中草药对铜绿微囊藻的抑制作用及机理研究

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铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)水华的发生,导致养殖水环境恶化、对养殖对象造成危害,破坏水体生态环境平衡,为此本文研究了中草药对铜绿微囊藻的抑制作用及机理,为研制高效环保的铜绿微囊藻抑制剂提供参考。本文通过一系列的抑制铜绿微囊藻毒性实验,筛选出抑藻能力较强的中草药黄连,并就其主要成分生物碱对室内外铜绿微囊藻、模拟微生态系统及主要环境因子对抑藻效果的影响进行实验研究,并对生物碱抑制铜绿微囊藻的机理从藻类光合作用、抗氧化系统及超微结构等方面进行了深入系统的研究。获得以下有价值的研究结果:(1)首次筛选出高效的铜绿微囊藻抑制剂中草药黄连。室内毒性实验结果表明,黄连对铜绿微囊藻的有效抑制浓度为0.100%(W/V),96 h抑制率达到95.15%,线性方程为Y = 1 .6510?4.5192×C?0.008×T(Y:藻细胞密度,C:黄连浓度,T:作用时间)。(2)揭示了黄连对铜绿微囊藻的抑制是通过其主要成分生物碱的化感作用完成的。实验结果表明,无论是从黄连中提取的还是工业合成的小檗碱对室内培养及天然生长的铜绿微囊藻均有很好的抑制效果,其中0.020%的小檗碱96 h时对室内培养及天然生长的铜绿微囊藻的抑制率均达90.00%以上。小檗碱对模拟微生态系统水体主要水化指标和其它浮游生物虽然也有不同程度的影响,但总体对养殖对象草金鱼(Carassius aurutus)的成活并没有产生明显的不良影响(p > 0.05)。(3)比较系统地揭示了生物碱抑制铜绿微囊藻的机理。生物碱处理铜绿微囊藻细胞后,生物碱通过与铜绿微囊藻细胞DNA结合,破坏DNA结构,使铜绿微囊藻细胞超微结构受到不同程度损伤,藻细胞的类囊体及藻胆体数目减少,藻青素颗粒、质体小球及多磷酸盐体增多,铜绿微囊藻细胞膜及细胞壁出现破裂,使细胞膜选择通透性发生改变,藻胆蛋白各组分相对百分含量发生变化,Ca2+Mg2+-ATPase酶活性受到抑制,光合作用受到影响,同时藻细胞MDA含量和O2-活性随生物碱浓度升高和处理时间延长而增加。低浓度的生物碱使SOD活性和GSH含量升高,高浓度的生物碱SOD活性降低,进而引起藻细胞氧化损伤。由此可见,生物碱可以破坏铜绿微囊藻细胞DNA和超显微结构,改变藻细胞膜离子通透性,抑制Ca2+Mg2+-ATPase活性,使光合作用无法正常进行,引起O2-活性升高,降低SOD活性,破坏抗氧化酶防御系统,进而导致膜脂质过氧化,使新陈代谢过程受抑制,最终导致藻细胞死亡。
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
0 前言第11-14页
1 综述第14-29页
    1.1 物理方法抑制铜绿微囊藻第14-15页
    1.2 化学方法抑制铜绿微囊藻第15-19页
        1.2.1 无机化学微囊藻抑制剂第15-18页
        1.2.2 有机化学抑藻剂第18-19页
    1.3 化感作用抑制铜绿微囊藻第19-29页
        1.3.1 植物对铜绿微囊藻的抑制作用及化感物质研究第20-26页
        1.3.2 植物化感作用抑制铜绿微囊藻的机理研究第26-29页
2 中草药抑制铜绿微囊藻的实验研究第29-55页
    2.1 实验材料与方法第30-38页
        2.1.1 实验器材第30-33页
        2.1.2 实验方法第33-35页
        2.1.3 实验指标测定方法第35-38页
        2.1.4 数据分析第38页
    2.2 实验结果与分析第38-51页
        2.2.1 不同中草药对铜绿微囊藻生长的影响第38-39页
        2.2.2 中草药黄连对铜绿微囊藻生长的影响第39-43页
        2.2.3 中草药黄连对模拟微生态系统的影响第43-51页
    2.3 讨论与结论第51-55页
        2.3.1 中草药对铜绿微囊藻的抑制作用第51-52页
        2.3.2 模拟水产养殖微生态系统的应用第52-53页
        2.3.3 黄连对模拟微生态系统的影响第53-55页
3 黄连主要成分生物碱抑制铜绿微囊藻的实验研究第55-69页
    3.1 实验材料与方法第55-58页
        3.1.1 实验器材第55-56页
        3.1.2 实验方法第56-57页
        3.1.3 实验指标测定方法第57页
        3.1.4 数据分析第57-58页
    3.2 结果与分析第58-67页
        3.2.1 黄连、从黄连中提取的生物碱和黄连残渣对铜绿微囊藻生长的影响第58-59页
        3.2.2 单方生物碱对铜绿微囊藻生长的影响第59-65页
        3.2.3 复方生物碱对铜绿微囊藻生长的影响第65-67页
    3.3 讨论与结论第67-69页
4 合成小檗碱对模拟微生态系统的影响第69-86页
    4.1 实验材料与方法第69-70页
        4.1.1 实验器材第69页
        4.1.2 实验方法第69-70页
        4.1.3 数据分析第70页
    4.2 结果与分析第70-84页
        4.2.1 小檗碱在不同pH 条件下对铜绿微囊藻水华水体的影响第70-76页
        4.2.2 小檗碱对模拟微生态系统的影响第76-84页
    4.3 讨论与结论第84-86页
5 黄连生物碱抑制铜绿微囊藻生长机理的研究第86-110页
    5.1 实验材料与方法第86-90页
        5.1.1 材料第86页
        5.1.2 实验方法第86-90页
        5.1.3 数据分析第90页
    5.2 结果与分析第90-104页
        5.2.1 黄连有效成分生物碱对铜绿微囊藻主要有机物含量的影响第90-92页
        5.2.2 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞膜离子通透性影响的研究第92-93页
        5.2.3 黄连生物碱对铜绿微囊藻光合作用的影响第93-97页
        5.2.4 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞抗氧化系统和氧化损伤的影响第97-102页
        5.2.5 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞超微结构影响的研究第102-103页
        5.2.6 黄连生物碱对铜绿微囊藻DNA 分子的影响第103-104页
    5.3 讨论与结论第104-110页
        5.3.1 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞膜离子通透性的影响第104-105页
        5.3.2 黄连生物碱对铜绿微囊藻光合作用的影响第105-107页
        5.3.3 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞抗氧化系统和氧化损伤的影响第107-108页
        5.3.4 黄连生物碱对铜绿微囊藻细胞超微结构影响的研究第108-109页
        5.3.5 结论第109-110页
6 总结第110-112页
    6.1 主要结果和结论第110页
    6.2 创新点第110页
    6.3 展望第110-112页
参考文献第112-124页
致谢第124-125页
博士研究生期间科研活动及成果第125-126页
    在学期间的主要学术论文第125页
    在学期间的主要研究成果第125-126页
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