苹果多酚与果汁非酶褐变相关性研究

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褐变问题一直是困扰果汁行业的重大技术难题,苹果汁在生产和储藏过程中的褐变严重影响果汁的质量。苹果汁的褐变与多酚物质密切相关。苹果多酚与多酚氧化酶(PPO)以及氧气相互作用,导致苹果酶促褐变;同时,酶促褐变高活性邻醌,在无多酚氧化酶作用下,可诱发多酚进一步聚合,促使果汁发生非酶褐变。基于此,本论文以酶促氧化形成邻醌为切入点,以绿原酸、儿茶素、表儿茶素和根皮苷为研究对象,研究多酚氧化酶酶促诱发对苹果多酚非酶褐变的影响,研究结果如下:(1)无PPO作用,含儿茶素、表儿茶素、绿原酸和根皮苷的果汁模拟体系自身会发生非酶褐变。通过色差计测定色值(L*、a*、b*、△E*)变化,研究表明,含儿茶素、表儿茶素、绿原酸的模拟体系,L*、b*、△E*变化趋势一致,L*值降低,体系白度和明度降低,b*、△E*值增大,体系变黄,总色差增大;儿茶素和绿原酸的a*值呈增大趋势,最终体系呈红色;表儿茶素的a*值呈减小趋势,且为负值,体系呈绿色;与儿茶素、表儿茶素、绿原酸模拟体系相比,根皮苷色值变化较小,自身褐变较弱。(2)课题同时探究了苹果多酚在多酚氧化酶酶促诱发下对果汁褐变的影响,发现诱发体系对多酚非酶褐变影响存在较大的差异。其中酶促诱发温度对儿茶素非酶褐变无显著性影响,而酶促诱发p H以及多酚氧化酶酶活对其非酶褐变影响显著,p H 4.0时,模拟果汁褐变程度较大,酶活对儿茶素苹果多酚参与的非酶褐变影响较大,体系褐变随酶活的增大而加剧,且活性较高时,多酚氧化酶与底物充分作用产生浑浊现象。在表儿茶素体系中,酶促诱发时间越长、温度越高,体系褐变越严重,且升高p H和增大酶活可加速表儿茶素褐变反应;含根皮苷模拟体系的色值曲线出现拐点,色值的变化趋势与前期相反,且体系有沉淀产生;诱发体系温度为40℃,褐变程度较大;酶活越大,褐变越严重,且会导致体系后浑浊。(3)以绿原酸邻醌为诱发基质,研究了绿原酸邻醌诱发绿原酸、儿茶素、表儿茶素和根皮苷非酶聚合与褐变。研究发现,绿原酸醌诱发儿茶素、表儿茶素非酶褐变的速率低于多酚自身褐变的速率;根皮苷化学性质稳定,自身无聚合作用。同时,绿原酸邻醌对其无诱发作用,只能在多酚氧化酶诱发下发生褐变。
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
1 绪论第12-20页
    1.1 我国苹果汁行业发展概况及面临的问题第12-14页
        1.1.1 我国苹果汁行业发展概况第12-13页
        1.1.2 我国苹果汁产业中存在的问题第13-14页
    1.2 苹果浓缩汁褐变机理的研究进展第14-18页
        1.2.1 酶促褐变相关研究第14-17页
        1.2.2 苹果汁加工中非酶褐变相关研究第17-18页
    1.3 立体背景与意义第18-19页
    1.4 课题的主要研究内容第19-20页
2 多酚非酶褐变第20-27页
    2.1 前言第20页
    2.2 实验材料第20-21页
        2.2.1 原料与试剂第20-21页
        2.2.2 仪器与设备第21页
    2.3 实验方法第21-22页
        2.3.1 溶液缓冲液的配制第21页
        2.3.2 色值的测定第21-22页
        2.3.3 数据处理方法第22页
    2.4 结果与讨论第22-25页
        2.4.1 儿茶素模拟果汁非酶褐变色值的变化第22-23页
        2.4.2 表儿茶素模拟果汁非酶褐变色值的变化第23-24页
        2.4.3 绿原酸模拟果汁非酶褐变时色值的变化第24-25页
        2.4.4 根皮苷模拟果汁非酶褐变时色值的变化第25页
    2.5 小结第25-27页
3 多酚自身诱发对非酶褐变的影响第27-48页
    3.1 前言第27-28页
    3.2 实验材料第28-29页
        3.2.1 实验原料第28页
        3.2.2 实验材料与试剂第28页
        3.2.3 实验仪器与设备第28-29页
    3.3 实验方法第29-30页
        3.3.1 缓冲液的配制第29页
        3.3.2 多酚氧化酶的提取及酶活性测定第29页
        3.3.3 酶蛋白含量的测定第29页
        3.3.4 酶促诱发时间对模拟果汁非酶褐变的影响第29-30页
        3.3.5 酶促诱发温度对模拟果汁非酶褐变的影响第30页
        3.3.6 pH值对酶促诱发模拟果汁非酶褐变的影响第30页
        3.3.7 底物浓度对酶促诱发模拟果汁非酶褐变的影响第30页
        3.3.8 色值的测定第30页
        3.3.9 数据处理第30页
    3.4 结果与讨论第30-47页
        3.4.1 酶促诱发对儿茶素模拟苹果汁体系非酶褐变特性的影响第30-34页
        3.4.2 酶促诱发对表儿茶素模拟苹果汁体系非酶褐变特性的影响第34-38页
        3.4.3 酶促诱发对绿原酸模拟苹果汁体系非酶褐变特性的影响第38-42页
        3.4.4 酶促诱发对根皮苷模拟苹果汁体系非酶褐变特性的影响第42-47页
    3.5 小结第47-48页
4 绿原酸诱发对多酚非酶褐变的影响第48-56页
    4.1 前言第48页
    4.2 实验材料第48-49页
        4.2.1 原料与试剂第48-49页
        4.2.2 仪器与设备第49页
    4.3 实验方法第49-51页
        4.3.1 溶液配制第49页
        4.3.2 邻醌制备第49页
        4.3.3 绿原酸诱发多酚反应第49页
        4.3.4 测定色值的变化第49页
        4.3.5 测底物含量的变化第49-51页
        4.3.6 数据处理第51页
    4.4 结果与讨论第51-55页
        4.4.1 储藏期模拟体系色值发生的变化第51-54页
        4.4.2 储藏期邻醌对模拟体系底物含量变化的影响第54-55页
    4.5 小结第55-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-64页
攻读学位期间发表的学术论文目录第64-65页
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