本项研究以苦杏仁为研究对象,以提取率为指标,分别以乙醇、乙二醇、异丙醇、叔丁醇和丙酮五种有机溶剂作为提取剂,研究从苦杏仁中提取醇溶蛋白的较理想有机溶剂,研究提取剂的浓度和pH对苦杏仁醇溶蛋白提取的影响,研究用等电点法分离蛋白的条件,最终确定提取率较高的苦杏仁醇溶蛋白提取方法。另一方面,以抑制人结肠腺癌细胞增殖作用为指标,研究用不同提取剂提取的苦杏仁醇溶蛋白对人结肠癌细胞生长的作用,确定提取具有较强的抑制人结肠癌细胞生长作用的苦杏仁蛋白的方法主要研究结果如下：1)以浓度为80%, pH为7的乙醇、乙二醇、异丙醇、叔丁醇和丙酮作为提取剂,从苦杏仁中提取醇溶蛋白,结果表明用乙二醇有机溶剂提取的苦杏仁醇溶蛋白的提取率最高。2)以pH为7,浓度分别为50%、60%、70%、80%和90%的乙二醇溶液作为提取剂,从苦杏仁中提取醇溶蛋白,结果显示用90%的乙二醇溶液提取的苦杏仁醇溶蛋白的提取率最高。3)以浓度为90%, pH分别为6.0、6.5、7.0、7.5和8.0的乙二醇溶液作为提取剂,从苦杏仁中提取醇溶蛋白,结果显示用pH为7.0的乙二醇溶液提取的苦杏仁醇溶蛋白的提取率最高。4)研究pH在3.5、4.0、4.5、5.0和5.5时蛋白沉淀的量,结果显示在pH4.5时蛋白沉淀量最大。5)研究用乙醇、乙二醇、异丙醇、叔丁醇和丙酮等五种提取剂提取的苦杏仁醇溶蛋白对人结肠癌细胞生长的作用,结果表明只有用乙醇提取的醇溶蛋白对细胞增殖具有显著的抑制作用。6)用三种不同方法从苦杏仁中提取乙醇提取物,研究其对人结肠癌细胞生长的影响,结果表明用80%乙醇溶液(pH7)提取的醇溶蛋白抑制细胞生长作用最强,其IC50值为1.128mg/mL。
