RNA干扰对PANC-1胰腺癌细胞hTERT基因表达及细胞增值凋亡的研究

重组质粒论文 hTERT论文 RNAi论文 PANC-1细胞论文 增值论文 凋亡论文 流式论文
论文详情
第一部分重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞及其沉默效应的研究目的:用重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,了解其对hTERT-siRNA表达的影响,初步观察其在体外细胞水平上抗胰腺癌的作用。方法:通过脂质体2000将重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染PANC-1细胞,通过杀稻瘟菌素进行阳性细胞筛选2周,提取RNA,进行RT-PCR检测。结果:RT-PCR结果显示:转染131、141干扰片段的PANC-1细胞中hTERT-mRNA的表达较NC阴性对照和未转质粒的PANC-1细胞对照中的hTERT-mRNA表达水平显著下降。同时内参对照GAPDH,各细胞间无明显差别。结论:重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA能特异性的诱导同源互补的mRNA降解,下调hTERT mRNA表达,具有良好的RNAi沉默效应。第二部分重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞后对癌细胞凋亡及增值的影响目的:用重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,观察其对胰腺癌PANC-1细胞的凋亡和增值的作用。方法:通过已成功转染了重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA胰腺癌PANC-1细胞,48小时后收集细胞,经Annexin V、PI及Brdu染色,应用流式细胞仪观察细胞的凋亡及增值情况。结果:流式结果显示:转染112、121、131、141干扰片段的PANC-1细胞晚期凋亡较NC阴性对照和未转质粒的PANC-1细胞明显增多,但对早期凋亡无明显影响,对转染112、121、131、141干扰片段的PANC-1细胞的增值均有不同程度的影响,其中131、141对增值影响更明显。结论:hTERTsiRNA干扰能通过特异性抑制hTERTmRNA表达来抑制肿瘤细胞端粒酶的表达,进而达到在体外抑制胰腺癌细胞生长、增殖,促进胰腺癌细胞凋亡的作用,提示hTERT mRNA是端粒酶活性的重要影响因子,是通过降低端粒酶活性来治疗胰腺癌的可靠位点。
缩略语表第5-6页
引言第6-9页
第一部分 重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-mi R-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞及其沉默效应的研究第9-32页
    摘要第9-10页
    Abstract第10-11页
    材料和方法第11-28页
    结果第28-32页
第二部分 重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-hTERT-siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞后对癌细胞凋亡及增值的影响第32-42页
    摘要第32-33页
    Abstract第33-34页
    材料和方法第34-36页
    结果第36-42页
讨论第42-51页
结论第51-52页
参考文献第52-56页
综述第56-64页
    参考文献第61-64页
致谢第64页
论文购买
论文编号ABS542875,这篇论文共64页
会员购买按0.30元/页下载,共需支付19.2
不是会员,注册会员
会员更优惠充值送钱
直接购买按0.5元/页下载,共需要支付32
只需这篇论文,无需注册!
直接网上支付,方便快捷!
相关论文

点击收藏 | 在线购卡 | 站内搜索 | 网站地图
版权所有 艾博士论文 Copyright(C) All Rights Reserved
版权申明:本文摘要目录由会员***投稿,艾博士论文编辑,如作者需要删除论文目录请通过QQ告知我们,承诺24小时内删除。
联系方式: QQ:277865656