近年来,中医药引起越来越广泛的关注,传统中药主要采用复方的形式发挥疗效。其中,四逆散是著名复方之一,出自《伤寒论》。按照君臣佐使的配伍原则,以柴胡、芍药、枳实和甘草,由1:1:1:1的比例煎煮熬制而成。张仲景主要用其疏肝理脾,调气祛滞。虽然仅由四味药材组成,但是组方精妙,已被广泛应用。四逆散及加味四逆散已被广泛研究,但是作为四味药材组成的基本复方其抗肝纤维化作用及主要成分跨膜转运机制研究却很少涉猎,本文主要从四逆散对CCl4诱导肝纤维化小鼠的保护作用及其部分单体在体外MDCK的吸收机制及相互作用角度展开探讨。1.四逆散对CCl4诱导肝纤维化小鼠的治疗作用以CCl4诱导小鼠肝纤维化模型为对象,给药组分别给予2、4、8 g/kg的四逆散,正常组给予等剂量的橄榄油,阳性对照组给予秋水仙碱。检测相关肝纤维化和炎症指标,运用Masson染色和HE染色检测小鼠肝组织肝纤维化的变化。采用Western blot方法检测Collagen I及α-SMA蛋白表达水平。结果发现不同剂量四逆散能够不同程度的降低小鼠血清ALT,AST及HA水平,改善小鼠肝脏的病理组织变化,并能显著抑制Collagen I和α-SMA蛋白表达水平（P<0.01）,其中四逆散高剂量组的降低效果最明显。2.四逆散主要成分在MDCK细胞模型上的吸收特点和相互作用研究四逆散具有广泛的药理作用,然而其主要成分的吸收特点和机制具有一定复杂性。在本实验中研究了四逆散中芍药-枳实和芍药-甘草两个药对的主要成分芍药苷、柚皮苷和甘草酸在MDCK细胞模型上的吸收特点和机制研究,以及四逆散四种主要单体成分包括柴胡皂苷a、芍药苷、柚皮苷及甘草酸之间相互作用研究。芍药苷、柚皮苷和甘草酸双向转运呈剂量依赖性;在4°C和NaN3条件下,芍药苷、柚皮苷和甘草酸的转运显著降低;与P-gp抑制剂维拉帕米共培养,芍药苷和柚皮苷的外排减少;而甘草酸的转运受到MRP2抑制剂MK-571和丙磺舒的影响,意味着P-gp可能参与芍药苷和柚皮苷的吸收转运,而MRP2可能主要影响甘草酸的转运。当四个主要单体成分共同孵育时,芍药苷和柚皮苷的吸收显著升高,可能与打开了细胞间紧密连接相关蛋白有关。
