第一部分白介素-18及其受体在慢性阻塞性肺疾病患者外周血中的表达研究目的：慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一个复杂的全身性疾病,它的特点是既有肺的局部炎症也有全身性炎症。许多研究提示COPD患者出现血循环中的炎症细胞活化和炎症细胞因子水平增高。白介素-18(Interleukin-18, IL-18)是一种促炎细胞因子,主要通过与白介素-18受体(Interleukin-18 Receptor, IL-18R)结合而发挥其作用。本文研究COPD患者血清IL-18和外周血T淋巴细胞表面IL-18R的表达变化。方法：收集COPD病例、健康吸烟者以及健康非吸烟者,行肺功能检查并采集外周血,用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定血清IL-18和γ干扰素(Interferon-γ, IFN-γ),用化学发光免疫分析法测定血清中的超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein, hsCRP)。用三色流式细胞术检测外周血T淋巴细胞表面IL-18R的表达变化。结果：本研究共纳入120名受试者,其中COPD稳定期患者58例,健康吸烟者30例以及健康非吸烟者32例。COPD患者血清中的IL-18和hsCRP水平显著高于吸烟者和非吸烟者(P<0.05)。在稳定期患者中,血清IL-18水平与肺功能呈显著负相关(P<0.05),而hsCRP与肺功能并不存在这样的关系。稳定期患者外周血中表达IL-18R的T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞比例均显著高于吸烟者和非吸烟者(P<0.05)。结论：本研究结果提示稳定期COPD患者外周血中IL-18和IL-18R系统是处于活跃状态的。第二部分白介素-18在被动吸烟诱导的慢性阻塞性肺疾病大鼠中的表达研究目的：研究白介素-18 (Interleukin-18, IL-18)在被动吸烟诱导的慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)大鼠中的表达变化。方法：将20只大鼠随机分为2组,正常对照组和COPD模型组。应用单纯被动吸烟法建立大鼠COPD模型,香烟烟雾暴露时间为6个月。用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定2组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid, BALF)中的IL-18浓度,用实时定量RT-PCR法测定BALF中IL-18 mRNA的表达水平,用HE染色法观察肺组织形态学改变,用免疫组织化学染色法检测IL-18在肺组织中的表达。结果：COPD模型组血清和BALF中的IL-18浓度较正常对照组显著增加(P<0.01),COPD模型组BALF中IL-18 mRNA的表达水平较正常对照组显著增高(P<0.01), COPD模型组肺组织中IL-18的表达较正常对照组显著增加(P<0.01)。结论：被动吸烟诱导的COPD大鼠外周血和肺部均高表达IL-18,提示IL-18在吸烟所致的COPD发病机制中可能起重要作用。第三部分白介素-18基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究目的：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种复杂的与遗传基因具有一定相关性的疾病,许多基因可能在此疾病的发病机制中起到重要作用。有文献报道白介素-18基因启动子区的某些变异与很多炎症性疾病如支气管哮喘等具有相关性。但是,白介素-18基因多态性与COPD的相关性尚未见报道。本文通过前瞻性的病例对照研究来探索男性吸烟人群中白介素-18基因多态性与COPD的相关性。方法：我们总共纳入了112例COPD患者和年龄匹配的105例健康吸烟者,对所有受试者进行肺功能测试,根据COPD患者肺功能气流受限程度将其分成两组,轻中度患者组和重度极重度患者组。用TaqMan单个核苷酸基因多态性基因分型法对所有受试者白介素-18基因多态性(-607 C/A和-137 G/C)进行基因分型,将COPD患者的基因型和等位基因的频率与健康吸烟者进行比较,同时对重度极重度患者组的基因型和等位基因的频率与轻中度患者组进行比较。结果：我们发现COPD患者组白介素-18-607 C等位基因的频率显著高于健康吸烟者组(比值比(OR)=1.48,95%可信区间(CI)=1.01-2.15,P=0.04)。重度极重度患者组-607 C/C基因型频率显著高于轻中度患者组(OR=4.31,95% CI=1.39-13.4,P=0.01)。重度极重度患者组C等位基因的频率显著高于轻中度患者组(OR=2.06,95%CI=1.21-3.51,P=0.01)。白介素-18-137 G/C基因型频率和等位基因频率分布在上述两个比较中无显著统计学差异。结论：白介素-18-607 C/A基因多态性与COPD的易感性及肺功能的气流受限程度存在显著相关性,而-137 G/C基因多态性与COPD并不存在这样的相关性。第四部分噻托溴铵联合福莫特罗与单用噻托溴铵治疗慢性阻塞性肺疾病的有效性和安全性比较目的：噻托溴钱和福莫特罗是两种作用机制不同的长效支气管扩张剂,主要用于治疗慢性阻塞性肺疾病。但目前尚不清楚的是联合使用这两种药物能否增强疗效以及是否会产生更多的不良反应,我们通过荟萃分析来比较噻托溴钱联合福莫特罗与单用噻托溴铵在治疗慢性阻塞性肺疾病中的有效性和安全性。方法：使用COPD、tiotropium、formoterol和LABA等关键词对MEDLINE、EMBASE和CINAHL等数据库进行文献检索,得到符合标准的随机临床试验文章,从中提取有用数据,对于连续变量使用加权平均差进行分析,对于二分变量则使用比值比进行分析,异质性分析用I2统计量进行分析,如果异质性程度高则用随机效应模型,如果异质性程度低则用固定效应模型,发表偏倚使用Egger法进行分析。结果：总共纳入了8个随机临床试验,随机患者数为1868人。分析结果显示联合治疗比单用噻托溴铵治疗平均FEVl增加105mL(95%CI：69-142,P<0.0001),平均FVC增加135mL(95%CI：96-174,P<0.0001)。联合治疗比单用噻托溴铵治疗呼吸困难转化指数平均值提高了1.5个单位(95%CI：1.01-1.99,P<0.0001),呼吸困难转化指数改善值具有临床意义的患者数明显增加(OR 2.34,95%CI：1.58-3.46,P<0.0001)。联合治疗时不良事件的累积发生率为33.2%,而单用噻托溴铵时不良事件的累积发生率为36%,具有减少的趋势,但是分析结果也显示两者比较没有显著的统计学差异(OR0.88,95%CI：0.70-1.11,P=0.28)。结论：这个荟萃分析的结果提示,联合治疗比单用噻托溴铵治疗更能改善慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能和症状,对于不良事件的发生率而言,联合治疗并没有增加其发生率反而有减少的趋势。要想更加确切地知道这两种治疗方法的差异,则需要开展疗程更长的临床试验。第五部分长效β2受体激动剂对慢性阻塞性肺疾病患者急性加重频率的影响目的：吸入型长效β2受体激动剂于上世纪九十年代后期就被批准用于治疗慢性阻塞性肺疾病,它们可以改善患者的肺功能以及减轻呼吸困难症状。然而,长效β2受体激动剂单药治疗能否减少急性加重频率,在这方面尚无统一结论。此研究通过荟萃分析来评价长效β2受体激动剂对慢性阻塞性肺疾病患者急性加重频率的影响。方法：对MEDLINE, EMBASE, CINAHL以及Cochrane等数据库进行检索,纳入符合要求的随机对照试验,包括在试验中进行了长效p：受体激动剂与安慰剂的比较以及治疗时间达到或超过24周。利用软件进行数据分析得到比值比以及相应的95%可信区间。结果：本研究总共纳入了17个符合标准的随机临床对照试验(11871名受试者)。与安慰剂相比,沙美特罗、福莫特罗和茚达特罗均可以显著减少慢性阻塞性肺疾病患者的急性加重频率。无论是否暴露于吸入型糖皮质激素,沙美特罗均可以显著减少患者的急性加重频率。总比值比分别为0.79(95% CI：0.67-0.92；P<0.01)和0.80(95% CI：0.65-0.99；P=0.04)。然而,在没有暴露于吸入型糖皮质激素的情况下,福莫特罗并不能显著减少患者的急性加重频率,总比值比为0.93(95% CI：0.75-1.15；P=0.50)。结论：长效β2受体激动剂可以减少慢性阻塞性肺疾病患者的急性加重频率。与安慰剂相比,沙美特罗、福莫特罗和茚达特罗均可以显著减少急性加重频率,在没有吸入型糖皮质激素时,只有沙美特罗而非福莫特罗能显著减少患者的急性加重频率。
