自噬相关基因Beclin-1、ATG7、ATG3、LC3在脑缺血再灌注大鼠脑组织的表达

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目的探讨局灶性脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤时,受损大脑皮质中bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)、自噬相关基因7(autophagy related gene7,ATG7)、自噬相关基因3(autophagy related gene 3,ATG3)和自噬微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein1 light chain3,LC3)的表达规律。方法将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)和模型组(IR组)。其中模型组又分为再灌注IR 0h、1h、3h、6h、12h、24h六个亚组。采用大脑中动脉栓塞术(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物苏醒后采用神经功能缺损评分,模型制备24 h后采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色及脑组织含水量方法鉴定模型是否成功。采用透射电镜观察各组大鼠大脑神经元的自噬情况,采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Beclin-1、ATG7、ATG3和LC3的表达规律。结果模型鉴定结果显示:sham组大鼠的行为学表现正常,神经功能未见缺损症状,脑组织未见水肿和梗死区;而IR各组大鼠均出现明显的神经功能缺损症状,IR 12h后脑组织含水量显著增高,IR 6h后可见明显的苍白梗死区,与sham组比较有显著差异。透射电镜sham组可见正常的神经元形态,而IR各组均可见到明显的神经元自噬。免疫组化染色后发现,sham组仅见少量Beclin-1阳性表达细胞,而IR不同时间点则呈现不同的表达增高趋势,其中IR 3h和IR 24h组呈现较明显的表达。免疫印迹检测Beclin-1也呈现一致的表达趋势。免疫组化和免疫印迹结果显示,ATG7、ATG3、LC3表达也呈现与Beclin-1一致的趋势。结论Beclin-1、ATG7、ATG3、LC3在调节脑缺血再灌注损伤中的细胞自噬具有重要的作用。
中文论著摘要第4-6页
英文论著摘要第6-7页
英文缩略语表第8-9页
前言第9-10页
实验材料和方法第10-14页
结果第14-21页
讨论第21-24页
结论第24-25页
本研究创新性的自我评价第25-26页
参考文献第26-29页
附录第29-44页
    综述第29-41页
        参考文献第37-41页
    在学期间科研成绩第41-42页
    致谢第42-43页
    个人简介第43-44页
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