声学造影剂结合CD34评价急性心肌梗死后干细胞移植疗效的实验研究

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目的:探讨携带CD34单抗的靶向超声微泡造影剂增强兔急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)模型干细胞移植疗效及结合彩色编码参数量化(Parametric Quantification,PQ)技术无创评价其微血管新生的价值。方法:制备携带CD34单克隆抗体的靶向微泡超声造影剂。新西兰大白兔80只,随机分为3组实验组(每组20只):单纯移植组(T组)、移植+普通造影剂组(T+C组)、移植+靶向造影剂组(T+T组),及对照组(20只),结扎冠状动脉左旋支的粗大恒定分支左室支(left ventricular branch,LVB)建立AMI模型。实验组均于AMI后2w接受自体骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)移植,T+C组、T+T组分别于冠脉结扎术前、术后3天和干细胞移植术后4周进行心肌超声造影(Myocardial Contrast Echocardiography,MCE)检查,对比各组心功能、血液动力学指标变化,对比两种造影剂组干细胞移植前后的心肌灌注参数(A、β和A×β值)及造影剂峰值浓度(Derived Peak Intensity,DPI)、达峰时间(Time to Peak,TP)、曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)、心肌开始显影时间、心肌完全显影时间、造影剂清除时间(Wash out Time,WT)等时间-强度曲线指标。移植4周后处死动物,CD34抗体免疫组化检测病理微血管密度(Microvascular density,MVD),并与以上各指标进行相关性比较。对照组AMI后3d及6w注射普通微泡造影剂检测上述指标。结果:⑴干细胞移植后4w植入细胞进行Brdu免疫组化鉴定,证实移植细胞存活;⑵干细胞移植后4w,T组、T+C组及T+T组EF、LVEDD、LVSP、±dp/dt max、LVEDP均较本组移植前改善(P<0.05),与对照组相比均存在差异(P<0.05);⑶干细胞移植后4w,T+C组及T+T组各心肌节段的PI色差评分均较本组内移植前改善(P<0.05),与对照组差异有统计学意义(P<0.05);⑷T+C组(2.78±0.74、0.91±0.24、2.54±0.24)及T+T组(2.93±0.50、1.17±0.24、5.69±0.39)A、β和A×β值均较自身移植前(2.04±0.96、0.20±0.17、0.29±0.16及2.13±0.68、0.22±0.16、0.36±0.23)增加(P<0.01),T+T组较T+C组及对照组变化更为明显(P<0.05);⑸T+C组及T+T组DPI、AUC(4.68±0.55、6.89±0.38和254.45±41.65、491.24±25.74)均较本组移植前(2.90±0.04、2.46±1.09和112.72±35.53、132.68±32.60)增加(P<0.01),TP减小(2.66±0.33比较4.31±0.12,1.44±0.28比较4.17±0.36)、WT延长(7.45±1.32比较4.90±0.75,10.94±0.95比较4.98±1.01),心肌开始显影及完全显影时间缩短(40.01±13.12、39.97±20.11比较64.61±13.46、52.66±20.24,118.23±30.22、112.09±23.05比较134.61±42.02、145.26±35.43),且T+T组较T+C组变化更为明显(P<0.05),与对照组相比均存在差异(P<0.05);⑹3个实验组干细胞移植后MVD均较对照组(10.02±8.12)增加(P<0.01),T+T(63.93±15.89)及T+C组(42.18±13.54)较T组(28.61±11.57)增加更为明显(P<0.05);⑺各组造影剂观察指标分别与MVD进行相关及回归分析,T+C组A×β值、DPI、AUC、WT与MVD具有相关性(r=0.551,0.662,0.508,0.658,P均<0.05),T+T组β、A×β值、DPI、TP、AUC、心肌完全显影时间、WT各变量与MVD具有相关性(r=0.767,0.894,0.819,-0.651,0.743,-0.650,0.898,P均<0.05),其中WT(X1)和A×β(X2)与MVD(Y)建立回归方程Y=-139.066+8.510X1+19.360X2,(R=0.508,0.488,P<0.05)。结论:干细胞移植联合靶向微泡造影剂可增强兔AMI后微血管新生,携CD34单抗靶向微泡造影剂可提高兔AMI干细胞移植后新生微血管的靶向显影效果,PQ技术结合靶向微泡造影剂对无创评价干细胞移植后微血管新生具备一定的价值。
中英文缩略词对照表第5-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
前言第12-20页
第一部分 结扎兔不同冠脉分支建立急性心肌梗死模型的对比研究第20-39页
    1. 材料与方法第20-25页
        1.1 主要试剂与仪器第20-21页
        1.2 实验动物及分组第21页
        1.3 实验方法第21-25页
        1.4 统计学分析第25页
    2. 结果第25-31页
    3. 讨论第31-38页
    4. 本研究的局限性第38页
    5. 小结第38-39页
第二部分 心肌梗死后骨髓干细胞移植区域心肌收缩功能的斑点追踪技术评价第39-59页
    1. 材料与方法第41-48页
        1.1 实验动物及分组第41-42页
        1.2 主要实验试剂第42页
        1.3 主要实验仪器及设备第42-43页
        1.4 实验方法第43-47页
        1.5 统计学方法第47页
        1.6 技术路线图第47-48页
    2. 结果第48-53页
    3. 讨论第53-58页
    4. 小结第58-59页
第三部分 携CD34 靶向微泡造影剂评价干细胞移植治疗兔急性心肌梗死后微血管新生的实验研究第59-91页
    1. 研究内容与方法第59-70页
        1.1 研究对象第59-60页
        1.2 内容与方法第60-68页
        1.3 质量控制第68-69页
        1.4 统计方法第69页
        1.5 技术路线图第69-70页
    2. 结果第70-82页
    3. 讨论第82-90页
    4. 小结第90-91页
结论第91-92页
致谢第92-93页
参考文献第93-113页
综述第113-122页
    参考文献第119-122页
攻读博士学位期间发表的学术论文第122-123页
个人简历第123-124页
导师评阅表第124页
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