普鲁兰酶的重组表达、发酵优化及其在海藻糖制备中的应用

普鲁兰酶论文重组表达论文发酵优化论文

论文详情

摘要	第3-5页
Abstract	第5-6页
第一章绪论	第9-18页
1.1 普鲁兰酶的概述	第9-13页
1.1.1 普鲁兰酶的结构与催化机理	第9-10页
1.1.2 普鲁兰酶的来源与性质	第10-11页
1.1.3 普鲁兰酶的应用	第11-12页
1.1.4 普鲁兰酶的研究进展	第12-13页
1.2 海藻糖的概述	第13-14页
1.2.1 海藻糖的应用	第13-14页
1.2.2 海藻糖的制备	第14页
1.3 大肠杆菌表达系统	第14-15页
1.4 枯草芽孢杆菌表达系统	第15页
1.5 立题依据及研究意义	第15-16页
1.6 本论文的主要研究内容	第16-18页
第二章材料与方法	第18-27页
2.1 实验材料	第18-19页
2.1.1 质粒与菌株	第18页
2.1.2 主要试剂	第18页
2.1.3 主要仪器	第18-19页
2.1.4 培养基	第19页
2.2 实验方法	第19-23页
2.2.1 重组大肠杆菌的构建	第19-20页
2.2.2 重组枯草芽孢杆菌的构建	第20-22页
2.2.3 重组大肠杆菌的培养	第22-23页
2.2.4 重组枯草芽孢杆菌的培养	第23页
2.3 分析方法	第23-25页
2.3.1 菌体生物量OD_(600)的测定	第23页
2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析	第23-24页
2.3.3 重组普鲁兰酶酶活的测定	第24页
2.3.4 高效液相检测甘氨酸的方法	第24-25页
2.4 海藻糖酶转化工艺的优化	第25-27页
2.4.1 反应温度的优化	第25页
2.4.2 初始pH的优化	第25页
2.4.3 底物浓度的优化	第25页
2.4.4 普鲁兰酶加酶量的优化	第25-26页
2.4.5 酶转化产物的检测	第26-27页
第三章结果与讨论	第27-46页
3.1 普鲁兰酶BapulA的异源表达和发酵优化	第27-36页
3.1.1 重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-20b(+)-BapulA的构建与摇瓶发酵	第27-28页
3.1.2 温度对E.coli BL21(DE3)/pET-20b(+)-BapulA3 L罐发酵的影响	第28-29页
3.1.3 pH对E. coli BL21(DE3)/pET-20b(+)-BapulA发酵的影响	第29-30页
3.1.4 诱导剂对E. coli BL21(DE3)/pET-20b(+)-BapulA 3 L罐发酵的影响	第30-32页
3.1.5 甘氨酸对E.coli BL21(DE3)/pET-20b(+)-BapulA 3 L罐发酵的影响	第32-34页
3.1.6 重组菌B.subtilis CCTCC M 2016536/pHY300PLK-BapulA的构建与发酵优化	第34-36页
3.2 普鲁兰酶BnpulB的异源表达和发酵优化	第36-42页
3.2.1 重组菌E. coli BL21(DE3)/pET-22b(+)-BnpulB的构建与摇瓶发酵	第36-37页
3.2.2 重组菌E.subtilis CCTCC M 2016536/pHY300PLK-BnpulB的构建与摇瓶发酵	第37-39页
3.2.3 培养基组分对重组菌B.subtilis CCTCC M 2016536/pHY300PLK-BnpulB生长和产酶的影响	第39-42页
3.3 重组普鲁兰酶在海藻糖制备中的应用	第42-46页
3.3.1 反应温度对海藻糖转化率的影响	第42-43页
3.3.2 初始pH对海藻糖转化率的影响	第43页
3.3.3 底物浓度对海藻糖转化率的影响	第43-44页
3.3.4 重组普鲁兰酶的加酶量对海藻糖转化率的影响	第44-46页
主要结论与展望	第46-48页
主要结论	第46页
展望	第46-48页
致谢	第48-49页
参考文献	第49-53页
附录：作者在硕士期间发表的论文	第53页

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论文编号ABS4478369，这篇论文共53页

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