目的:应用黄芪注射液作用于肿瘤细胞,观察其增殖情况,以选取实验细胞。方法:通过CCK-8法检测黄芪注射液作用肿瘤细胞后24h、48h和72h的生长抑制率。结果:计算各肿瘤细胞被黄芪注射液处理后的抑制率,发现药物处理肺癌A549细胞后,细胞在低药物浓度时被促进生长,而在高药物浓度时生长被抑制,且各时间点具有良好的一致性。对于肝癌HepG2细胞、肝癌Hep3B细胞和神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞而言,被黄芪注射液长时间(超过24h)处理后,细胞增殖明显受到抑制,且少见有促生长效应。但在作用24h时,大多数药物浓度组均显现出明显的细胞促生长效应,与其他时间点展现的效应不一致。结论:从黄芪注射液作用肿瘤细胞后所展现出来的效应一致方面考虑,选择肺癌A549细胞作为本次后续实验的实验对象。目的:利用黄芪注射液处理肺癌A549细胞以探索其对该细胞生物学行为的影响。方法:通过显微镜观察黄芪注射液作用细胞后的细胞形态变化;利用前期实验得到的细胞抑制率,通过改良寇氏法计算黄芪注射液作用A549细胞的半抑制浓度(IC50);通过划痕修复实验和Transwell迁移实验观察细胞水平和垂直迁移能力的变化;通过细胞侵袭实验观察细胞侵袭能力的变化;通过流式细胞术检测细胞凋亡观察细胞凋亡的变化;结果:A549细胞受到高浓度黄芪注射液作用后,出现细胞皱缩逐渐脱离贴壁;计算IC50得药物作用后24h,48h,72h的IC50分别为:776mg/ml,851mg/ml,616mg/ml;在划痕修复实验中,对照组、100mg/ml和200mg/ml浓度组中划痕愈合明显,但在400mg/ml、600mg/ml和800mg/ml组中,由于细胞脱离贴壁较多,无法进行划痕宽度测量;Transwell小室迁移和侵袭实验中,100mg/ml组中的细胞穿膜数量较对照组多,但随着浓度的增加,细胞数量逐渐减少;在细胞凋亡实验中,随着药物浓度的增加,凋亡细胞所占的比例逐渐增多。结论:黄芪注射液在低浓度时有促进肺癌A549细胞生长的效应,随着浓度的增加,生长抑制效应才逐渐显现。
