Leucobacter triazinivorans sp. JW-1代谢扑草净中间产物降解酶分离纯化及特性研究
Leucobactertriazinivorans论文 N-异丙基氰尿酰胺论文 蛋白质分离纯化论文
论文详情
| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 术语与缩略语表 | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1.1 三嗪类除草剂的概况 | 第16-17页 |
| 1.2 蛋白质分离纯化技术 | 第17-20页 |
| 1.2.1 蛋白质的提取 | 第17-18页 |
| 1.2.2 蛋白质的粗提 | 第18页 |
| 1.2.3 蛋白质精细纯化 | 第18-20页 |
| 1.3 微生物参与均三嗪类除草剂代谢途径的关键酶 | 第20-24页 |
| 1.3.1 催化均三嗪类除草剂N-脱烷基反应的氧化酶 | 第20-21页 |
| 1.3.2 催化均三嗪类除草剂水解的水解酶 | 第21-24页 |
| 1.3.3 催化含甲硫基均三嗪类除草剂氧化的氧化酶 | 第24页 |
| 1.4 扑草净微生物降解研究现状 | 第24-27页 |
| 第二章 引言 | 第27-28页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第27页 |
| 2.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 第三章 材料和方法 | 第28-38页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第28-31页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第28页 |
| 3.1.2 供试药品和试剂 | 第28-30页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.1.4 培养基 | 第31页 |
| 3.1.5 工作溶液的配制 | 第31页 |
| 3.2 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀和降解酶检测方法的建立 | 第31-34页 |
| 3.2.1 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1的培养 | 第31页 |
| 3.2.2 Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内总蛋白的提取 | 第31页 |
| 3.2.3 硫酸铵分级沉淀 | 第31-32页 |
| 3.2.4 扑草净降解酶活性的定性检测方法的建立 | 第32页 |
| 3.2.5 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内降解酶活性定量检测方法 | 第32-33页 |
| 3.2.6 蛋白含量的测定 | 第33-34页 |
| 3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶的分离纯化 | 第34-36页 |
| 3.3.1 N-异丙基氰尿酰胺降解酶硫酸铵沉淀获取 | 第34页 |
| 3.3.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶疏水层析 | 第34页 |
| 3.3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶凝胶层析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 N-异丙基氰尿酰胺降解酶离子交换层析 | 第35页 |
| 3.3.5 SDS-PAGE电泳实验 | 第35-36页 |
| 3.3.6 N-异丙基氰尿酰胺降解酶N端测序 | 第36页 |
| 3.4 N-异丙基氰尿酰胺降解酶酶学性质的测定 | 第36-37页 |
| 3.4.1 pH对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性和稳定性的影响 | 第36页 |
| 3.4.2 温度对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.3 金属离子对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响 | 第37页 |
| 3.4.4 化学试剂对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响 | 第37页 |
| 3.4.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶动力学参数测定 | 第37页 |
| 3.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶底物特异性测定 | 第37-38页 |
| 第四章 结果与分析 | 第38-55页 |
| 4.1 菌株JW-1胞内扑草净降解酶活性定性检测方法建立和硫酸铵分级沉淀中活性定性检测 | 第38-39页 |
| 4.2 菌株JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀中降解酶定量检测 | 第39-45页 |
| 4.2.1 硫酸铵分级沉淀组分中扑草净降解酶活性定量检测 | 第39-41页 |
| 4.2.2 硫酸铵分级沉淀组分中2-羟基扑灭津降解酶活性定量检测 | 第41-43页 |
| 4.2.3 硫酸铵分级沉淀组分中N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性定量检测 | 第43-45页 |
| 4.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶分离纯化 | 第45-49页 |
| 4.3.1 N-异丙基氰尿酰胺降解酶疏水层析 | 第45-46页 |
| 4.3.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶凝胶层析 | 第46-47页 |
| 4.3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶离子交换层析 | 第47-48页 |
| 4.3.4 降解酶N端测序 | 第48-49页 |
| 4.4 酶学性质研究 | 第49-53页 |
| 4.4.1 温度对降解酶活性和稳定性的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.2 pH对降解酶活性和稳定性的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.3 金属离子对降解酶活性的影响 | 第51页 |
| 4.4.4 化学试剂对降解酶活性的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.5 降解酶动力学研究 | 第52-53页 |
| 4.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶底物特异性测定 | 第53-55页 |
| 第五章 讨论 | 第55-59页 |
| 5.1 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀 | 第55页 |
| 5.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶的分离纯化 | 第55-56页 |
| 5.3 酶学性质研究 | 第56-57页 |
| 5.4 酶动力学参数与底物特异性研究 | 第57-59页 |
| 第六章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第67页 |
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