缺血后适应对树鼩血栓性脑缺血TLR4介导的缺血耐受机制的研究

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目的:观察血栓性脑缺血树(鼠句)皮层及海马toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)表达的改变,进一步探讨缺血后适应对皮层及海马髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)、TLR4表达及炎症反应的影响,旨在探讨缺血后适应的脑保护作用是否与调控TLR4表达及抑制脑内炎症反应有关。方法:光化学法建立局灶性血栓性脑缺血模型,于脑缺血4h后夹闭右颈总动脉5mmin,再打开5min,共计3个循环建立缺血后适应模型。HE染色观察皮层及海马组织学改变,MPO免疫组化染色观察中性粒细胞浸润情况,免疫组化和免疫印记法测定皮层及海马TLR4蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应测定皮层及海马TLR4mRNA表达。结果:缺血4、24、72h后皮层神经元损伤及皮层炎性细胞浸润进行性加重,24h达高峰,后适应处理后损伤明显减轻,炎性细胞浸润减少。脑缺血后皮层MPO表达增强,后适应后24及72h表达减少(PP<0.05)。脑缺血后皮层TLR4蛋白表达逐渐升高(P<0.05),24h达高峰;与脑缺血组比较,后适应4、24h皮层TLR4蛋白表达减少(P<0.05),但后适应72h皮层TLR4蛋白表达增加(P<0.05)。缺血后适应组TLR4蛋白表达随时间延长呈逐渐增长的趋势。皮层TLR4mRNA的表达趋势与蛋白表达基本一致,后适应4、24h皮层TLR4mRNA表达减少(P<0.05),而后适应72h皮层TLR4mRNA表达增加(P<0.05)。脑缺血4、24、72h海马神经元损伤进行性加重,24h达高峰;后适应处理后24、72h海马神经元损伤显著减轻(P<0.05)。脑缺血后海马TLR4蛋白表达明显增强(P<0.05)。与脑缺血组比较,后适应4及24h TLR4蛋白表达减少(P<0.05),后适应72h TLR4蛋白表达增加(P<0.05)。海马TLR4mRNA的表达趋势与海马TLR4蛋白表达基本一致。结论:脑缺血时皮层及海马TLR4表达明显增强,缺血后适应的脑保护机制可能部分与调控TLR4表达及抑制脑内炎症反应有关。
英文缩略语第6-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
引言第12-16页
材料与方法第16-39页
    一、 技术线路第16-17页
    二、血栓性脑缺血及缺血后适应对树鼩脑内炎症反应的组织形态学及MPO、TLR4免疫组化表达的影响第17-24页
    三、血栓性脑缺血及缺血后适应对树鼩皮层及海马TLR4免疫印迹表达的影响第24-31页
    四、血栓性脑缺血及缺血后适应对树鼩皮层及海马TLR4mRNA RT-PCR表达的影响第31-39页
结果第39-62页
    一、缺血后适应对脑皮层及海马病理组织学及MPO、TLR4免疫组化表达的影响第39-54页
        (一) 对皮层MPO、TLR4表达的影响第39-46页
        (二) 对海马MPO、TLR4表达的影响第46-54页
    二、缺血后适应对脑皮层及海马TLR4蛋白表达的影响第54-57页
        (一) 皮层TLR4蛋白表达的变化第54-55页
        (二) 海马TLR4蛋白表达的变化第55-57页
    三、 缺血后适应对脑皮层及海马TLR4 mRNA表达的影响第57-62页
        (一) 皮层TLR4 mRNA表达的变化第57-59页
        (二) 海马TLR4 mRNA表达的变化第59-62页
讨论第62-82页
    一、动物模型特点及方法学评价第62-64页
    二、脑缺血后脑内炎症反应及缺血后适应的抗炎效应第64-67页
        (一) 在皮层的抗炎效应第64-67页
        (二) 在海马的抗炎效应第67页
    三、TLR4在介导脑缺血和缺血后适应中的分子作用第67-76页
        (一) TLR4在皮层的作用第72-74页
        (二) TLR4在海马的作用第74-76页
    四、后适应脑保护的可能机制第76-82页
结论第82-83页
参考文献第83-91页
综述:脑缺血与缺血后脑内炎症反应第91-118页
    参考文献第108-118页
攻博期间发表文章及承担科研课题第118-119页
致谢第119-120页
Toll-like receptor 4 is involved in ischemic tolerance of postconditioning inhippocampus of tree shrews to thrombotic cerebral ischemia第120-129页
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