一种南海柳珊瑚次级代谢产物及其抗藤壶污损活性初步研究

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在海洋特殊的生态环境中,许多低等无脊椎动物,如柳珊瑚,软珊瑚等,通过拒捕食、抗生物附着、鱼毒等生态学作用形成自身的化学防御体系。因此,以化学生态学作用为指导,寻找海洋中具有抗生物污损活性的化合物,对生物防污剂的筛选发现具有现实意义。本研究从中国热带海洋珊瑚礁中选择一种柳珊瑚,运用天然产物化学的方法,以抗藤壶污损等活性为指导,从柳珊瑚次级代谢产物中筛选发现抗污损活性化合物,为海洋防污剂的研究和开发提供基础资料。选择采自中国涠洲岛海域的柳珊瑚Dichotella gemmacea (Valenciennes),在抗藤壶幼虫附着活性模型指导下,运用色谱分离技术(硅胶、凝胶、反相硅胶等柱层析和半制备HPLC等)和现代波谱分析技术(NMR, MS, IR, UV等),追踪分离具有抗污损活性的次级代谢产物。已分离鉴定15个化合物,包括brianane型二萜化合物7个,分别为juncin D (1), juncin P (2), juncin R (3), juncin S (4), gemmacolide C (5), junceellolide D (6), junceellin (7);甾体类化合物5个,分别为胆甾醇(8), ergosterol peroxide (9), cerevisterol (10), junceelloside C (11), junceelloside D (12);甘油醚类化合物2个,分别为正十六酸甘油酯(13), (R)-1-O-nonadecyl-3-O-hexadecanoyl glycerol (14);苯衍生物1个,即邻苯二甲酸二丁酯(15)。其中化合物1, 3, 4, 5, 7, 9, 10, 11, 12为首次从该柳珊瑚中分离获得。采用抗藤壶活性模型,结合卤虫致死活性模型和斑马鱼毒性模型,对化合物进行了化学防御活性筛选和评价。发现,brianane型二萜化合物1, 2和6在10μg/mL时对藤壶Balanus amphitrite幼虫附着的抑制率为100%,其中,化合2和6具有强抗藤壶附着活性,抑制藤壶幼虫附着的EC50值分别为0.77μg/mL和0.80μg/mL。同时,化合物2还显示卤虫Artemia salina致死活性(50μg/mL抑制率为85%);化合物6对斑马鱼Danio rerio胚胎发育还显示了较强的毒性,致死LC50为51.4μg/mL,致畸EC50为41.6μg/mL,致卵凝结EC50为56.5μg/mL。高度氧化的甾体化合物9和甾体皂苷化合物11对藤壶幼虫的附着具有中等强度的抑制活性。本研究从海洋化学生态学的研究方式入手,以抗藤壶污损等活性为指导,从柳珊瑚次级代谢产物中筛选发现抗污损活性化合物,探讨次级代谢产物的化学生态效应,为寻找高效、天然海洋防污剂提供了基础资料。
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 前言第12-23页
    1. 柳珊瑚中的次级代谢产物及活性的研究进展第14-22页
        1.1 柳珊瑚中的二萜类化合物第14-20页
            1.1.1 Brianane 型二萜第14-15页
            1.1.2 Cembradiene 型二萜第15-17页
            1.1.3 Gersolane 型二萜第17-18页
            1.1.4 Pseudopterane 型二萜第18-19页
            1.1.5 Eumcellane 型二萜类化合物第19-20页
        1.2 甾体类化合物第20-21页
        1.3 柳珊瑚中具有抗污损活性化合物第21-22页
    2. 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 中国柳珊瑚 Dichotella gemmacea 次级代谢产物的分离及结构鉴定第23-41页
    1. 引言第23页
    2. 实验部分第23-26页
        2.1 实验材料与试剂第23页
        2.2 实验仪器第23-24页
        2.3 实验方法第24-26页
            2.3.1 粗提物及各相浸膏的获得第24页
            2.3.2 生物样品次级代谢产物的分离和纯化第24页
            2.3.3 次级代谢产物分析及结构表征第24页
            2.3.4 抗藤壶附着模型第24-25页
            2.3.5 卤虫致死活性模型第25页
            2.3.6 斑马鱼鱼毒活性模型第25-26页
    3. 结果与讨论第26-41页
        3.1 柳珊瑚 D. gemmacea 次级代谢产物的分析与分离第26-27页
        3.2 典型化合物的结构解析第27-32页
        3.3 化合物的波谱数据第32-38页
        3.4 化学防御活性测试第38-41页
结语与创新点第41-42页
综述第42-53页
     参考文献第51-53页
参考文献第53-57页
致谢第57-58页
附图第58-63页
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