摘要 | 第8-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
第一部分 绪论 | 第18-45页 |
第一章 文献综述 | 第18-43页 |
1.1 彩叶植物研究进展 | 第18-27页 |
1.1.1 组织结构方面的研究 | 第18-19页 |
1.1.2 彩叶的生理生化研究 | 第19页 |
1.1.3 彩叶植物呈色机理的研究 | 第19-21页 |
1.1.4 环境因素对叶片呈色的影响 | 第21-22页 |
1.1.5 彩叶植物光合特性的研究 | 第22-23页 |
1.1.6 彩叶植物的遗传稳定性 | 第23-24页 |
1.1.7 其它相关因子的研究 | 第24页 |
1.1.8 彩叶草研究进展 | 第24-27页 |
1.1.9 今后研究方向展望 | 第27页 |
1.2 花色素苷研究进展 | 第27-43页 |
1.2.1 花色素苷的结构与理化性质 | 第28页 |
1.2.2 花色素苷在叶片中的产生与分布 | 第28-29页 |
1.2.3 花色素苷的诱导及其在叶片中的功能 | 第29-32页 |
1.2.4 花色苷生物合成的基本途径 | 第32-41页 |
1.2.5 叶色的基因工程改良研究展望 | 第41-43页 |
第二章 引言 | 第43-45页 |
第二部分 彩叶草花色素苷生物合成途径关键基因和MYB R2R3家族转录调控因子的克隆及功能的初步鉴定 | 第45-147页 |
第一章 彩叶草查尔酮合成酶基因(SsCHS)的克隆及其在烟草中的表达 | 第45-75页 |
1.1 材料与试剂 | 第45-47页 |
1.1.1 植物材料 | 第45页 |
1.1.2 菌株与载体 | 第45页 |
1.1.3 主要仪器和设备 | 第45-46页 |
1.1.4 试剂盒及购买的试剂 | 第46页 |
1.1.5 常用标准试剂配方 | 第46-47页 |
1.1.6 自配的其它试剂 | 第47页 |
1.1.7 烟草转化基本培养基 | 第47页 |
1.2 方法 | 第47-57页 |
1.2.1 各材料总RNA的提取 | 第47-48页 |
1.2.2 各材料总DNA的提取 | 第48-49页 |
1.2.3 彩叶草叶片的RACE反转录 | 第49-50页 |
1.2.4 DNA片段的回收、连接、克隆和测序 | 第50页 |
1.2.5 基因的生物信息学分析 | 第50页 |
1.2.6 SsCHS基因保守片断扩增 | 第50-51页 |
1.2.7 SsCHS基因cDNA 5’末端和3’末端扩增 | 第51页 |
1.2.8 SsCHS基因全长cDNA及对应的基因组的扩增 | 第51页 |
1.2.9 SsCHS基因的Southern blot分析 | 第51-53页 |
1.2.10 SsCHS基因的表达分析 | 第53-54页 |
1.2.11 SsCHS基因植物表达载体构建与对烟草的转化 | 第54-56页 |
1.2.12 SsCHS基因功能的初步验证 | 第56-57页 |
1.3 结果与分析 | 第57-71页 |
1.3.1 SsCHS基因的克隆 | 第57-58页 |
1.3.2 SsCHS基因的核酸序列和编码的蛋白分析 | 第58-64页 |
1.3.3 SsCHS基因数的Southern-blot鉴定 | 第64页 |
1.3.4 SsCHS基因转录的表达特性 | 第64-66页 |
1.3.5 SsCHS基因正义、反义和RNAi植物表达载体构建 | 第66-68页 |
1.3.6 SsCHS基因导入烟草及转化植株的获得 | 第68-69页 |
1.3.7 转SsCHS基因烟草总黄酮、叶绿素、类胡罗卜素和花色素苷的测定 | 第69-71页 |
1.4 讨论 | 第71-73页 |
1.5 小结 | 第73-75页 |
第二章 彩叶草黄烷酮-3-羟化酶基因家族(SsF3H)的克隆及表达分析 | 第75-90页 |
2.1 材料与试剂 | 第75页 |
2.2 方法 | 第75-76页 |
2.2.1 材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录 | 第75页 |
2.2.2 SsF3H基因保守片断扩增 | 第75页 |
2.2.3 SsF3H基因cDNA 5’末端和3’末端扩增 | 第75页 |
2.2.4 SsF3H基因全长cDNA及对应的基因组的扩增 | 第75-76页 |
2.2.5 SsF3H基因的Southern blot分析 | 第76页 |
2.2.6 SsF3H基因的表达分析 | 第76页 |
2.2.7 SsF3H2基因植物表达载体构建与对烟草的转化 | 第76页 |
2.3 结果与分析 | 第76-87页 |
2.3.1 SsF3H基因家族的克隆 | 第76-77页 |
2.3.2 SsF3H1和SsF3H2基因的核酸序列和编码的蛋白特征分析 | 第77-83页 |
2.3.3 SsF3H基因的Southern blot鉴定 | 第83页 |
2.3.4 SsF3H基因家族转录的表达特性 | 第83-85页 |
2.3.5 SsF3H2基因正义和反义植物表达载体构建 | 第85-86页 |
2.3.6 转化SsF3H2基因的烟草获得 | 第86-87页 |
2.4 讨论 | 第87-88页 |
2.5 小结 | 第88-90页 |
第三章 彩叶草二氢黄酮醇-4-还原酶基因(SsDFR)的克隆及其在烟草中的表达 | 第90-105页 |
3.1 材料与试剂 | 第90页 |
3.2 方法 | 第90-91页 |
3.2.1 材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录 | 第90页 |
3.2.2 SsDFR基因保守片断扩增 | 第90页 |
3.2.3 SsDFR基因cDNA 5’末端和3’末端扩增 | 第90页 |
3.2.4 SsDFR基因全长cDNA及对应的基因组的扩增 | 第90-91页 |
3.2.5 SsDFR基因的Southern blot分析 | 第91页 |
3.2.6 SsDFR基因的表达分析 | 第91页 |
3.2.7 SsDFR基因植物表达载体构建与对烟草的转化 | 第91页 |
3.2.8 SsDFR基因功能的初步验证 | 第91页 |
3.3 结果与分析 | 第91-101页 |
3.3.1 SsDFR基因的克隆 | 第91-92页 |
3.3.2 SsDFR基因的核酸序列和编码的蛋白特征分析 | 第92-97页 |
3.3.3 SsDFR基因的Southern blot鉴定 | 第97页 |
3.3.4 SsDFR基因转录的表达特性 | 第97-99页 |
3.3.5 SsDFR基因正义和反义植物表达载体构建 | 第99页 |
3.3.6 转SsDFR基因烟草的获得及转基因烟草总黄酮和花色素苷的测定 | 第99-101页 |
3.4 讨论 | 第101-104页 |
3.5 小结 | 第104-105页 |
第四章 彩叶草花色素合成酶基因家族(SsANS)的克隆及其在烟草中的表达 | 第105-123页 |
4.1 材料与试剂 | 第105页 |
4.2 方法 | 第105-106页 |
4.2.1 材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录 | 第105页 |
4.2.2 SsANS基因保守片断扩增 | 第105页 |
4.2.3 SsANS基因cDNA 5’末端和3’末端扩增 | 第105页 |
4.2.4 SsANS基因全长cDNA及对应的基因组的扩增 | 第105-106页 |
4.2.5 SsANS基因的Southern blot分析 | 第106页 |
4.2.6 SsANS基因的表达分析 | 第106页 |
4.2.7 SsANS基因植物表达载体构建与对烟草的转化 | 第106页 |
4.2.8 SsANS1基因功能的初步验证 | 第106页 |
4.3 结果与分析 | 第106-119页 |
4.3.1 SsANS基因家族的克隆 | 第106-107页 |
4.3.2 SsANS1和SsANS2基因的核酸序列和编码的蛋白特征 | 第107-114页 |
4.3.3 SsANS基因的Southern blot鉴定 | 第114页 |
4.3.4 SsANS基因转录的表达特性 | 第114-116页 |
4.3.5 SsANS1基因正义和反义植物表达载体构建 | 第116页 |
4.3.6 转SsANS1基因烟草的获得及转基因烟草总黄酮和花色素苷的测定 | 第116-118页 |
4.3.7 彩叶草可能的花色素苷生物合成途径 | 第118-119页 |
4.4 讨论 | 第119-121页 |
4.5 小结 | 第121-123页 |
第五章 彩叶草MYB R2R3家族转录调控因子(SsMYB2和SsMYB3)的克隆及其在烟草中的表达 | 第123-145页 |
5.1 材料与试剂 | 第123页 |
5.2 方法 | 第123-125页 |
5.2.1 材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录 | 第123页 |
5.2.2 SsMYB基因保守片断扩增、测序与分析 | 第123页 |
5.2.3 SsMYB2和SsMYB3基因cDNA 5’末端和3’末端扩增 | 第123-124页 |
5.2.4 SsMYB2和SsMYB3基因全长cDNA及对应的基因组的扩增 | 第124页 |
5.2.5 SsMYB2和SsMYB3基因的表达分析 | 第124页 |
5.2.6 SsMYB2和SsMYB3基因的植物表达载体构建与对烟草的转化 | 第124页 |
5.2.7 SsMYB2和SsMYB3基因的功能的初步验证 | 第124-125页 |
5.3 结果与分析 | 第125-140页 |
5.3.1 SsMYB基因保守区扩增与序列分析 | 第125页 |
5.3.2 SsMYB2基因和SsMYB3基因的克隆 | 第125-127页 |
5.3.3 SsMYB2和SsMYB3基因的核酸序列和编码的蛋白分析 | 第127-136页 |
5.3.4 SsMYB2和SsMYB3基因在红色彩叶草中的表达 | 第136-138页 |
5.3.5 SsMYB2和SsMYB3基因植物表达载体构建 | 第138-139页 |
5.3.6 转SsMYB2和SsMYB3基因烟草的获得与转基因烟草叶片总黄酮的测定 | 第139-140页 |
5.4 讨论 | 第140-143页 |
5.5 小结 | 第143-145页 |
第六章 总结 | 第145-147页 |
6.1 主要结论 | 第145-146页 |
6.2 主要创新点 | 第146-147页 |
参考文献 | 第147-160页 |
附录1 缩略词 | 第160-161页 |
附录2 学习期间发表的论文和参加的科研项目 | 第161-162页 |
致谢 | 第162-163页 |