三种磺胺类药物在中国对虾体内的药物代谢动力学特征

磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶及磺胺对甲氧嘧啶是水产养殖中常用的磺胺类药物，药物代谢酶P450是参与中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）体内药物代谢的主要酶类，其中的CYP2C作为主要的药物代谢酶类在磺胺类药物在中国对虾体内的药物代谢过程中起到十分重要的作用。本文通过对这三种磺胺类药物在中国对虾体内的药物代谢动力学特征的研究，得到磺胺类药物在中国对虾体内的代谢规律，指导磺胺类药物在中国对虾养殖过程中科学合理的使用。并探索了药物代谢与CYP2C基因表达情况的关系。研究分为三部分：第一部分：采用高效液相色谱法对磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺嘧啶(SD)及磺胺对甲氧嘧啶(SMD)在中国对虾体内的药物代谢动力学特征进行研究。结果表明：温度为(24.6±2.4)℃，单次口服剂量均为l00mg·kg-1，三种磺胺类药物在中国对虾体内的血药经时过程均符合一级吸收二室开放模型，SM2的主要药动学参数T1/2β、AUC(0-72)、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为25.812h、34.066mg·L-1·h-1、94.553L·kg-1、2.608L·h-1·kg-1、2h、1.07mg·L-1；SD的主要药动学参数T1/2β、AUC(0-72)、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为46.446h、45.39mg·L-1·h-1、97.207L·kg-1、1.504L·h-1·kg-1、1h、1.17mg·L-1；SMD的主要药动学参数T1/2β、AUC(0-72)、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为66.296h、65.917mg·L-1·h-1、40.015L·kg-1、0.763L·h-1·kg-1、2h、2.00mg·L-1。综上所述，SMD在中国对虾体内分布比SM2、SD更广泛，SM2的消除相半衰期最短，SD次之，SMD消除相半衰期最长。第二部分：采用高效液相色谱法测定中国对虾肝胰腺、肌肉及鳃中磺胺类药物的含量，磺胺类药物包括磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺嘧啶(SD)及磺胺对甲氧嘧啶(SMD)。3种磺胺类药物单次口服剂量均为l00mg·kg-1，养殖期间水温为(24.6±2.4)，比较3种磺胺类药物在中国对虾鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β、CL、AUC(0-72)和Tmax等各主要参数。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为：23.067、34.162和16.559h，SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为：29.157、34.272和27.929h，SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为：47.657、55.271和32.237h。在同一组织中，SM2的消除速度最快，SD次之，SMD的消除速度最慢。口服同一磺胺类药物，在肌肉中消除速度最快，鳃次之，肝胰腺中的消除速度最慢。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为：0.673、0.171和0.464L·h-1·kg-1，SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为：0.496、0.214和0.463L·h-1·kg-1，SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为：0.29、0.082和0.362L·h-1·kg-1，所以同一组织中SMD的清除率最低，同一种磺胺类药物在鳃中清除最快。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0-72)分别为：138.476、493.02和206.572mg·L-1·h-1，SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0-72)分别为：147.919、379.039和186.495mg·L-1·h-1，SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0-72)分别为：218.024、629.311和229.819mg·L-1·h-1，口服同一种磺胺类药物在肝胰腺中的药物吸收量是最大的，比较同一组织中的药物吸收量，SMD较高一些。综上所述，口服3种磺胺类药物72h内中国对虾肝胰腺中的药物残留最为严重。第三部分是应用RT-PCR以及RACE技术，克隆中国对虾细胞色素P450(CYP2C)基因片段，用相应的软件进行分析，并用荧光定量RT-PCR研究分析中国对虾CYP2C基因在组织中表达分布情况，以及经磺胺二甲嘧啶和磺胺对甲氧嘧啶口服给药后中国对虾肝胰腺中表达变化的情况。荧光定量RT-PCR研究结果表明，CYP2C在肌肉、肝胰腺、鳃、血液、甲壳、胃、和肠中均有分布，在肝胰腺中表达量最高，在血液中表达量最少。磺胺二甲嘧啶和磺胺对甲氧嘧啶在中国对虾肝胰腺中药物浓度的变化趋势与CYP2C基因在中国对虾肝胰腺中表达量的变化趋势基本相一致。在相同剂量给药浓度的情况下，磺胺二甲嘧啶在中国对虾肝胰腺中的CYP2C基因表达量的最大值要明显高于磺胺对甲氧嘧啶。