人肝母细胞瘤细胞系（HepG2）所合成的25低聚腺苷酸合成酶的生物学特点及其在临床上的应用

2′5′低聚腺苷酸合成酶(2′5′AS)是干扰素(IFN)抗病毒过程中的一个关键酶。在通常情况下，它是干扰素诱导产生的。自1957年发现干扰素以来，迄今已有近四十年的历史。从70年代开始，相继发现干扰素除具有广谱的抗病毒繁殖活性以外，还有许多生物学活性，例如调节机体的免疫功能，抑制细胞分裂，抑制肿瘤生长，改变细胞膜的生物学性质等。干扰素是细胞功能的重要调节系统。可是，IFN-2′5′AS系统抗病毒，抗肿瘤的作用机理及途径至今尚不十分明了。 本研究在HepG2细胞系(肝母细胞瘤细胞系)上进行2′5′AS的系列工作，旨在进一步了解IFN-2′5′AS抗病毒，抗肿瘤的作用机制，结合2′5′AS在临床上的应用，寻觅和探索病毒性肝炎-肝硬化-肝癌的发生机理。 研究分二部分进行。(一)人培养HepG2细胞系所合成的，2′5′AS的生物学特点。通过HepG2细胞培养，收获后对细胞匀浆进行2′5′AS基础活性测定，并比较不同细胞系2′5′AS的特异活力，了解IFN，Anti-IFN及糖皮质激素等对HepG2细胞系合成2′5′AS的影响；应用分离亚细胞结构片断，Immunoblot以及光镜和电镜水平的免疫细胞化学和细胞生物学手段分析研究了2′5′AS在HepG2细胞超微结构上的定位和分布特点。其结果是：1．人HepG2细胞具有很高的合成2′5′AS的能力。HepG2细胞接受IFNα、IFNβ、IFNγ、dsRNA以及糖皮质激素的诱导和调控。其中以IFN α作用最强。研究结果进一步证实了在HepG2细胞系上2′5′AS抑制DNA合成的生物学特性。2．Immunoblot和超微结构研究均表明2′5′AS定位分布在HepG2细胞的微粒体和核上。由此分析，2′5′AS主要参与蛋白质合成和降解的调节。3．HepG2细胞系可以作为纯化2′5′AS，深入研究IFN-2′5′AS抗病毒，抗肿瘤作用机理的工