本试验以樱桃谷鸭、罗曼蛋鸡、三黄肉鸡、罗斯308肉鸡为研究对象，对其血液白细胞抗菌肽成分进行了提取和分离，并对体外抗菌活性进行了比较。而从鸭白细胞分离出抗菌活性肽的工作在国内尚未见报道。本试验共分两个系列。 系列Ⅰ 禽类白细胞抗菌肽的提取分离 抗菌肽粗提物的提取 收集禽类新鲜抗凝血，应用0.83％氯化铵溶液裂解至染色镜检无红细胞，低温离心，收集白细胞沉淀。将白细胞沉淀超声波破碎至染色镜检无完整细胞，低温高速离心提取细胞颗粒。10％醋酸溶液4℃下搅拌萃取抗菌肽，低温高速离心收集上清液，真空冷冻干燥，用0.01％醋酸溶液溶解即为抗菌肽粗提物。体外抗菌试验表明，该抗菌肽粗提物对G+细菌和G-细菌及真菌均有抗菌作用。 抗菌肽粗提物分离、提纯 应用离子交换层析法将抗菌肽粗提物初步分离成两部分即阴离子组分和阳离子组分。将阳离子组分用HPLC法进行二步分离获得有抗菌活性的目的蛋白。结果发现，经HPLC分离得到多个抗菌活性产物，且抗菌活性产物均分布在14～50％乙腈梯度范围内。 分子量测定 应用SDS-PAGE凝胶电泳方法检测目的蛋白的纯度，并初步测定其分子量，结果表明，抗菌活性产物分子量在3，313～5，856Da之间。进一步用质谱仪测定其分子量，结果表明，抗菌活性产物分子量在3，800～4，300Da之间。 系列Ⅱ 禽类白细胞抗菌肽的抗菌活性的比较 离子交换层析阳离子组分的抗菌活性的比较 应用微量琼脂糖弥散法测定离子交换层析产物的抗菌活性后，采用96孔微量反应板法测定最低抑菌浓度（MIC）。结果表明，抗菌肽粗提物离子交换层析阴离子组分无抗菌活性；阳离子组分对G+细菌和G-细菌及真菌均有抗菌作用。最低抑菌浓度由低到高依次为樱桃谷鸭、罗曼蛋鸡、三黄肉鸡、罗斯308肉鸡。SPSS统计学分析结果表明，樱桃谷鸭、罗曼蛋鸡、三黄肉鸡对大肠杆菌O78、肠炎沙门氏菌50041、霍乱沙门氏菌50019、伤寒杆菌686、金黄色葡萄球菌1056MRSA、猪链球菌和白色念珠菌ATCC10231的抗菌活性与罗斯308肉鸡相比，差异显著。这说明禽类白细胞抗菌肽的数量和质量可能存在种间和品种间的差异，从而使其在生产实践中所表现出的抗病力和适应性不同。 抗菌肽HPLC分离产物的抗菌活性比较 选择经抗菌肽HPLC分离的抗菌活性好的产物进行最低抑菌浓度（MIC）测定，结果表明，最低抑菌浓度由低到高的顺序与其阳离子组分的一致，与其在生产实践中所表现出的抗病力和适应性相符。SPSS统计学分析结果表明，对大肠杆菌O78、肠炎沙门氏菌50041的MIC进行比较，樱桃谷鸭与三黄肉鸡、罗斯308肉鸡差异显著，罗曼蛋鸡和罗斯308肉鸡差异显著。樱桃谷鸭、罗曼蛋鸡、三黄肉鸡对金黄色葡萄球菌1056MRSA和猪链球菌的体外抗菌活性显著优于罗斯308肉鸡。这说明禽类抗菌肽不仅在体外抗菌活性方面存在差异，同时对细菌的敏感性也存在差异，只有在较高浓度下才有抗真菌作用。
