目的:虽然A型行为作为易罹患心血管疾病的独立预测因素已经被认同,但对于具有A型行为人格特质的心血管病人来说,在慢性和急性应激事件的叠加诱导下,导致动脉硬化、血栓形成的炎症机制的研究还是不充分的。本研究分为三个层面进行:一、探讨健康个体不同行为类型组（A,B,中间）的先天固有免疫系统TLR4/ NF-κB/ IL-6及IL-18信号转导通路激活程度的差异,及与血清儿茶酚胺、A型行为程度的关系;二、探讨A型行为交感神经活化与外周血单核细胞TLR4信号通路激活关系的可能机制;三、通过临床研究,以颈动脉硬化和急性冠脉综合征患者为对象,进一步验证A型行为者单核细胞TLR4信号通路持续激活与颈动脉硬化及ACS的关系。对象:随机抽取09级某海军院校男生476人,大连医科大学女生424人,作为第一部分研究（健康人）对象;从第一部分三种行为被试中随机抽出A型8人,B型8人,中间型8人作为第二部分研究对象;从2009年4月至2010年5月间,连续收集在大连市体检中心、解放军第210医院心内科、中心医院心内科门诊,接受颈动脉超声检查符合颈动脉硬化诊断标准者275人,作为颈动脉硬化组,同时收集301名健康对照组,作为第三部分研究对象;为了第四部分的研究,在大连医科大学附属二院心内科,连续收集了182名急性冠脉综合征患者,作为ACS组,第四部分的152人稳定型冠心病组（SA）来源于大连市体检中心、解放军第210医院心内科、中心医院心内科门诊,此部分的健康对照同第三部分。方法:1)第一部分:使用明尼苏达多相人格调查（MMPI-II）问卷中的A型行为分量表（MMPI-2 Type A scale）、自制一般情况调查表进行流行病学调查;常规体格和化验室检查;流式细胞仪检测术测定外周血CD14+单核细胞表面TLR4蛋白的表达;采用ELISA法测定血清中IL-6、IL-18水平、血清肾上腺素和去甲肾素水平。2)第二部分:使用方法同上,RT-PCR技术测定TLR4mRNA;免疫组化技术测定NF-κBP65蛋白表达。药物诱导:采用分别单独使用20、30、40umol/L多巴酚丁胺（β1受体激动剂）激动、15umol/L阿替洛尔（选择性β1受体抑制剂）、PKA,PKC,P38MAPK阻滞剂后再用β1受体激动剂激动、转染TLR4SiRNA后再激动等方法。3)第三部分:使用第一部分的全部方法;另行颈动脉超声检查。4)第四部分:使用第一部分的全部方法;另行心肌酶标志物检查、心电图、超声心动和冠脉造影检查、ACS病情评定、出院后随访一年等方法。统计分析:采用了x 2检验、t检验、方差分析（One-way ANOVA）、Pearson相关分析、多元线性回归和Logistic回归分析等方法。结果:第一部分健康青年A型行为者在非应激状态下血儿茶酚胺、外周血单核细胞TLR4信号通路相关因子:TLR4蛋白表达、血清IL-6和IL-18浓度显著高于B型行为和中间型行为,中间型又显著高于B型行为者;A型行为得分与其血清肾上腺素和去甲肾上腺素水平及外周血单核细胞TLR4信号通路激活程度都呈显著正相关。第二部分β1受体激动剂20、30、40umol/L的多巴酚丁胺投用呈剂量依赖性地增加了TLR4蛋白的表达、NF-kBp65蛋白表达、血清IL-6、IL-18水平;使用4种阻滞剂后再投送40umol/L多巴酚丁胺,15umol/L阿替洛尔能完全阻断多巴酚丁胺诱导的单核细胞TLR4表达,使用PKA和P38阻滞剂后能显著阻断β1受体激动剂对单核细胞TLR4蛋白表达上调作用,但单核细胞TLR4蛋白仍高于基础水平。TLR4基因沉默后,再使用β1受体激动剂后,NF-kB/IL-6和IL-18通路的激活被有效抑制。A型行为者的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路活化程度无论是基础水平还是被β1受体激动剂后都显著高于其它行为类型者;转染TLR4SiRNA后使用β1受体激动剂,A型行为者的NF-κBp65蛋白表达及血清IL-6、IL-18水平下降幅度最大,所达到程度与其它类型比较无显著差异。第三、四部分颈动脉硬化患者,其A型行为者的血清儿茶酚胺水平和外周血单核细胞TLR4信号通路激活程度都显著高于中间型和B型行为者;且A型行为得分与血清儿茶酚胺水平和外周血单核细胞TLR4信号通路激活程度都显著正相关;回归分析发现:A型行为总得分、人格维度得分、敌意维度得分、血清肾上腺素和去甲肾上腺素水平是TLR4蛋白表达的影响因素;TLR4蛋白表达、血清IL-6和IL-18水平都是影响颈动脉平均IMT水平的因素和罹患颈脉硬化的危险因素。急性冠脉综合征（ACS）患者,在ACS应激状态下,A型行为者血清儿茶酚胺持续处于高水平,外周血单核细胞TLR4信号通路持续处于高水平激活状态;A型行为者的GRACE评分和Gensini评分显著高于B型和中间型行为者;ACS患者的A型行为得分、TLR4信号通路激活程度和血清儿茶酚胺水平都与GRACE评分和Gensini评分显著正相关;血清儿茶酚胺水平、A型行为总得分、人格维度得分、敌意维度得分进入以ACS应激期单核细胞TLR4蛋白表达为因变量的回归方程;TLR4蛋白表达、血清IL-6、IL-18水平分也都进入了以Grace评分和Gensini评分为因变量的回归方程;非应激状态下,稳定型冠心病组与健康对照组比较,三种行为类型的血清儿茶酚胺水平、TLR4信号通路激活水平无显著性差异。影响ACS1年内生存预后因素分析:Logistic回归结果显示,A型行为得分、人格维度得分、敌意维度得分、血清儿茶酚胺水平、外周血单核细胞TLR4蛋白表达、血清IL-6、IL-18水平都进入了回归方程。结论:（1）β1受体激动剂诱导了单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路激活,而且是呈剂量依赖型变化,以40μmol/L多巴酚丁胺诱导激活效果最明显;（2）TLR4、β1受体、PKA、p38MAPK介入了β1受体激动剂诱导的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路的激活;（3）A型行为者无论是非应激还是应激状态下,是通过体内较高的儿茶酚胺水平介导而使外周血单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路持续处于激活状态的。（4）A型行为易化了β1受体激动剂诱导的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路激活;（5）颈动脉硬化临床研究揭示了同样的结果,而且发现可否患颈动脉硬化和颈动脉内中膜平均厚度的危险因素的确是与A型行为者交感神经的高活化诱导的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路激活有关;（6）急性冠状动脉综合症的严重程度与A型行为者交感神经活化诱导的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路激活程度相关;（7）急性冠状动脉综合症1年内发生不良心血管事件的主要影响因素:也与A型行为交感神经活化诱导的单核细胞TLR4/ NF-κB/促炎因子信号通路激活程度相关。
