山西部分地区腹泻病原菌的分布和致泻大肠埃希菌的相关毒力基因研究

致泻大肠埃希菌论文 血清型论文 毒力基因论文 多重PCR论文
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目的:腹泻是一种世界流行性疾病,是发展中国家婴儿和儿童发病和死亡最常见的原因之一,由各种致泻大肠埃希菌(DEC)引起的腹泻是全球许多国家重要的公共卫生问题。本研究的目的是监测山西部分地区感染性腹泻病原菌的分布情况,为本地区感染性腹泻的流行病学提供参考资料;并且通过DEC的血清学鉴定与分子分型从而了解山西部分地区急性腹泻患者DEC的发生率、类别、血清型、毒力基因分布特点,探讨DEC毒力基因的致病性。方法:对2009年12月-2010年12月山西省4个地区(榆次、长治、临汾、太原)8所三甲医院门诊拟似腹泻症候群患者采集大便标本做常规培养,首先通过各种选择性培养基筛选出病原菌,后经生化及血清学进一步鉴定到种、群或血清型。并针对五种致泻大肠埃希菌EHE、ETE、EIE、EAEC)11种毒力相关基因(escV、bfpB、stxlA stx2A、elt、estIa、estlb、invE、astA、aggR、 pic)合成11对引物,采用多重PCR(mPCR)方法对培养出的DEC做毒力基因检测。结果:1.2009年12月-2010年12月山西省288例腹泻症候群患者中,共分离病原菌152株,其中DEC最多为84株,占病原菌的55.3%(84/152),其次为肺炎克雷伯菌,同期检出志贺菌9株(5.9%),沙门菌2株(1.3%)。84株DEC中,EPEC分离最多29株(19.1%),其次为ETEC19株(12.5%),EAEC16株(10.5%),EHEC13株(8.6%),EIEC7株(4.6%)。2.山西省288例急性腹泻患者中,晋中地区分离病原菌株最多,其次为长治,其它地区略低。腹泻症候群发病季节以6-8月份发病率最高,全年均有发病。腹泻症候群发病年龄以2岁以下婴幼儿为主要发病人群,各年龄段均可发病。性别分布为男性170例,女性118例,男性病例多于女性,约为女性的1.44倍。3.84株DEC中,其中27株血清凝集试验阳性,分型率32.1%,分属17种血清型,其中EPEC分属7种不同血清型,主要血清型为0128:K67和0111:K58,ETEC检出5种,主要为025:K19,EHEC检出1种,EIEC检到三种血清型,EAEC未检到血清型。4.84株DEC携带9种毒力相关基因共10种模式,主要基因模式为escV(24,28.6%)和elt(18,21.4%)。27株已分型菌株中,10株携带escV(37.0%),9株携带elt(33.3%),3株携带(11.1%).57株未分型菌株中,14株(24.6%)携带escV,10株(17.5%)携带escV+stx2A,9株(15.8%)携带elt,8株(14.0%)携带aggR。 EAEC菌株存在多种毒力基因组合,最多见的是aggR。结论:1.山西部分地区急性腹泻中,分离的DEC所占比例较高,占病原菌的55.3%,存在5个群,主要为EPEC,其次为ETEC和EAEC, EHEC和EIEC少见。2.腹泻病原菌在不同地区、季节、年龄分布有一定差别,晋中地区腹泻症候群最多,其次为长治,其它地区略低;发病季节以6-8月份最多,全年均有发病;发病年龄以2岁以下婴幼儿为主要发病人群,各年龄段均可发病;性别为男性病例多于女性,约为女性的1.44倍。3.本地区DEC的血清分型率较高(32.1%),至少存在17种血清型,与毒力基因escV、elt的分布存在一定关系,可用于初步分型,在鉴定部分血清型方面是有用的。有关毒力基因的致病性和致病机理有待进一步研究。4.DEC菌株携带的相关毒力基因呈现多样性,主要基因型为escV和elt,已分型和未分型菌株携带基因基本一致。
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第10-14页
第一部分 山西部分地区细菌性腹泻病原菌分布第14-20页
    1 实验材料第14页
    2 实验方法第14页
    3 结果第14-18页
    4 讨论第18-20页
第二部分 致泻大肠埃希菌的相关毒力基因研究第20-31页
    1 实验材料第20-21页
    2 主要试剂的配制第21页
    3 实验方法第21-25页
    4 实验结果第25-29页
    5 讨论第29-31页
结论第31-32页
参考文献第32-34页
综述第34-39页
    参考文献第37-39页
个人简历第39-40页
致谢第40页
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