燕麦液体培养灵芝多糖的组分构成与抗氧化活性分析
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灵芝多糖是灵芝中重要活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂等多种功效。灵芝的人工栽培成本高、工艺复杂、生产周期长、过程不易控制,液体培养具有成本低、工艺简单、生产周期短、过程可控等优点。目前灵芝的液体培养所用的培养基多为合成或半合成培养基,鲜有以谷物为培养基的灵芝液体培养。论文研究了三种燕麦液体培养基(糊化燕麦、发芽燕麦、酶解燕麦)、一种半合成液体培养基和棉籽壳固体栽培所得菌丝体和发酵液(液体培养)或子实体(固体栽培)中多糖的组分构成及其抗氧化活性。研究中对多糖水提物和碱提物进行了分别研究。采用DPPH清除率、·OH自由基清除率和还原力三种方法对灵芝多糖的抗氧化活性进行分析。所得主要结果如下:(1)燕麦液体培养3~4天,灵芝菌体生长量即可达到最大值,而半合成培养基则需7天,固体培养获得子实体则需90~110天。燕麦液体培养可缩短灵芝菌丝体的培养时间。(2)与固体栽培所得灵芝子实体相比,燕麦液体培养所得菌丝体的多糖水提物的平均纯度为58.79%,是子实体的2.1倍,是半合成培养基所得菌丝体的90%;多糖碱提物的平均纯度为25.08%,是子实体的33%,是半合成培养基的89%。燕麦液体培养发酵液中的多糖产物的平均纯度为81.10%,是半合成培养基的1.01倍。相同多糖浓度条件下,燕麦液体培养所得菌丝体多糖水提物的平均抗氧化活性低于子实体,多糖碱提物的则高于子实体,两者均高于半合成培养基所得菌丝体多糖。三种燕麦培养基中,发芽燕麦培养所得各多糖提取物的抗氧化活性总体最高,其次为酶解燕麦,糊化燕麦最低。(3)经DEAE-纤维素分离纯化,固体栽培所得灵芝子实体多糖为四个组分,发芽燕麦培养所得菌丝体多糖水提物和碱提物为三个组分,其他多糖提取物均为两个组分。在所有培养方式中,不同多糖组分中的0.25mol/L NaCl洗脱组分的抗氧化活性最高,其次为0.1mol/L NaCl洗脱组分≈0.5mol/L NaCl洗脱组分,蒸馏水洗脱组分最低。
摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1.1 灵芝多糖的组成与功能 | 第9-10页 |
1.1.1 灵芝中主要活性成分 | 第9页 |
1.1.2 灵芝多糖的组成 | 第9-10页 |
1.1.3 灵芝多糖的功能 | 第10页 |
1.2 多糖的提取与分离纯化方法 | 第10-12页 |
1.2.1 多糖的提取方法 | 第10-11页 |
1.2.2 多糖的分离纯化方法 | 第11-12页 |
1.3 灵芝的生长特点和条件 | 第12-16页 |
1.3.1 灵芝生长的营养需求 | 第12页 |
1.3.2 燕麦中营养成分构成 | 第12-15页 |
1.3.3 灵芝生长的环境条件 | 第15-16页 |
1.4 灵芝的液体培养技术研究现状 | 第16-20页 |
1.4.1 菌种选育 | 第16-17页 |
1.4.2 培养的营养条件优化 | 第17-19页 |
1.4.3 培养条件优化 | 第19-20页 |
1.5 灵芝液体培养研究中存在的问题 | 第20页 |
1.6 本文研究内容 | 第20-22页 |
1.6.1 本文研究思路 | 第20-21页 |
1.6.2 本文研究的技术路线 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-29页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 菌种来源与种类 | 第22页 |
2.1.2 燕麦来源与种类 | 第22页 |
2.1.3 试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 培养基的制备 | 第23页 |
2.2.2 灵芝的固体培养 | 第23-24页 |
2.2.3 灵芝的液体培养方法 | 第24页 |
2.2.4 灵芝多糖提取物的制备 | 第24-25页 |
2.2.5 灵芝多糖含量的测定 | 第25-26页 |
2.2.6 灵芝多糖的纯化 | 第26页 |
2.2.7 灵芝多糖抗氧化活性的测定 | 第26-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-48页 |
3.1 灵芝的固体培养和液体培养 | 第29-30页 |
3.2 灵芝多糖的纯度 | 第30-31页 |
3.2.1 不同培养方式所得灵芝多糖提取物的纯度 | 第30页 |
3.2.2 不同的液体培养所得灵芝多糖的纯度 | 第30-31页 |
3.3 灵芝多糖的抗氧化活性 | 第31-38页 |
3.3.1 不同培养方式所得灵芝多糖的抗氧化活性 | 第31-33页 |
3.3.2 不同的液体培养基所得灵芝多糖的抗氧化活性 | 第33-38页 |
3.4 灵芝多糖的纯化及各组分抗氧化活性 | 第38-48页 |
3.4.1 固体培养所得灵芝多糖的纯化及各组分抗氧化活性 | 第38-39页 |
3.4.2 液体培养所得灵芝多糖的纯化及各组分抗氧化活性 | 第39-48页 |
第四章 讨论与结论 | 第48-50页 |
4.1 燕麦液体培养灵芝所用时间 | 第48页 |
4.2 燕麦液体培养所得灵芝多糖的纯度和抗氧化活性 | 第48页 |
4.3 燕麦液体培养所得灵芝多糖的纯化和各组分抗氧化活性 | 第48-50页 |
创新点 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |
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