CD163/HO-1信号通路与人脑出血后血肿周围组织炎症反应的相关性
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脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)占所有卒中类型的15%-20%,脑出血患者的死亡率和病残率均高于其他亚型卒中患者,目前起发病机制尚未完全清楚。CD163/HO-1途径是血红蛋白代谢的主要途径,可能起到抗炎、抗氧化的作用。研究CD163和HO-1在脑出血后血肿周围组织中的动态表达,并研究其表达与组织炎症反应之间的关系。本研究选取高血压脑出血行血肿清除术的患者27例,取靠近血肿旁1cm左右脑组织作为试验组,将入路中远离血肿处的脑组织取12例作为对照。按发病到手术取标本的时间分为≤6h组,6~24h组、24~72h组和>72h组4个亚组。通过HE染色观察血肿周围脑组织的病理变化,TUNEL阳性细胞检测观察凋亡情况,免疫组化染色检测TNF-α、IL-1和IL-10的表达水平;应用RT-PCR、western blot法和免疫组化方法从基因及蛋白质水平上检测CD163的水平。并将其与TNF-α、IL-1和IL-10表达进行相关性分析;应用RT-PCR、western blot法和免疫组化方法从基因及蛋白质水平上检测HO-1的水平。并将其与TNF-α、IL-1表达进行相关性分析;对CD163表达和HO-1表达进行相关性分析。HE染色发现对照组脑组织细胞排列整齐紧密,神经细胞胞体大、胞核淡染大且圆(偶见核深染浓缩);神经胶质细胞胞体小、核深染。试验组脑组织可见细胞排列不规则且疏松,在神经细胞、神经胶质细胞周围可见空泡(一般为脑组织水肿造成),有多处软化灶及出血水肿;神经细胞(胞体大、胞核深染浓缩)变性坏死数量减少;神经胶质细胞(胞体小、核深染)可见增生。试验组TUNEL染色阳性细胞在脑出血6~24h出现,后凋亡细胞数明显增多,24~72h组达到高峰,>72h逐渐减少,但均较对照组明显升高,差异显著(p<0.05)。试验组TNF-α和IL-1表达6~24h开始升高,后明显增多,24~72h组达到高峰,>72h逐渐减少,在6~24h、24~72h和>72h时明显高于对照组(p<0.05)。试验组IL-10表达6~24h时高于对照组(p<0.05),24~72h开始下降,>72h最低,在24~72h和>72h时低于对照组(p<0.05)。试验组CD163mRNA于6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。免疫组化检测试验组CD163表达6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。相关性分析提示:脑出血血肿周围组织CD163mRNA含量和TNF-α、IL-1蛋白表达均负相关(p<0.01);CD163蛋白表达和IL-10蛋白表达呈正相关(p<0.01)。试验组HO-1mRNA于6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。免疫组化检测试验组HO-1表达6~24h开始升高,>72h仍呈上升趋势,在6~24h、24~72h和>72h时与对照组有显著差异(p<0.05)。相关性分析提示:脑出血血肿周围组织HO-1mRNA含量和TNF-α、IL-1蛋白表达均负相关(p<0.01)。相关性分析提示:试验组CD163mRNA和HO-1mRNA,CD163蛋白和HO-1蛋白表达均呈正相关。根据以上结果,我们得出结论:人脑出血血肿周围组织存在炎症反应和细胞凋亡,IL-1、IL-10和TNF-α是参与脑出血血肿周围炎症反应的重要细胞因子;CD163表达在人脑出血后血肿周围脑组织表达增高,与TNF-α和IL-1的表达负相关,与IL-10表达正相关,其在脑出血后起到抗炎作用;HO-1表达在人脑出血后血肿周围脑组织表达增高,与TNF-α和IL-1的表达负相关,在脑出血后起到抗炎作用;CD163与HO-1表达呈正相关,功能上起到相互促进、相互协调的作用,共同构成脑出血后Hb的代谢通路。
前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第13-15页 |
第2章 综述 | 第15-25页 |
2.1 血肿扩大及占位效应 | 第15-16页 |
2.2 血肿本身在脑水肿形成中的作用 | 第16-18页 |
2.2.1 凝血酶的神经毒性作用 | 第16-17页 |
2.2.2 红细胞、血红蛋白及其代谢产物的神经毒性作用 | 第17-18页 |
2.3 血肿周围脑血流量下降 | 第18-19页 |
2.4 炎症反应 | 第19-25页 |
2.4.1 炎症细胞 | 第19-20页 |
2.4.2 炎性细胞因子 | 第20-23页 |
2.4.3 补体系统 | 第23-25页 |
第3章 实验研究 | 第25-85页 |
3.1 人脑出血血肿周围组织的炎症反应和细胞凋亡 | 第25-45页 |
3.1.1 前言 | 第25页 |
3.1.2 实验材料与方法 | 第25-32页 |
3.1.3 结果 | 第32-42页 |
3.1.4 讨论 | 第42-45页 |
3.1.5 小结 | 第45页 |
3.2 CD163 在人脑出血后的动态表达及与炎症反应的相关性 | 第45-64页 |
3.2.1 前言 | 第45页 |
3.2.2 材料和方法 | 第45-54页 |
3.2.3 结果 | 第54-61页 |
3.2.4 讨论 | 第61-64页 |
3.2.5 小结 | 第64页 |
3.3 CD163 介导的 HO-1 通路在人脑出血后与血肿周围组织中的表达及与炎症反应的相关性 | 第64-85页 |
3.3.1 前言 | 第64-65页 |
3.3.2 材料与方法 | 第65-73页 |
3.3.3 结果 | 第73-81页 |
3.3.4 讨论 | 第81-84页 |
3.3.5 小结 | 第84-85页 |
第4章 结论 | 第85-87页 |
4.1 结论 | 第85页 |
4.2 本实验的研究与创新 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
个人简介及攻读博士期间发表的文章 | 第99-101页 |
致谢 | 第101页 |
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