目的双次兔臀肌注射内毒素加三次注射甲基强的松龙建立兔早期激素性股骨头坏死模型,经髓芯减压加植入以纤维蛋白胶(FS)为载体的骨髓间充质干细胞(BMSCs)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),观察以FS为载体的BMSCs、bFGF经髓芯减压移植治疗兔早期激素性股骨头坏死的干预效果,并探讨其作用机理。方法健康成年新西兰大白兔80只,体重2.6士0.4kg,雌雄不限,经耳缘静脉注射LPS,以10μg/kg体重,共注射两次,两次注射间隔24h。并于第二次注射LPS后,立即臀肌注射甲强龙3次,剂量40mg/kg体重。每次注射间隔24h。在内毒素和激素的联合作用,造模后4周共有17只新西兰白兔死亡,剩余63只随机取其中60只,以随机数字表法将兔子随机分为4组每组15只。A组：(对照组)造模组后不做任何处理；B组：(髓芯减压组)经C臂X光透视下应用骨穿针行股骨头髓芯减压,每侧股骨头有2个髓芯减压通道；C组：(骨髓间充质干细胞移植组)造模后行髓芯减压,每侧股骨头有2个髓芯减压通道,通过髓芯减压通道移植以FS为载体的骨髓间充质干细胞；D组：(BMSCs联合bFGF移植治疗组)造模后髓芯减压,每侧股骨头有2个髓芯减压通道,通过髓芯减压通道移植以FS为载体的骨髓间充质干细胞及碱性成纤维细胞生长因子。分别于造模后8周、12周、16周分批处死兔子,取双侧股骨头,分别进行大体观察、常规组织病理学切片光镜。于造模后8周、12周及16周,行双侧股骨头1.5T核磁共振(MRI)检测观察兔股骨头坏死信号的改变。于8周、12周及16周行血管内皮生长因子、核心结合因子免疫组化染色,于8周、12周及16周实时荧光定量检测VEGF和CbfalmRNA的表达。以上数据采用SPSS17.0统计软件进行统计分析。结果股骨头大体标本观看,造模后8周A、B组股骨头软骨面颜色较暗,呈现灰白色；C组股骨头软骨面形态粗糙不平,关节软骨面颜色微变暗；D组股骨头软骨面形态光滑完整,关节软骨面颜色微变暗。16周时A组可见骨髓腔内坏死面积较前进一步增大,而B、C组骨髓腔内坏死面积缩小且有少量新骨生成；D组可见大量新骨生成。行MRI检测可见,8周时A组坏死区信号改变明显,坏死区扩大,B组坏死区无明显改变,C组坏死区范围有所减小,D组坏死区较C组进一步减小。12、16周A组MRI间明显的坏死信号改变,B、C两组坏死信号区域有所减小,D组坏死信号基本接近正常。病理学研究表明, A、B、C三组与D组比较,可见D组股骨头内骨坏死面积较其他三组明显减少,骨髓腔内脂肪细胞数量明显减少,骨小梁密度相对增高,骨小梁周围可见大量新骨形成,毛细血管增生较多,空骨陷窝比率降低,骨组织内VEG、Cbfal的表达明显增强。实时荧光定量检测发现,8周时A、B、C、D四组VEGF、Cbfal mRNA的表达量无明显差异,但造模后12周及16周B、C、D三组VEGF、Cbfal mRNA的表达量都不同程度的增加,其中D组有比较明显的改变,其中D组在第16周时与其它三组比较,与B、C组比较有统计学差异(P<0.05),与A组比较有显著统计学差异(P<0.01)。结论：1、BMSCs复合Fs经髓芯减压通道能有效的移植到股骨头,在股骨头微环境中可以向骨细胞分化、成骨细胞分化,对股骨头坏死的再生修复起着促进作用。2、bFGF能够有效的促进BMSCs向骨细胞、成骨细胞分化,更有效的治疗兔早期股骨头坏死,为临床试验提供依据。
