不同浓度氯化锌对紫外线损伤的人晶状体上皮细胞的影响及作用机制研究
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论文详情
提要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-11页 |
1. 材料与方法 | 第11-28页 |
1.1 实验材料 | 第11-15页 |
1.1.1 培养细胞 | 第11页 |
1.1.2 细胞培养相关试剂及配制 | 第11-12页 |
1.1.3 实时荧光定量PCR相关试剂 | 第12-13页 |
1.1.4 其他实验相关试剂 | 第13-14页 |
1.1.5 主要仪器与设备 | 第14-15页 |
1.2 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究的实验步骤和方法 | 第15-23页 |
1.2.1 晶状体上皮细胞培养、传代、冻存及复苏 | 第15-16页 |
1.2.2 紫外线照射 | 第16页 |
1.2.3 实时细胞电子分析 | 第16-17页 |
1.2.4 流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化 | 第17-18页 |
1.2.5 细胞内活性氧水平的检测 | 第18-19页 |
1.2.6 Annexin V-FITC/PI染色法细胞凋亡的检测 | 第19-20页 |
1.2.7 细胞内Ca~(2+)水平的检测 | 第20页 |
1.2.8 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
1.2.9 ELISA检测PMCA1、PMCA4、SERCA2b及SERCA3蛋白表达的变化 | 第21-22页 |
1.2.10 统计学分析 | 第22-23页 |
1.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究的实验步骤和方法 | 第23-28页 |
1.3.1 晶状体上皮细胞培养、传代、冻存及复苏 | 第23页 |
1.3.2 ZnCl_2溶液的配制 | 第23页 |
1.3.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞生存的影响 | 第23-24页 |
1.3.4 线粒体膜电位的变化 | 第24-25页 |
1.3.5 细胞周期的检测 | 第25页 |
1.3.6 细胞凋亡的检测 | 第25-26页 |
1.3.7 实时荧光定量PCR | 第26页 |
1.3.8 ELISA检测相关蛋白表达的变化 | 第26-27页 |
1.3.9 统计学分析 | 第27-28页 |
2. 结果 | 第28-45页 |
2.1 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究 | 第28-35页 |
2.1.1 实时细胞电子分析 | 第28-29页 |
2.1.2 流式细胞仪检测 ΔΨm变化 | 第29-30页 |
2.1.3 流式细胞仪检测细胞内ROS变化 | 第30-31页 |
2.1.4 Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡 | 第31-32页 |
2.1.5 细胞内Ca~(2+)水平的检测 | 第32-33页 |
2.1.6 PMCA1, PMCA4, SERCA2b和SERCA3基因和蛋白表达水平的检测 | 第33-35页 |
2.2 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究 | 第35-45页 |
2.2.1 细胞形态的观察 | 第35页 |
2.2.2 MTT法检测 | 第35-36页 |
2.2.3 RT-CES分析 | 第36-38页 |
2.2.4 ΔΨm变化 | 第38页 |
2.2.5 细胞周期检测 | 第38-39页 |
2.2.6 细胞凋亡的检测 | 第39-42页 |
2.2.7 细胞内TGF-β1,Caspase-12,Caspase-9 和TNF-α 基因及蛋白水平检测 | 第42-45页 |
3. 讨论 | 第45-51页 |
3.1 ZnCl_2对HLE B-3 细胞生长的影响 | 第45页 |
3.2 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究 | 第45-48页 |
3.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究 | 第48-51页 |
4. 结语 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
中英文对照 | 第59-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
论文著作 | 第64-66页 |
详细摘要 | 第66-70页 |
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