绞股蓝皂苷对AGEs诱导下人肾小球系膜细胞中RAGE及转化生长因子TGF-β1表达的影响

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目的:观察绞股蓝皂苷(gypenosides,GP)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation endproducts,AGEs)诱导下人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将体外培养的(含有15%胎牛血清的DMEM低糖培养液)的人肾小球系膜细胞(HMCs)分成四个实验组:正常组、模型组、GP组、阳性对照组。除正常组外,根据前期课题MTT实验结果余下三组均再给予200mg·L-1 AGEs刺激。此外,GP组中再分别加入由低至高三个不同浓度的GP(25、75、175 mg·L-1)进行干预,阳性对照组中加入氨基胍盐酸盐(0.1mmol·L-1)进行干预。同步孵育72小时后,应用Western blotting技术检测各实验组中RAGE和TGF-β1蛋白的表达水平;应用RT-PCR技术检测各实验组中RAGE和TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,体外培养的HMCs,模型组中AGEs诱导下HMCs中RAGE、TGF-β1蛋白及mRNA异常高表达,差异显著(P均<0.01);与模型组比较,GP组中GP可明显下调HMCs中RAGE、TGF-β1蛋白及mRNA的表达,并呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论:GP可降低AGEs诱导下HMCs中RAGE的异常高表达,阻断AGEs-RAGE经典的信号通路,并下调下游转化生长因子-β1的表达活性,进而延缓DN纤维化这一病理进程,对早期DN防治可发挥一定积极地意义。
中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
英汉缩略词对照表第8-10页
前言第10-12页
1 材料与方法第12-27页
    1.1 药品与试剂第12-13页
    1.2 主要实验仪器第13-14页
    1.3 实验方法第14-16页
    1.4 Western Blotting检测HMCs中RAGE及TGF-β1 蛋白的表达第16-21页
    1.5 RT-PCR检测HMCs中RAGE及TGF-β1 mRNA的表达第21-27页
    1.6 统计学方法第27页
2 结果第27-31页
    2.1 GP对AGEs诱导下HMCs中RAGE及TGF-β1 蛋白表达的影响第27-29页
    2.2 GP对AGEs诱导下HMCs中RAGE及TGF-β1mRNA表达的影响第29-31页
3 讨论第31-34页
4 结论第34-35页
参考文献第35-39页
综述第39-52页
    参考文献第45-52页
攻读学位期间发表的学术论文目录第52-53页
致谢第53-54页
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