寡孢节丛孢氨基酸信号调控相关基因功能的初步研究
寡孢节丛孢论文 雷帕霉素靶蛋白TOR论文 一般性调控阻遏蛋白激酶2Gcn2论文 G蛋白偶联受体GPC
论文详情
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1. 捕食线虫真菌捕食线虫过程 | 第13-15页 |
| 2. 氮源调控、氨基酸代谢途径研究进展 | 第15-19页 |
| 2.1 氮源与真菌捕食线虫 | 第15页 |
| 2.2 氨基酸代谢途径 | 第15-19页 |
| 3. 本论文研究选题依据及研究意义 | 第19-21页 |
| 第二章 寡孢节丛孢Tor和Gcn2基因敲除载体的构建 | 第21-38页 |
| 1. 前言 | 第21-22页 |
| 2. 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.1 实验菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.2 主要试剂和培养基 | 第22-23页 |
| 2.3 实验药品和试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.4 主要仪器及设备 | 第24页 |
| 3. 实验方法 | 第24-33页 |
| 3.1 基因编号 | 第24-25页 |
| 3.2 敲除引物设计 | 第25-26页 |
| 3.3 寡孢节丛孢基因组提取 | 第26-27页 |
| 3.4 质粒提取 | 第27页 |
| 3.5 目的片段获取 | 第27-29页 |
| 3.5.1 5'端同源片段和3'端同源片段的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3.5.2 潮霉素基因扩增 | 第28-29页 |
| 3.5.3 pRS426质粒酶切 | 第29页 |
| 3.6 酵母感受态的制备及电转化 | 第29-30页 |
| 3.6.1 酵母(FY834)电转感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 3.6.2 电转杯的清洗 | 第30页 |
| 3.6.3 酵母感受态的电转化 | 第30页 |
| 3.7 酵母转化子质粒提取 | 第30页 |
| 3.8 酵母转化子验证 | 第30-31页 |
| 3.9 重组质粒转化大肠杆菌 | 第31-33页 |
| 3.9.1 酵母质粒转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| 3.9.2 大肠杆菌转化子验证 | 第32-33页 |
| 4. 实验结果 | 第33-36页 |
| 4.1 目的片段扩增 | 第33-34页 |
| 4.2 电转化酵母结果 | 第34-35页 |
| 4.2.1 酵母FY834感受态的电转化 | 第34页 |
| 4.2.2 酵母转化子的PCR验证 | 第34-35页 |
| 4.3 大肠杆菌DH5α转化子质粒PCR结果 | 第35-36页 |
| 5. 结论与讨论 | 第36-37页 |
| 6. 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 寡孢节丛孢原生质体的制备、转化及转化子的筛选验证 | 第38-46页 |
| 1. 前言 | 第38页 |
| 2. 实验材料与仪器 | 第38-40页 |
| 2.1 实验菌株 | 第38页 |
| 2.2 主要试剂和培养基 | 第38-39页 |
| 2.3 实验药品和试剂盒 | 第39-40页 |
| 2.4 主要仪器及设备 | 第40页 |
| 3. 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.1 基因编号 | 第40页 |
| 3.2 敲除载体全长片段扩增及回收 | 第40-41页 |
| 3.3 寡孢节丛孢原生质体制备 | 第41页 |
| 3.4 寡孢节丛孢原生质体转化 | 第41页 |
| 3.5 寡孢节丛孢敲除转化子基因组提取 | 第41-42页 |
| 3.6 敲除转化子的PCR验证 | 第42页 |
| 4. 实验结果 | 第42-44页 |
| 5. 结论与讨论 | 第44-45页 |
| 5.1 原生质体的制备及转化 | 第44-45页 |
| 5.3 敲除转化子的PCR验证 | 第45页 |
| 6. 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 寡孢节丛孢野生株与敲除突变株的表型分析 | 第46-69页 |
| 1. 前言 | 第46页 |
| 2. 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| 2.1 实验菌株 | 第46页 |
| 2.2 主要试剂和培养基 | 第46-47页 |
| 2.3 实验主要仪器及设备 | 第47页 |
| 3. 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.1 在不同培养基上生长速率的比较 | 第47页 |
| 3.2 抗逆性生长状况比较 | 第47页 |
| 3.3 产孢的比较 | 第47-48页 |
| 3.3.1 产孢形态学特征比较 | 第48页 |
| 3.3.2 产孢数量比较 | 第48页 |
| 3.4 产捕器(三维菌网)能力的比较 | 第48-49页 |
| 3.4.1 活线虫诱导产捕器 | 第48-49页 |
| 3.4.2 尿素诱导产捕器 | 第49页 |
| 3.4.3 氨基酸诱导产捕器 | 第49页 |
| 4. 实验结果与分析 | 第49-67页 |
| 4.1 生长速率的比较 | 第49-53页 |
| 4.2 抗逆性生长测试结果 | 第53-60页 |
| 4.3 产孢的比较 | 第60-62页 |
| 4.3.1 产孢形态学特征比较 | 第60页 |
| 4.3.2 产孢数量比较 | 第60-62页 |
| 4.4 产捕器比较 | 第62-67页 |
| 4.4.1 活线虫诱导产捕器 | 第62-64页 |
| 4.4.2 尿素诱导产捕器 | 第64-66页 |
| 3.4.3 氨基酸诱导产捕器 | 第66-67页 |
| 5. 讨论 | 第67-68页 |
| 6. 本章小结 | 第68-69页 |
| 全文总结与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 附录1 本论文使用的缩写及中英文对照 | 第79-80页 |
| 附录2 质粒图谱 | 第80-81页 |
| 附录3 参加的基金及参与发表的文章 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
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