近几十年来,全球两栖类种群衰退十分严重,大量调查研究表明环境污染物与此有关。三苯基锡(TPT)被广泛用于农作物杀菌剂、木材防腐剂、船舶防污漆等,是典型的环境内分泌干扰物质,然而其对两栖类的毒性影响鲜见报道。本文选用TPT对热带爪蟾胚胎进行暴露,研究TPT对热带爪蟾胚胎的致畸效应及可能机制,为探索污染物对两栖类种群的影响提供科学依据。首先,选用0.2-7.5μgSn/L的TPT对热带爪蟾胚胎从囊胚期开始暴露,在暴露24、48、72h后分别取样。结果发现,暴露72h后,5μgSn/L暴露组胚胎的存活率相比对照组显著下降,体长显著减少,且在暴露48h后就表现出多种畸形现象,其中以泄殖腔增大、鳍变窄或消失、皮肤色素减少最为明显。概率密度法计算得到TPT对热带爪蟾胚胎暴露72h的LC50和EC50分别为5.25μgSn/L及0.96μgSn/L。此外,TPT还可影响胚胎皮肤及肌肉组织的发育,促进胚胎细胞凋亡。其次,为进一步探讨TPT的致畸机制,选用RXR/RAR配体化合物暴露热带爪蟾胚胎,比较其与TPT的畸形表型差异。通过RT-PCR分析维甲酸和有机锡两类化合物对维甲酸信号通路相关基因及甲状腺受体基因表达的影响。结果表明维甲酸引起的畸形主要包括小头畸形、眼睛色素减少或消失、体轴弯曲等。TPT和TBT抑制RXRa的mRNA表达而增加TRβ的mRNA表达,TPT和TBT的致畸机制可能与甲状腺信号通路有关。最后,选用9-顺维甲酸,全反式维甲酸同TPT进行两两联合暴露。结果发现,联合暴露在增加死亡率和减少体长方面具有协同效应。联合暴露能引起胚胎产生单独暴露所未发现的新的畸形表型,主要包括泄殖腔部位的卵黄突出,尾部的脊索突出等。本文实验结果表明,TPT能抑制热带爪蟾胚胎的生长发育,并表现出强烈的致畸效应。通过畸形表型及基因表达结果的比较,推测TPT和BT具有共同的致畸机制,且可能异于经典的维甲酸信号通路介导。
