
        3.1.8 比较代谢组学数据分析第28-29页
    3.2 结果与讨论第29-33页
        3.2.1 不同碳源对PMA产量的影响第29-30页
        3.2.2 蔗糖和葡萄糖发酵过程比较第30-31页
        3.2.3 比较代谢组学分析第31-33页
    3.3 本章小结第33-36页
第四章 有机溶剂胁迫强化乙醛酸通路第36-44页
    4.1 材料与方法第36-40页
        4.1.1 试剂和引物第36-37页
        4.1.2 菌株和培养基第37页
        4.1.3 有机试剂添加发酵第37页
        4.1.4 乙醇浓度优化第37页
        4.1.5 出芽短梗霉(A.pullulansCCTCCM2012223)总RNA的提取第37-38页
        4.1.6 RT-qPCR检测关键基因相对表达水平第38-39页
        4.1.7 胞内总蛋白提取第39页
        4.1.8 总蛋白测定第39页
        4.1.9 关键基因酶活测定第39-40页
    4.2 结果与讨论第40-43页
        4.2.1 醇分子对出芽短梗霉发酵产PMA的影响第40-41页
        4.2.2 优化乙醇浓度第41-42页
        4.2.3 乙醇压力胁迫机制初步分析第42-43页
    4.3 本章小结第43-44页
第五章 乙醛酸通路调控对聚苹果酸合成的影响第44-68页
    5.1 材料第44-47页
        5.1.1 菌种和质粒第44页
        5.1.2 试剂和引物第44-46页
        5.1.3 主要培养基第46页
        5.1.4 主要溶液第46-47页
    5.2 方法第47-52页
        5.2.1 出芽短梗霉(A.pullulansCCTCCM2012223)基因组DNA的提取第47页
        5.2.2 出芽短梗霉(A.pullulansCCTCCM2012223)总RNA的提取第47页
        5.2.3 RNA反转录成cDNA第47页
        5.2.4 目的基因CDS扩增和测序第47-49页
        5.2.5 icl和mls过表达载体构建第49-50页
        5.2.6 过表达载体转入农杆菌第50页
        5.2.7 农杆菌介导转化出芽短梗霉(A.pullulansCCTCCM2012223)第50页
        5.2.8 过表达菌株筛选验证第50-51页
        5.2.9 过表达菌株验证第51页
        5.2.10 RT-qPCR检测icl、mls基因相对表达水平第51页
        5.2.11 激光共聚焦亚细胞定位第51页
        5.2.12 Cat8生物信息学分析第51页
        5.2.13 Cat8目的基因CDS获取第51-52页
        5.2.14 Cat8过表达载体构建第52页
        5.2.15 过表达株摇瓶及5L发酵罐发酵第52页
        5.2.16 PMA、生物量和残糖测定第52页
    5.3 结果与讨论第52-64页
        5.3.1 icl和mls的扩增和过表达载体构建第52-54页
        5.3.2 OE::icl和OE::mls菌株筛选和验证第54-57页
        5.3.3 icl和mls蛋白定位第57-58页
        5.3.4 野生型和OE::mls菌株5L发酵罐发酵第58-59页
        5.3.5 OE::icl1菌株5L发酵罐发酵第59页
        5.3.6 Cat8生物信息学分析第59-61页
        5.3.7 Cat8扩增和载体构建第61页
        5.3.8 OE::Cat8菌株筛选和验证第61-63页
        5.3.9 5 L发酵罐OE::Cat8菌株发酵第63-64页
    5.4 本章小结第64-68页
第六章 总结与展望第68-72页
    6.1 总结第68-71页
    6.2 创新点第71页
    6.3 展望第71-72页
参考文献第72-82页
致谢第82-84页
在校期间科研成果第84页
    发表论文第84页
    专利第84页
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