第一部分Granzyme B-LV183慢病毒载体扩增及鉴定目的:Granzyme B-LV183慢病毒载体的扩增、鉴定方法:,Granzyme B-LV183转染Huh7肝癌细胞,计算转染效率,并经RT-PCR进行验证。扩增产物进行测序验证结果:扩增慢病毒载体的0D260/280=1.87,电泳结果条带清晰,Granzyme B-LV183转染Huh7肝癌细胞后,转染效率为70%左右,经RT-PCR检测,有基因表达。PCR产物测序结果正确。结论:1Granzyme B-LV183成功转染Huh7肝癌细胞。第二部分GranzymeB基因联合姜黄素对Huh7肝癌细胞的影响目的:研究GranzymeB基因联合姜黄素对Huh7肝癌细胞的影响方法:以实验一为基础,本次实验共分为5组:空白组(KB)、姜黄素组(GH)、GranzymeB转染组(GrB)、GranzymeB联合姜黄素组(GG)、空质粒(KZL)。将40μ mol/L浓度的姜黄素溶液加入GH组和GG中(6、24、96孔板中的GG和GH组分别加入500μl、200μl、20ul已经配置好的40μ mol/L浓度姜黄素溶液),48小时后检测各组细胞上清液中ALT, AST, AFP的浓度,CCK-8检测各组细胞的增值情况,通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:加药48小时后各组上清液ALT, AST, AFP总体相比P小于0.05,有统计学差异,各组两两相比,GG组与GrB组、GH组、KB组、KZL组相比P均小于0.05,有统计学差异,GrB组与GH组相比P大于0.05,无统计学差异;各组细胞凋亡率总体相比P小于0.05,有统计学差异,GG组分别与GrB组、GH组、KB组、KZL组相比P均小于0.05,有统计学差异,GrB组与GH组相比P大于0.05,无统计学差异;各组细胞增殖情况总体相比P小于0.05,有统计学差异,GG组与GrB组、KB组、GH组、KZL组相比P均小于0.05,有统计学差异,GrB组与GH组P大于0.05无统计学差异。结论:1GranzymeB联合姜黄素处理肝癌细胞可以抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡的效果加强。