石斛合剂通过GLP-1/β-Catenin信号通路促进胰岛细胞增殖的分子机制研究

目的探讨石斛合剂对GLP-1R-+cAMP->PKA-P-β-catenin (Ser-675)->PDX-1信号通路及胰岛p细胞增殖、胰岛素基因表达和胰岛素分泌的影响,为石斛合剂临床治疗糖尿病奠定理论基础。方法胰岛β-TC-6细胞分为正常对照组、抑制剂组、石斛合剂组、Exendin-4阳性对照组,培养24h后,流式细胞术检测细胞周期、放射免疫法检测细胞上清液胰岛素分泌情况、酶联免疫法检测细胞内cAMP含量、Q-PCR检测细胞GLP-1R, PDX-1基因表达水平、Western blotting检测B-Catenin和磷酸化(ser675)蛋白以及GLP-1R、PDX-1蛋白表达水平。结果1.抑制剂干预后细胞S期缩短(P<0.05)；石斛合剂组及阳性对照组S期延长(P<0.05,P<0.01)。2.抑制剂干预后细胞胰岛素、cAMP水平明显降低(P<0.01)；石斛合剂及阳性对照组胰岛素、cAMP水平明显升高(P<0.01)。3.抑制剂干预后细胞GLP-1R、PDX-1基因表达水平下调(P<0.05)；石斛合剂及阳性对照组GLP-1R、PDX-1基因表达水平上调(P<0.01,P<0.05)。4.抑制剂干预后细胞GLP-1R、β-Catenin、P-β-catenin (Ser-675)、PDX-1蛋白表达显著下调(P<0.01)；石斛合剂及阳性对照组GLP-1R、β-Catenin、P-β-catenin (Ser-675)、PDX-1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)结论石斛合剂可通过GLP-1R->cAMP->PKA->P-β-Catenin (Ser675)-> PDX-1信号通路刺激胰岛素基因表达,促进胰岛细胞增殖及保护胰岛p细胞的作用。