广藿香地下部分乙醇提取物化学成分分析及抗炎活性评价

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目的:中药材广藿香是我国传统常用的芳香化湿类中药,除作为中药处方药物临床应用外,其同时也是多种成药制剂和日常茶饮的主要组成药物,其年生产量和使用量都十分巨大。传统以植物的地上部分作为广藿香的药用部位,其地下部分不可入药。由于地下部分在该植物的形态学上占有较大比例,若能对地下部分加以利用,既能降低加工成本,也能最大程度的利用植物资源。鉴于目前尚未有未有地下部分是否具有入药价值的相关研究,本文拟以广藿香地下部分的乙醇提取物作为研究对象,进行化学成分的初步分析和活性的初步评价,进而评价广藿香地下部分是否具有潜在的生物药效活性,为其开发和应用提供理论依据和实验支持。方法:1.广藿香地下部分乙醇提物化学成分的初步分析采用UPLC-PAD联用技术采集提取物的主要化学成分的色谱数据,与已知化合物的色谱色谱进行对比匹配,分析鉴定主要成分;并对提取物主要化学成分进行含量测定。2.广藿香地下部分乙醇提取物抗炎作用的初步评价KM小鼠口服给予广藿香地下乙醇提取物(120,240and480mg/kg),连续7天,每天1次,末次给药1小时后,复制二甲苯致小鼠耳肿胀模型,测定耳朵重量差异,比较耳肿胀度和耳肿胀抑制率;复制醋酸致小鼠毛细血管通透性模型,测定腹腔灌洗液的OD值差异,比较通透性增强度及通透增强抑制率;复制角叉菜胶致小鼠足肿胀模型,测定致炎前后足部容积差异,比较足肿胀百分率和足肿胀抑制率。3.广藿香地下部分乙醇提物抗炎机理的初步探讨KM小鼠口服给予广藿香地下乙醇提取物(120,240and480mg/kg),连续7天,每天1次,末次给药1小时后,复制角叉菜胶致小鼠足肿胀模型,炎性造模4小时后,处死小鼠。取动物足部组织,进行病理切片镜检;MPO, iNOS和COX-2活性评价;MDA, TNF-α, IL-1β, IL-6, NO, PGE2含量测定。取动物肝脏组织,进行SOD, GPx和GRd活性评价。4.广藿香地下部分乙醇提物的急性毒性的初步研究采用半数致死量实验和最大耐受量试验相结合的方法,评价KM小鼠急性毒性实验中提取物的最大给药剂量和急性毒性反应。结果:1.化学成分的初步分析结果:初步鉴定提取物中的3个主要化学成分,分别为:毛蕊花糖苷、迷迭香酸和广藿香酮。含量测定结果显示,3个主要化学成分的含量高低水平依次为:广藿香酮(含量不低于45mg/g)>迷迭香酸(含量不低于25mg/g)>毛蕊花糖苷(含量不低于25mg/g)。2.抗炎作用的初步评价结果:口服给药给予广藿香地下乙醇提取物(120-480mg/kg/d,7d),各剂量组均可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀,表明其具有抑制外源性刺激所致局部血管扩张的抗炎作用;各剂量组均可显著性抑制醋酸所致小鼠腹腔通透性增强作用,表明其具有抑制外源性刺激所致的局部毛细血管组织液渗出的抗炎作用;各剂量组均可显著性抑制角叉菜胶所致小鼠足部肿胀,表明其具有抑制以组织液渗出、炎性肿胀的抗炎作用。3.抗炎机理的初步探讨结果:口服给予广藿香地下乙醇提取物(480g/kg/d,7d),可显著减少角叉菜胶所致小鼠炎性足部组织的病理改变,抑制MPO、iNOS、COX-2的活性,降低NO, PGE2, MDA, TNF-α, IL-1β和IL-6的水平;可显著提高肝脏组织中SOD, GPx和GRd的活性。4.急性毒性的初步研究结果:无法进行半数致死量的研究,口服给予提取物的单次最大耐受量大于4g/kg。结论:实验结果表明广藿香地下部分乙醇提取物主要含有毛蕊花糖昔、迷迭香酸和广藿香酮等化学成分成分。急性毒性实验提示该提取物的急性毒性较小,使用安全性较高。抗炎活性评价表明该提取物具有较强的抗炎活性,其潜在的抗炎机理为:抑制iNOS和COX-2活性,减少NO和PGE2生成;下调炎症因子TNF-α, IL-1β和IL-6水平;提高抗氧化酶SOD, GPx和GRd的活性,增强机体对抗氧化应激的能力。
摘要第3-5页
Abstract第5-7页
目录第8-9页
引言第9-10页
第一章 文献研究第10-29页
    第一节 广藿香研究综述第10-21页
        一、生物学性质研究第10-11页
        二、化学成分研究第11-15页
        三、质量控制研究第15-16页
        四、药理作用研究第16-19页
        五、加工和炮制的研究第19-20页
        六、小结第20-21页
    第二节 抗炎作用研究进展第21-29页
        一、概述第21页
        二、炎症的分类第21-22页
        三、抗炎药物的作用机理研究第22-26页
        四、抗炎药效评价模型第26-29页
第二章 实验部分第29-54页
    第一节 广藿香地下部分乙醇提物化学成分的初步分析第29-36页
        一、实验材料第29页
        二、方法与结果第29-35页
        三、讨论部分第35-36页
    第二节 广藿香地下部分乙醇提取物抗炎作用的初步评价第36-42页
        一、实验材料第36-37页
        二、实验方法第37-38页
        三、实验结果第38-40页
        四、结论与讨论第40-42页
    第三节 广藿香地下部分乙醇提物抗炎机理的初步探讨第42-52页
        一、实验材料第42-43页
        二、实验方法第43-45页
        三、实验结果第45-50页
        四、结论与讨论第50-52页
    第四节 广藿香地下部分乙醇提物的急性毒性研究第52-54页
        一、实验材料第52页
        二、实验方法第52-53页
        三、实验结果第53页
        四、结论与讨论第53-54页
结语第54-56页
参考文献第56-65页
附录第65-66页
在校期间发表论文情况第66-68页
致谢第68页
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