肟类及哒嗪类化合物对抗急性有机磷农药中毒所致呼吸肌麻痹作用机理研究

急性有机磷农药中毒(AOPP)是一个威胁人类健康的全球性问题。最近，WHO报道估计全世界每年大约有300万人发生急性农药中毒，其中大多数为有机磷农药中毒，并以口服中毒为主。因此说，急性有机磷农药中毒已是一个全球性问题，尤其在发展中国家，不仅发病率高，治疗水平还较低。目前不同的国家和地区报道的急性有机磷农药中毒死亡率从4-30％不等，差异很大。由307医院与军事医学科学院毒物药物研究所共同研制的，以突击量氯磷定为主要内容的“急性有机磷农药中毒所致呼吸肌麻痹治疗方案”(简称方案)，已经被纳入国家卫生部“十年百项”推广计划，正在全国推广。该方案临床效果好，但是以往实验室研究表明，氯磷定对抗急性有机磷化合物中毒呼吸肌麻痹作用并不是最好，这为我们提出新的研究课题，即氯磷定在对抗急性有机磷农药中毒所致呼吸肌麻痹中，是否还存在其他的药理作用。本研究目的主要是通过观察肟类和哒嗪类化合物的药理效应，为肟类化合物治疗AOPP致呼吸肌麻痹进一步提供理论依据，也为寻找更有效的抗呼吸肌麻痹药物提供实验依据。参考相关文献，利用离体大鼠梭曼、箭毒中毒的膈肌标本、DTNB显色技术等实验方法，通过离体器官功能变化，从受体水平以及分子水平，分析并揭示了肟类及哒嗪类化合物对AOPP所致呼吸肌麻痹直接对抗作用和间接对抗作用机理。同时，在AOPP病人救治中，重用了氯磷定，对AOPP致呼吸肌麻痹治疗获得良好疗效，支持了氯磷定突击量治疗方案在全国推广。实验结果：1：在相同实验条件下，L-1978，HI-6等化合物浓度为1×10-4mol／L时，对正常膈肌强直收缩开始有抑制作用，浓度增大到1×10-3mol/L时，L-1978对正常大鼠膈肌强直收缩的抑制作用明显增大。说明两类化合物在浓度教高时对正常膈肌收缩有抑制作用。硕士学位论文中文摘要 2:L一1978，Hl一6等化合物浓度为10一3mol/L时，对梭曼(2 pg/m1)抑制的隔肌强直收缩有明显恢复作用。浓度为10一4mol/L以下时，上述化合物对梭曼抑制隔肌强直收缩无明显恢复作用。表明对难防难治的神经毒剂梭曼中毒隔肌治疗的确有效，但尚需较大浓度。 3:L一1978，H工一6及氯磷定等化合物浓度为10一3mol/L时，对高浓度箭毒(2x 10币mol/L)抑制隔肌单收缩有明显的恢复作用，表明药物对受抑制收缩有一定影响，但对隔肌强直收缩无明显恢复作用。 4:L一1978，HI一6及氯磷定等化合物对较低浓度箭毒(0 .7x10一6mof几)抑制隔肌强直收缩有不同程度的影响。使箭毒抑制隔肌强直收缩出现明显恢复作用。L一1978的起效浓度为sxlo一m。比，最佳浓度为lxlo.smo比，更高浓度隔肌强直收缩再次受到抑制;L一1655的起效浓度为1 x 10.6mo比，最佳浓度为sxlo一smol几，浓度再高同样也会出现强直收缩抑制;肪类化合物Hl一6抗箭毒作用同上，起始浓度为5 x 10一smol/L，最佳浓度为4x10-amol几，过高浓度强直收缩也出现抑制;氯磷定的抗箭毒作用较L一1978，L一1655及HI一6明显弱，起始浓度为4x 10一mo讥。 根据上面的结果，初步认为，肪类及哒嗦类化合物抗箭毒作用，可能与N:烟碱受体有关。上述化合物抗箭毒作用强度顺序排列为:L一1978>L一1655>HI一6>氯磷定。 5:通过DTNB显色实验证明:月亏类化合物氯磷定可能通过其内在“拟胆碱醋酶作用”，使突触间隙积聚过量的乙酞胆碱水解。该化学反应速度快，体外达平衡的时间也很快。从化学结构和实验分析，肪类化合物有“拟胆碱酷酶样作用”的结构为肪基，考虑具有肪基的化合物均有“拟胆碱醋酶样作用”。实验中三种肪类化合物“拟胆碱酷酶样作用”强度顺序排列为:氯磷定>双复磷>HI一6，哒嗦类化合物L一1978未发现此作用。 突击量氯磷定治疗方案治疗急性有机磷农药中毒所致呼吸肌麻痹结果:本次研究16例急性口服敌敌畏中毒发生呼吸肌麻痹患者，治愈13例(81 .25%)，治愈患者呼吸机脱机时间平均为(53士71)h，气管插管拔除时间平均为(62士62)h;死亡3例(18.75%)。回顾自2001.1.1至2004.1.1文献报道的突击量氯磷定治疗病例385例，治愈328例，占85.19%，脱机时间平均为(52士38)h，死亡57例(14.81%)。硕士学位论文中文摘要非突击量氯磷定治疗病例239例患者，治愈164例(68.62%)，脱机时间平均为(32壮105)h，拔管时间平均为(346士104)h，死亡75例(31.38%);突击量氯磷定治疗方案组患者脱机时间及拔管时间较对照组明显缩短，治愈率高，死亡率低。维持阿托品化所需阿托品剂量对照组明显高于突击量氯磷定方案治疗组。本次使用突击量氯磷定方案治疗AOPP致R入IP的临床观察结果与使用该方案的回顾性病例报道结果基本一致。 通过实验室研究及临床疗效观察得出结论，突击量氯磷定治疗方案在救治AOPP中毒患者的疗效明确。分析作用机理，本实验提示氯磷定除可以影响神经肌接头处烟碱受体功能改善隔肌收缩功能外，它还可能通过存在内在“拟胆碱酷酶样作用”，减少突触间隙积聚的过量乙酞胆碱，间接使失敏的NZ烟碱受体脱敏，起到恢复隔肌收缩功能的作用。新型哒嗦类化合物L一1978对N:烟碱受体功能影响较