致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第11-16页 |
1.1 古菌概述与其研究意义 | 第11-12页 |
1.1.1 古菌概述 | 第11-12页 |
1.1.2 古菌的研究意义 | 第12页 |
1.2 LysM结构域研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 LysM结构域结构特征概述 | 第12-13页 |
1.2.2 LysM结构域功能概述 | 第13-14页 |
1.2.3 LysM结构域与植物免疫防御 | 第14-16页 |
2 引言 | 第16-18页 |
2.1 研究目的与意义 | 第16-17页 |
2.2 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
3 材料和方法 | 第18-34页 |
3.1 材料 | 第18-21页 |
3.1.1 实验材料 | 第18页 |
3.1.2 实验菌株与载体 | 第18页 |
3.1.3 试剂耗材与仪器设备 | 第18-19页 |
3.1.4 实验中相关试剂配制方法 | 第19-21页 |
3.2 方法 | 第21-34页 |
3.2.1 古菌基因组序列获得方法 | 第21页 |
3.2.2 古菌LysM结构域基因序列发掘方法 | 第21-22页 |
3.2.3 古菌LysM结构域蛋白氨基酸序列分析方法 | 第22页 |
3.2.4 原核表达 | 第22-24页 |
3.2.5 蛋白的纯化与浓缩方法 | 第24-25页 |
3.2.6 Westernblot方法 | 第25-26页 |
3.2.7 蛋白质含量测定方法 | 第26页 |
3.2.8 几丁质-多糖结合鉴定方法 | 第26页 |
3.2.9 几丁质酶活测定方法 | 第26-27页 |
3.2.10 植物表达载体构建方法 | 第27-29页 |
3.2.11 农杆菌侵染拟南芥转基因方法 | 第29-30页 |
3.2.12 转基因阳性植株鉴定方法 | 第30-33页 |
3.2.13 病原真菌侵染拟南芥鉴定方法 | 第33-34页 |
4 结果与分析 | 第34-46页 |
4.1 古菌基因组序列的获得 | 第34页 |
4.2 古菌LysM结构域基因序列的获得 | 第34-35页 |
4.3 古菌LysM结构域基因的序列比对与系统进化树构建 | 第35-37页 |
4.4 HnLysM基因的生物信息学分析 | 第37-39页 |
4.5 HnLysM蛋白的原核表达 | 第39-40页 |
4.6 pET-HnLysM重组蛋白的纯化与Westernblot分析 | 第40-42页 |
4.7 HnLysM蛋白的几丁质结合活性及几丁质酶活活性鉴定 | 第42-43页 |
4.8 HnLysM在拟南芥中异源表达分析 | 第43-46页 |
4.8.1 HnLysM基因的植物表达载体构建 | 第43-44页 |
4.8.2 拟南芥转基因及阳性植株筛选 | 第44-45页 |
4.8.3 HnLysM基因的真菌防御功能分析 | 第45-46页 |
5 讨论 | 第46-48页 |
6 结论 | 第48-49页 |
7 参考文献 | 第49-53页 |
作者简介 | 第53页 |