本文对鲅鱼皮胶原蛋白的提取方法、分离纯化、光谱特性及分子特性进行了分析研究,为鲅鱼皮胶原蛋白的开发利用提供基础理论依据,主要结果如下：1.本文使用酸法和酶法提取鲅鱼皮胶原蛋白。酸法单因素实验,可知提取介质为有机酸其提取率较高；酶法单因素实验,可知几种酶中胃蛋白酶其提取率高。酸法L9(34)正交实验,最高提取率23.51%,最佳提取条件：0.2mol/L柠檬酸,固液比1：30,提取48h；胃蛋白酶法L9(34)正交实验,最高提取率35.73%,最佳提取条件是：30℃提取6h,胃蛋白酶量为3%(w/v),固液比1：20；超声波辅助胃蛋白酶L9(34)的正交实验最高提取率为82.42%,最佳条件是：30℃提取3h,胃蛋白酶含量3%(w/v),固液比1：30。比较SDS-PAGE电泳图谱可知,超声波辅助胃蛋白酶法的提取产物的相对分子量明显小于酸法的提取产物。2.鲅鱼皮胶原蛋白的光谱特性。鲅鱼皮胶原蛋白在227nm、230nm处有显著吸收峰,在280nm处无显著吸收峰,说明其氨基酸组成中几乎不存在具有共轭双键的芳香族氨基酸；红外光谱中显示胶原蛋白在3326.71cm-4、2930.12cm-1、1654.91cm-1、1600.65cm-1、1241.57cm-1有显著吸收峰,此为酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ的特征吸收峰,说明胶原蛋白保持较完整的三股螺旋结构。3.鲅鱼皮胶原蛋白的分离与纯化。鲅鱼皮ASC在DEAE-52纤维素阴离子交换层析中的得到2个组分,分别是蛋白多糖和胶原蛋白。分离条件为：洗脱上限盐浓度为100mmol/L的NaCl;流速30mL/h; ASC开始洗脱的盐浓度为13mmol/L;2个洗脱峰的相对应的盐浓度为22.25mmol/L,30mmol/L;洗脱终止于38mmol/L4.鲅鱼皮胶原蛋白的分子特性。氨基酸的组成及含量测定中可知Gly(18.4%)的含量最多,其次是Pro(8.51%)、Ala(8.31%)、Glu(7.77%)、Arg(6.85%), Trp、Csy的含量较低；SDS-PAGE电泳分析可知鲅鱼皮胶原蛋白的胶原类型、肽链组成和相对分子量,电泳图谱表明胶原蛋白含有α1、α2、β、γ链,分子量约为127kDa、115kDa、278kDa、343kDa,可知该胶原为典型的Ⅰ型胶原蛋白。
