艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体1和单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的通过观察GLP-1受体激动剂艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏脂联素及其受体、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响，探讨艾塞那肽可能的肾脏保护机制。方法30只、6周龄、清洁级雄性SD大鼠，普通饲料喂养1周后随机分为健康对照组（A组，7只）和糖尿病造模组（23只）。糖尿病造模组给予链脲佐菌素65mg/kg腹腔注射,对照组给予等量生理盐水腹腔注射[1]。72小时后，以随机血糖大于16.7mmol/L为标准筛选，共有19只成模。将其随机分为糖尿病对照组（B组，10只）和艾塞那肽（Exenatide）治疗组（C组，9只）。C组给予皮下注射艾塞那肽10ug/(kg.d)，A组和B组给予皮下注射等量生理盐水。GLP-1类似物艾塞那肽干预治疗8周后，于处死动物前用代谢笼留取24小时尿液，用于测定24h尿白蛋白排泄率。然后,禁食12小时，称老鼠的重量,用水合氯醛（3ml/kg)麻醉，腹主动脉采血留取血液标本，用于血糖、血肌酐、血脂、血尿素氮、血胰岛素及脂联素的检测。处死动物，取出肾脏，用生理盐水清洗，弄干水分，称为肾重，肾脏指数计算（肾重/大鼠体重），分离的一部分肾组织，福尔马林固定，脱水，石蜡包埋，常规切片，用于免疫组织化学染色法检测AdipoR1在肾脏组织中的分布及表达；其余部分迅速投入液氮中冷冻，冻透后储存在-70℃左右的冰箱,采用实时荧光定量PCR法测定AdipoR1及MCP-1mRNA在肾组织中的表达。结果1.一般情况B组糖尿病对照组大鼠空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸水平与A组健康对照组相比均显著升高，而胰岛素水平显著降低（P＜0.05）。经艾塞那肽干预治疗8周后，C组大鼠总胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸水平与B组相比均显著降低（P<0.05），而血糖和胰岛素无明显变化（P＞0.05）。2.各组大鼠肾脏指数、血尿素氮、血肌酐及24h尿白蛋白排泄率比较B组糖尿病对照组大鼠肾脏指数、血尿素氮、血肌酐、24h尿白蛋白排泄率水平与A组健康对照组相比均显著升高（P＜0.05）。经艾塞那肽干预治疗8周后，C组的上述各项指标均显著降低（P＜0.05）。3.血浆脂联素水平，肾脏组织AdipoR1mRNA和蛋白表达B组糖尿病对照组大鼠血浆脂联素水平大大低于A组健康对照组，AdipoR1mRNA和蛋白在肾组织中的表达明显高于A组，差异有统计学意义（P＜0.05）。经艾塞那肽干预治疗8周后，C组大鼠血浆脂联素水平较B组显著升高（P＜0.05）, AdipoR1mRNA和蛋白在肾组织中的表达均较B组显著降低（P＜0.05）。4.肾脏组织MCP-1表达B组糖尿病对照组大鼠MCP-1mRNA在肾组织中的表达水平较A组显著升高（P＜0.05），经艾塞那肽干预治疗8周后，C组上述指标显著下降（P＜0.05）。5.各组大鼠肾脏组织HE染色形态学观察健康对照组大鼠肾脏超微结构清晰,无足突细胞融合,肾小球基底膜膜厚度比较均匀。糖尿病组肾脏结构模糊不清，肾小球基底膜增厚，足突增粗、破坏、融合、消失，系膜基质增多、肿胀，系膜区扩大，系膜细胞肿胀，肾小管细胞增生肥大，管腔变窄并出现空泡样变[1]。经艾塞那肽治疗后，艾塞那肽治疗组大鼠肾脏病理改变较糖尿病对照组明显好转。结论艾塞那肽可下调1型糖尿病大鼠肾脏组织AdipoR1和MCP-1的过度表达，上调血浆脂联素水平，来抑制免疫炎症反应,改善肾脏功能，减轻肾脏病理损害,从而产生一定的肾脏保护作用。