CD163/HO-1信号通路与人脑出血后血肿周围组织炎症反应的相关性

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脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)占所有卒中类型的15%-20%,脑出血患者的死亡率和病残率均高于其他亚型卒中患者,目前起发病机制尚未完全清楚。CD163/HO-1途径是血红蛋白代谢的主要途径,可能起到抗炎、抗氧化的作用。研究CD163和HO-1在脑出血后血肿周围组织中的动态表达,并研究其表达与组织炎症反应之间的关系。本研究选取高血压脑出血行血肿清除术的患者27例,取靠近血肿旁1cm左右脑组织作为试验组,将入路中远离血肿处的脑组织取12例作为对照。按发病到手术取标本的时间分为≤6h组,6~24h组、24~72h组和>72h组4个亚组。通过HE染色观察血肿周围脑组织的病理变化,TUNEL阳性细胞检测观察凋亡情况,免疫组化染色检测TNF-α、IL-1和IL-10的表达水平;应用RT-PCR、western blot法和免疫组化方法从基因及蛋白质水平上检测CD163的水平。并将其与TNF-α、IL-1和IL-10表达进行相关性分析;应用RT-PCR、western blot法和免疫组化方法从基因及蛋白质水平上检测HO-1的水平。并将其与TNF-α、IL-1表达进行相关性分析;对CD163表达和HO-1表达进行相关性分析。HE染色发现对照组脑组织细胞排列整齐紧密,神经细胞胞体大、胞核淡染大且圆(偶见核深染浓缩);神经胶质细胞胞体小、核深染。试验组脑组织可见细胞排列不规则且疏松,在神经细胞、神经胶质细胞周围可见空泡(一般为脑组织水肿造成),有多处软化灶及出血水肿;神经细胞(胞体大、胞核深染浓缩)变性坏死数量减少;神经胶质细胞(胞体小、核深染)可见增生。试验组TUNEL染色阳性细胞在脑出血6~24h出现,后凋亡细胞数明显增多,24~72h组达到高峰,>72h逐渐减少,但均较对照组明显升高,差异显著(p<0.05)。试验组TNF-α和IL-1表达6~24h开始升高,后明显增多,24~72h组达到高峰,>72h逐渐减少,在6~24h、24~72h和>72h时明显高于对照组(p<0.05)。试验组IL-10表达6~24h时高于对照组(p<0.05),24~72h开始下降,>72h最低,在24~72h和>72h时低于对照组(p<0.05)。试验组CD163mRNA于6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。免疫组化检测试验组CD163表达6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。相关性分析提示:脑出血血肿周围组织CD163mRNA含量和TNF-α、IL-1蛋白表达均负相关(p<0.01);CD163蛋白表达和IL-10蛋白表达呈正相关(p<0.01)。试验组HO-1mRNA于6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。免疫组化检测试验组HO-1表达6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。相关性分析提示:脑出血血肿周围组织HO-1mRNA含量和TNF-α、IL-1蛋白表达均负相关(p<0.01)。相关性分析提示:试验组CD163mRNA和HO-1mRNA,CD163蛋白和HO-1蛋白表达均呈正相关。根据以上结果,我们得出结论:人脑出血血肿周围组织存在炎症反应和细胞凋亡,IL-1、IL-10和TNF-α是参与脑出血血肿周围炎症反应的重要细胞因子;CD163表达在人脑出血后血肿周围脑组织表达增高,与TNF-α和IL-1的表达负相关,与IL-10表达正相关,其在脑出血后起到抗炎作用;HO-1表达在人脑出血后血肿周围脑组织表达增高,与TNF-α和IL-1的表达负相关,在脑出血后起到抗炎作用;CD163与HO-1表达呈正相关,功能上起到相互促进、相互协调的作用,共同构成脑出血后Hb的代谢通路。
前言第4-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第13-15页
第2章 综述第15-25页
    2.1 血肿扩大及占位效应第15-16页
    2.2 血肿本身在脑水肿形成中的作用第16-18页
        2.2.1 凝血酶的神经毒性作用第16-17页
        2.2.2 红细胞、血红蛋白及其代谢产物的神经毒性作用第17-18页
    2.3 血肿周围脑血流量下降第18-19页
    2.4 炎症反应第19-25页
        2.4.1 炎症细胞第19-20页
        2.4.2 炎性细胞因子第20-23页
        2.4.3 补体系统第23-25页
第3章 实验研究第25-85页
    3.1 人脑出血血肿周围组织的炎症反应和细胞凋亡第25-45页
        3.1.1 前言第25页
        3.1.2 实验材料与方法第25-32页
        3.1.3 结果第32-42页
        3.1.4 讨论第42-45页
        3.1.5 小结第45页
    3.2 CD163 在人脑出血后的动态表达及与炎症反应的相关性第45-64页
        3.2.1 前言第45页
        3.2.2 材料和方法第45-54页
        3.2.3 结果第54-61页
        3.2.4 讨论第61-64页
        3.2.5 小结第64页
    3.3 CD163 介导的 HO-1 通路在人脑出血后与血肿周围组织中的表达及与炎症反应的相关性第64-85页
        3.3.1 前言第64-65页
        3.3.2 材料与方法第65-73页
        3.3.3 结果第73-81页
        3.3.4 讨论第81-84页
        3.3.5 小结第84-85页
第4章 结论第85-87页
    4.1 结论第85页
    4.2 本实验的研究与创新第85-87页
参考文献第87-99页
个人简介及攻读博士期间发表的文章第99-101页
致谢第101页
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