摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-14页 |
1.1 夏堇研究概述 | 第9-10页 |
1.1.1 夏堇是理想的实验材料 | 第9页 |
1.1.2 夏堇转基因体系研究 | 第9-10页 |
1.1.3 夏堇花色、花型、花期调控研究 | 第10页 |
1.2 杆状病毒几丁质酶研究 | 第10-12页 |
1.3 玉米Lc 基因研究 | 第12-14页 |
第二章 论文研究内容 | 第14-16页 |
2.1 夏堇转HearNPV ChiA 基因研究 | 第14页 |
2.1.1 重组克隆载体的构建 | 第14页 |
2.1.2 重组植物表达载体的构建 | 第14页 |
2.1.3 根癌农杆菌介导的夏堇叶片的遗传转化 | 第14页 |
2.1.4 抗性植株的PCR 检测 | 第14页 |
2.1.5 抗性植株的半定量RT-PCR(Semi-Quantitative RT-PCR)分析 | 第14页 |
2.1.6 抗性植株几丁 , 质酶活性的检测 | 第14页 |
2.2 夏堇转HearNPV ChiA 和玉米Lc 双价基因研究 | 第14-16页 |
2.2.1 重组克隆载体的构建 | 第14-15页 |
2.2.2 双价植物表达载体 Lc-ChiA-pBI121 的构建 | 第15页 |
2.2.3 根癌农杆菌介导的夏堇叶片的遗传转化 | 第15-16页 |
第三章 夏堇转HearNPV ChiA 基因研究 | 第16-31页 |
3.1 实验材料 | 第16-17页 |
3.1.1 植物材料 | 第16页 |
3.1.2 菌种和载体 | 第16页 |
3.1.3 常规试剂和工具酶 | 第16页 |
3.1.4 试剂配制 | 第16-17页 |
3.2 实验方法 | 第17-23页 |
3.2.1 重组植物表达载体的构建 | 第17-19页 |
3.2.2 重组载体ChiA-pBI121 转化农杆菌LBA4404 | 第19-20页 |
3.2.3 根癌农杆菌介导的夏堇叶片的遗传转化 | 第20页 |
3.2.4 抗性植株的PCR 检测 | 第20-21页 |
3.2.5 抗性植株的半定量RT-PCR(Semi-Quantitative RT-PCR)分析 | 第21-22页 |
3.2.6 抗性植株几丁质酶活性的检测 | 第22-23页 |
3.3 结果与分析 | 第23-29页 |
3.3.1 ChiA 基因的克隆与重组植物表达载体的构建 | 第23-25页 |
3.3.2 抗性植株的获得 | 第25页 |
3.3.3 抗性植株的PCR 检测 | 第25-26页 |
3.3.4 抗性植株的半定量RT-PCR(Semi-Quantitative RT-PCR)分析 | 第26-27页 |
3.3.5 抗性植株几丁质酶活性的检测 | 第27-29页 |
3.3.6 转基因夏堇花期提前现象 | 第29页 |
3.4 小结与讨论 | 第29-31页 |
3.4.1 小结 | 第29-30页 |
3.4.2 讨论 | 第30-31页 |
第四章 夏堇转HearNPV ChiA 和玉米Lc 双价基因研究 | 第31-38页 |
4.1 实验材料 | 第31页 |
4.1.1 植物材料 | 第31页 |
4.1.2 载体和生化试剂 | 第31页 |
4.2 实验方法 | 第31-34页 |
4.2.1 引物设计合成 | 第31页 |
4.2.2 PCR 扩增及产物回收 | 第31-32页 |
4.2.3 重组载体的构建 | 第32-34页 |
4.2.4 根癌农杆菌介导的双价基因转化夏堇叶盘 | 第34页 |
4.3 结果与分析 | 第34-37页 |
4.3.1 Lc 基因和35S-ChiA-NOS 片段克隆 | 第34页 |
4.3.2 双价重组植物表达载体的构建 | 第34-37页 |
4.3.3 转双价基因抗性芽的获得 | 第37页 |
4.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
4.4.1 小结 | 第37页 |
4.4.2 讨论 | 第37-38页 |
第五章 结论与讨论 | 第38-40页 |
5.1 结论 | 第38页 |
5.2 讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简介 | 第45页 |