基于对映体的氟虫腈的斑马鱼胚胎发育毒性及其对幼鱼运动行为的影响
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氟虫腈是一类高效低毒的苯基吡唑类杀虫剂,广泛用于农作物害虫和卫生害虫的防治。虽然该农药对哺乳类的毒性较低,它对蜜蜂和水生生物的毒性却很大。此外,氟虫腈是一种手性农药,其生物过程具有对映体选择性差异。近年来,氟虫腈的水生生物毒性及对映体选择性已经逐渐引起了关注,但是主要集中于对低等水生生物急性毒性的研究,关于氟虫腈对鱼类等高等水生生物的发育毒性及行为影响的对映体选择性的报道甚少。因此,本文以氟虫腈为测试化合物,以斑马鱼为模式生物,研究了氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼的发育毒性及其对幼鱼运动行为的影响以及对映体选择性差异,主要内容包括以下几方面:(1)以AB品系斑马鱼为模式生物,研究了氟虫腈对斑马鱼的早期发育及行为的影响。研究结果显示:氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼的正常发育有毒害作用,产生了游囊关闭、身体弯曲和体长变短等畸形现象甚至引起了胚胎、幼鱼的死亡。此外,对斑马鱼运动行为的检测结果表明:氟虫腈对幼鱼在光照条件下的运动活力及在光周期刺激下的运动特征及变化规律有显著的影响。与对照组相比,经低浓度(40g/L)氟虫腈处理的幼鱼运动活力显著增加,但运动规律没有明显差异。经高浓度(160g/L)氟虫腈处理的幼鱼运动活力显著降低,对光照条件的变化更为敏感。(2)以AB品系斑马鱼为模式生物,研究了氟虫腈外消旋体和两个不同对映体对斑马鱼的早期发育及行为影响的选择性差异。结果显示:氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼的发育毒性具有对映体选择性,其毒性从大到小顺序为:外消旋体>S-(+)-fipronil>R-(-)-fipronil。同时,对斑马鱼幼鱼光周期刺激实验结果发现:在高浓度(160g/L)下,经氟虫腈外消旋体处理的幼鱼对光刺激最敏感,两个对映体之间无显著性差异。在低浓度(40g/L)下,外消旋体及两个对映体对幼鱼运动行为没有显著性差异。(3)以AB品系斑马鱼为模式生物,研究了氟虫腈与重金属铜对鱼类早期发育的联合毒性作用。结果表明:两者对胚胎孵化率的影响为协同作用,对胚胎死亡及幼鱼身体弯曲表现为相加作用。上述研究结果表明氟虫腈对斑马鱼的早期发育及行为具有毒性效应,而且不同对映体在发育毒性方面存在着显著的差异,而对幼鱼的行为影响无明显差异。此外,结果还显示环境中其他污染物质的存在能够影响氟虫腈的水生毒性。本文的研究结果为评价氟虫腈的生态安全和健康风险以及新农药的创制提供理论依据。
摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 氟虫腈的研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 氟虫腈的性质、用途及作用机制 | 第11-12页 |
1.1.2 氟虫腈的环境行为 | 第12-14页 |
1.1.3 氟虫腈对非靶标生物的毒性效应 | 第14-16页 |
1.1.4 氟虫腈与其他污染物的联合毒性作用 | 第16-17页 |
1.2 斑马鱼及其在毒理学中的应用 | 第17-18页 |
1.2.1 斑马鱼的毒理学优势 | 第17-18页 |
1.2.2 斑马鱼行为指标在毒理学中的应用 | 第18页 |
1.3 氟虫腈的手性研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 氟虫腈的手性结构 | 第18-19页 |
1.3.2 氟虫腈的对映体选择性毒性和生物降解 | 第19-20页 |
1.4 课题的立题依据及研究内容 | 第20-22页 |
1.4.1 课题的立题依据 | 第20-21页 |
1.4.2 研究内容 | 第21-22页 |
第二章 氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼的发育毒性及幼鱼运动行为的影响 | 第22-35页 |
2.1 材料与方法 | 第22-26页 |
2.1.1 主要试剂 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.3 斑马鱼的饲养和胚胎的收集 | 第23页 |
2.1.4 斑马鱼胚胎-幼鱼发育毒性实验 | 第23-24页 |
2.1.5 斑马鱼幼鱼运动行为实验 | 第24-25页 |
2.1.6 定量分析及统计 | 第25-26页 |
2.2 实验结果与讨论 | 第26-34页 |
2.2.1 氟虫腈对胚胎-幼鱼发育过程的影响 | 第26-28页 |
2.2.2 氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼运动行为的影响 | 第28-34页 |
2.3 本章小结 | 第34-35页 |
第三章 氟虫腈对斑马鱼胚胎发育及幼鱼行为影响的对映体选择性 | 第35-51页 |
3.1 材料与方法 | 第35-38页 |
3.1.1 试剂与氟虫腈对映体的制备 | 第35-36页 |
3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
3.1.3 斑马鱼的饲养和胚胎的收集 | 第36页 |
3.1.4 斑马鱼胚胎-幼鱼发育毒性实验 | 第36-37页 |
3.1.5 斑马鱼幼鱼运动行为实验 | 第37-38页 |
3.1.6 定量分析及统计 | 第38页 |
3.2 实验结果与讨论 | 第38-49页 |
3.2.1 氟虫腈的手性拆分及定量分析 | 第38-39页 |
3.2.2 氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼发育的对映体选择性 | 第39-43页 |
3.2.3 氟虫腈对斑马鱼胚胎-幼鱼运动行为的对映体选择性 | 第43-49页 |
3.3 本章小结 | 第49-51页 |
第四章 氟虫腈和铜对斑马鱼早期发育的联合毒性效应 | 第51-56页 |
4.1 材料与方法 | 第51-52页 |
4.1.1 主要试剂 | 第51页 |
4.1.2 主要仪器 | 第51页 |
4.1.3 斑马鱼的饲养和胚胎的收集 | 第51-52页 |
4.1.4 氟虫腈与铜的联合暴露实验方法 | 第52页 |
4.1.5 统计分析 | 第52页 |
4.2 结果与讨论 | 第52-55页 |
4.2.1 氟虫腈对斑马鱼胚胎发育的单一毒性 | 第52-53页 |
4.2.2 Cu2+对斑马鱼胚胎发育的单一毒性 | 第53页 |
4.2.3 氟虫腈、Cu2+对斑马鱼胚胎发育的联合毒性 | 第53-55页 |
4.3 结论 | 第55-56页 |
第五章 结论与展望 | 第56-58页 |
5.1 主要研究内容及意义 | 第56页 |
5.2 本文的创新点 | 第56-57页 |
5.3 研究展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |
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