摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 果实糖代谢的研究进展 | 第12-18页 |
1.1.1 果实中糖组分及积累类型 | 第12-13页 |
1.1.2 果实糖代谢相关酶的反应及调控途径 | 第13-14页 |
1.1.3 几种典型果树果实糖代谢研究 | 第14-18页 |
1.2 植物HXK国内外研究进展 | 第18-21页 |
1.2.1 植物HXK简介 | 第18页 |
1.2.2 植物HXK存在形式与分类 | 第18-19页 |
1.2.3 植物HXK基因家族 | 第19页 |
1.2.4 植物HXK基因分离与克隆 | 第19-20页 |
1.2.5 植物HXK基因表达分析及转基因功能验证的研究 | 第20-21页 |
1.3 生物信息学分析研究进展概述 | 第21-23页 |
1.3.1 生物信息学概述 | 第21页 |
1.3.2 生物信息学数据库 | 第21-22页 |
1.3.3 序列分析与相关软件 | 第22页 |
1.3.4 植物HXK基因生物信息学分析研究 | 第22-23页 |
1.4 研究目的及内容 | 第23-25页 |
1.4.1 研究目的意义 | 第23页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第23-25页 |
2 枇杷HXK基因家族生物信息学分析 | 第25-38页 |
2.1 试验设计与方法 | 第25-26页 |
2.1.1 枇杷HXK基因家族序列的获得 | 第25页 |
2.1.2 枇杷HXK基因序列相似性比较及蛋白多序列比对 | 第25页 |
2.1.3 枇杷HXK基因及蛋白序列特性预测 | 第25-26页 |
2.1.4 枇杷HXK蛋白二级结构及保守域的预测 | 第26页 |
2.1.5 枇杷HXK氨基酸同源性比较及系统进化树的构建 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-36页 |
2.2.1 枇杷HXK基因家族成员的获得及比较分析 | 第26-30页 |
2.2.2 枇杷HXK基因及蛋白序列特性分析 | 第30-33页 |
2.2.2.1 枇杷HXK核苷酸及氨基酸基本理化性质分析 | 第30页 |
2.2.2.2 枇杷HXK蛋白亲/疏水性预测分析 | 第30-31页 |
2.2.2.3 枇杷HXK蛋白跨膜区域预测分析 | 第31-32页 |
2.2.2.4 枇杷HXK蛋白信号肽预测 | 第32-33页 |
2.2.3 枇杷HXK蛋白二级结构的预测分析 | 第33页 |
2.2.4 枇杷HXK氨基酸序列保守结构域的预测分析 | 第33页 |
2.2.5 枇杷HXK蛋白磷酸化位点及功能位点的预测分析 | 第33-34页 |
2.2.5.1 枇杷HXK蛋白磷酸化位点预测分析 | 第33-34页 |
2.2.5.2 枇杷HXK蛋白功能位点预测分析 | 第34页 |
2.2.6 HXK氨基酸序列同源性和进化分析 | 第34-36页 |
2.3 讨论 | 第36-38页 |
2.3.1 植物HXK基因及编码蛋白的理化特性 | 第36页 |
2.3.2 枇杷HXK有明确的参与糖代谢的功能域 | 第36-37页 |
2.3.3 枇杷HXK基因与家族其他成员间同源进化关系密切 | 第37-38页 |
3 枇杷EJHXK遗传转化烟草及功能的初步验证 | 第38-51页 |
3.1 农杆菌介导法转化烟草 | 第38-40页 |
3.1.1 试验材料、试剂及仪器设备 | 第38页 |
3.1.1.1 植物材料 | 第38页 |
3.1.1.2 主要实验试剂 | 第38页 |
3.1.1.3 主要实验仪器设备 | 第38页 |
3.1.2 试验设计与方法 | 第38-40页 |
3.1.2.1 无菌外植体的获得 | 第38-39页 |
3.1.2.2 烟草外植体对潮霉素的浓度筛选 | 第39页 |
3.1.2.3 烟草叶片的遗传转化过程 | 第39-40页 |
3.2 转基因植株的检测 | 第40-42页 |
3.2.1 试验材料、试剂及仪器设备 | 第40页 |
3.2.1.1 植物材料 | 第40页 |
3.2.1.2 试验主要试剂 | 第40页 |
3.2.1.3 试验主要仪器 | 第40页 |
3.2.1.4 PCR引物设计 | 第40页 |
3.2.2 试验设计与方法 | 第40-42页 |
3.2.2.1 烟草叶片DNA的提取 | 第40-41页 |
3.2.2.2 转化烟草植株的PCR分子检测 | 第41-42页 |
3.3 枇杷EJHXK基因在转基因烟草中功能的初步鉴定 | 第42-43页 |
3.3.1 试验材料、试剂和仪器 | 第42页 |
3.3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.3.1.2 试验主要试剂 | 第42页 |
3.3.1.3 试验主要仪器 | 第42页 |
3.3.2 试验设计与方法 | 第42-43页 |
3.3.2.1 转基因植株与非转基因植株生理、形态比较 | 第42页 |
3.3.2.2 转基因植株发育过程中糖含量的提取测定 | 第42-43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-50页 |
3.4.1 潮霉素使用浓度的确定 | 第43-44页 |
3.4.2 烟草的转化与抗性植株筛选 | 第44-45页 |
3.4.3 转基因植株DNA提取分析 | 第45-46页 |
3.4.4 转基因植株PCR检测分析 | 第46页 |
3.4.5 转基因植株与非转基因植株生理、形态比较分析 | 第46-48页 |
3.4.5.1 T1代转基因烟草植株的PCR检测 | 第46-47页 |
3.4.5.2 T1代转基因烟草植株与野生型植株的生理、形态差异分析 | 第47-48页 |
3.4.6 转基因植株发育过程中糖含量测定分析 | 第48-50页 |
3.4.6.1 糖标准溶液HPLC测定 | 第48-49页 |
3.4.6.2 烟草叶片中各糖的动态分析 | 第49-50页 |
3.5 讨论 | 第50-51页 |
4 结语 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-59页 |
个人简介 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |