[研究目的]1.研究宣威肺腺癌XWLC-05细胞和普通肺腺癌A549细胞放射敏感性是否存在差异。2.加入LY294002抑制剂后,研究XWLC-05细胞和A549细胞的放射敏感性情况,进一步检测细胞周期分布及凋亡变化。[研究方法]1.细胞放射克隆形成实验测定细胞剂量存活分数,采用线性二次函数模型(L-Q模型)和单击多靶模型拟合细胞辐射剂量存活曲线,分别求出放射生物学参数D0、Dq、N、α、β、α/β和SF2值。2.在集落克隆形成实验的同时,在各剂量照射点取母本A549细胞和XWLC-05细胞、LY294002处理A549和XWLC-05细胞分别培养0、12、24、48、72小时,制成单细胞悬液,采用流式细胞术及TUNEL法分别检测细胞周期分布及凋亡指数。[研究结果]1.克隆形成实验结果显示：随着照射剂量的增加,A549细胞和XWLC-05细胞的存活分数均下降；加入LY294002抑制剂后,两种细胞的存活分数均比未加入抑制剂时降低。同一照射剂量下,XWLC-05细胞均比A549细胞存活分数低。2.流式细胞术检测周期结果显示：无论是A549细胞还是XWLC-05细胞,单纯照射时,均会出现G2/M期细胞阻滞,且呈剂量依赖性。单纯加入LY29400220μM时,对G2/M期细胞比例无明显影响。药物联合照射时,A549细胞G2/M期比例较母本细胞稍有增加,较单纯照射减少；XWLC-05细胞G2/M期比例较单纯照射时增加。3.TUNEL检测凋亡结果表明：无论是A549细胞还是XWLC-05细胞,单独照射时,随着照射剂量的增加,凋亡率均增加。单独加入LY29400220u M时,凋亡率较母本细胞稍有增加。药物联合照射,凋亡率较单独照射时增加。但XWLC-05细胞凋亡率更高。[结论]1.Ly294002对A549及XWLC-05细胞均有放射增敏作用。2. XWLC-05细胞与A549细胞之间存在细胞固有的放射敏感性差异。3.单纯药物抑制PI3K/AKt通路对G2/M期阻滞影响不明显,只有联合照射才能引起细胞周期阻滞,从而使凋亡率增加。
