氯胺酮对感染性休克大鼠脑组织中热休克蛋白70的影响

目的通过观察感染性休克大鼠平均动脉压（MAP）在不同时间点的持续变化趋势、热休克蛋白70（HSP70）在脑组织海马区的表达、7d存活时间及氯胺酮对这几项指标的影响，探索HSP70在感染性休克大鼠脑组织中的演变以及氯胺酮对感染性休克脑损伤的预适应效应。方法选取60只健康成年雄性Wistar大鼠,将其随机分成假手术组（SHAM）组，盲肠结扎穿孔（CLP）组和氯胺酮（KT）组三组，各组再随机分为两个亚组，每组10只，分别为S1、S2、C1、C2、K1、K2组，一个亚组即S1、C1、K1组的目的是收集标本，另一个亚组即S2、C2、K2组的目的是观察存活时间。S1、S2组开腹后对其不做任何处理，C1、C2采用盲肠结扎加穿孔术（CLP）进行造模，K1、K2组于盲肠结扎穿孔造模前20min将40mg/kg氯胺酮经腹腔给予。①S1、C1、K1组术前需行颈总动脉置管术与气管插管术，实施颈总动脉置管术用于持续监测平均动脉压（MAP），术毕稳定15min后开始记录每小时的平均动脉压；行气管插管术利于呼吸且可防止呼吸道分泌物误吸。术毕均将生理盐水以10ml/kg·h的速度经尾静脉持续输注补液12小时。经预实验可定12h时间点于颈总动脉放血处死大鼠取全脑，用免疫组化半定量法测定脑组织海马区HSP70的表达。②S2、C2、K2组观察大鼠7d存活时间。结果⑴一般表现及重要脏器的大体形态学：与S1组相比，C1组大鼠随着时间的推移逐渐出现精神萎靡、活动减少，有时会出现嗜睡、寒颤、甚至会产生呼吸急促。实验结束后剖开腹腔，带刺鼻恶臭，可见腹腔脓血液渗出，盲肠肿胀变黑、有些出现坏疽、粘连于肠系膜，肝肾等重要器官也有淤点、淤斑及充血水肿；K1组则明显减轻。⑵平均动脉压的改变：与S1组相比，C1组和K1组大鼠的平均动脉压均呈持续性下降趋势，C1组和K1组在9h后MAP明显下降（P<0.01），K1组MAP下降较CLP组明显减轻（P<0.01）；⑶脑组织中HSP70表达量的变化：C1组与K1组均可引起脑组织HSP70表达增多，且C1组HSP70阳性产物灰度值显著低于对照组,但显著高于K1组（P<0.01）。⑷大鼠7d存活率的情况：C2组（0）组显著低于S2组（100%）及K2组（40%）,差异有统计学意义（P<0.05）；⑸HSP70表达与存活率的相关性分析:随HSP70表达增强，大鼠存活率也相应提高了，且呈显著正相关（P<0.05）。结论大鼠受到感染性休克的刺激引起脑组织海马区中HSP70表达增多，且随着热休克蛋白70表达的增强，大鼠的存活时间也相应延长，说明氯胺酮可能通过诱导增加脑组织中热休克蛋白70的表达来对大鼠产生保护效应，经本实验证实可认为氯胺酮与脑保护作用呈正相关关系。