重组人促红细胞生成素对大鼠急性创伤性脑损伤的神经保护作用及机制

目的：观察大鼠急性创伤性脑损伤（Traumaticbraininjury，TBI）后重组人促红细胞生成素（rhEPO）对创伤脑组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和水通道蛋白-4（AQP-4）表达的影响，探讨其神经保护作用机制。方法：健康雄性SD大鼠55只，体重250-350g，随机分为假手术组（n=5）、对照组（n=25）和Epo治疗组（n=25）；对照组和治疗组采用改进的Feeney等人的方法制作脑创伤模型，假手术组仅切开头皮,开骨窗,不造成脑损伤。rhEPO治疗组在模型建立后立即腹腔注射rhEPO5000U/kg，对照组和假手术组在等时间点给予等量生理盐水。根据伤后处死时间点不同每组再分为5个亚组，即6h、24h、48h、3d、7d组，每个亚组5只动物。模型制作成功后，先行神经功能评分，分别于术后6h、24h、48h、3d、7d，用10%水合氯醛过度麻醉，断头、取脑，行HE染色和免疫组织化学方法检测大脑皮层损伤处组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及水通道蛋白-4（AQP-4）的表达。结果：1.神经行为评定：大鼠在颅脑损伤后立即出现前肢抱握屈曲、后肢强直、肌张力增高、不能直走、向一侧打转等表现。清醒后精神萎靡不振，活动减少。术后神经功能评分均在7～12分之间。2.组织学观察：伤后6h可见神经元细胞肿胀。48h神经细胞周围可见空隙，核固缩。暗细胞出现增多，72h神经胶质细胞和组织间隙水肿明显，伤后7d水肿基本减退，胶质细胞仍增生明显。假手术组无明显变化。3.免疫组织化学：脑创伤大鼠6h（51.82±4.62）创伤灶脑组织出现MMP-9的表达，随着损伤时间的延长其表达明显增强48h（83.51±9.61）达最高，与假手术组比较，差异有统计学意义（P<0.05)。AQP-4的表达在6h（42.18±12.78）出现增高，24h（55.28±9.88）达最高，与假手术组比较，差异有统计学意义（P<0.05)。Epo治疗组和对照组相比较MMP-9及AQP-4的表达明显降低（P<0.05)。结论：大鼠急性创伤性脑损伤后rhEPO可降低大脑皮层损伤处脑组织中MMP-9及AQP-4的表达，减轻炎症和脑水肿的发生，发挥一定的神经保护作用。