三种分型技术对食源性单增李斯特菌分型研究

单增李斯特菌论文 溯源论文 分子分型论文
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摘要第5-6页
Abstract第6-7页
英文缩写注解第8-13页
第一章 绪论第13-39页
    1.1 单增李斯特菌概况第13-19页
        1.1.1 李斯特菌属类别第14页
        1.1.2 李斯特菌病的案例及传染情况第14-16页
        1.1.3 单增李斯特菌的毒力因子和致病机理第16-19页
    1.2 单增李斯特菌的检测第19-23页
        1.2.1 传统检测方法第19-20页
        1.2.2 免疫学检测方法第20-21页
        1.2.3 分子生物学检测方法第21-23页
        1.2.4 全自动微生物分析系统检测第23页
        1.2.5 生物传感器检测第23页
    1.3 单增李斯特菌的定量第23-25页
        1.3.1 传统计数定量第23-24页
        1.3.2 实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)第24-25页
    1.4 单增李斯特菌的分型第25-34页
        1.4.1 传统分型技术第26-28页
        1.4.2 传统分型技术的缺点第28-29页
        1.4.3 分子分型技术第29-34页
    1.5 分型方法的应用及选择标准第34-36页
        1.5.1 分型方法的应用第34-35页
        1.5.2 分型方法的选择标准第35-36页
    1.6 本文研究目的和主要研究内容第36-39页
        1.6.1 研究目的第36-37页
        1.6.2 主要研究内容第37-39页
第二章三种分子分型技术对单增李斯特菌的分型第39-57页
    2.1 前言第39-40页
    2.2 材料与设备第40-44页
        2.2.1 实验菌株第40-41页
        2.2.2 主要仪器及设备第41-42页
        2.2.3 主要试剂及常用耗材第42-43页
        2.2.4 常用培养基及主要溶液配制第43-44页
    2.3 实验方法第44-47页
        2.3.1 菌株培养和保藏条件第44页
        2.3.2 单增李斯特菌株全基因组DNA的提取第44页
        2.3.3 RAPD分型技术第44-45页
        2.3.4 ERIC-PCR分型技术第45-46页
        2.3.5 Sau-PCR分型技术第46-47页
        2.3.6 产物分析第47页
    2.4 实验结果第47-55页
        2.4.1 RAPD分型结果第47-50页
        2.4.2 ERIC-PCR分型结果第50-52页
        2.4.3 Sau-PCR分型结果第52-55页
    2.5 讨论第55-57页
第三章 三种分子分型技术对单增李斯特菌分型的稳定性第57-68页
    3.1 引言第57-58页
    3.2 材料与设备第58-62页
        3.2.1 实验菌株第58-59页
        3.2.2 主要仪器及设备第59-60页
        3.2.3 主要试剂及常用耗材第60-61页
        3.2.4 常用培养基及主要溶液配制第61-62页
    3.3 实验方法第62页
        3.3.1 菌株培养和保藏条件第62页
        3.3.2 单增李斯特菌株全基因组DNA的提取第62页
        3.3.3 室温放置培养第62页
        3.3.4 传代培养第62页
        3.3.5 分别用两种分型方法进行分型第62页
        3.3.6 产物分析第62页
    3.4 实验结果第62-66页
        3.4.1 室温放置和传代培养的ERIC-PCR分型结果第62-64页
        3.4.2 室温放置和传代培养的ERIC-PCR进化树分析第64-65页
        3.4.3 室温放置和传代培养的Sau-PCR分型结果第65-66页
        3.4.4 室温放置和传代培养的Sau-PCR进化树分析第66页
    3.5 讨论第66-68页
第四章 单增李斯特菌的分离与鉴定第68-76页
    4.1 引言第68页
    4.2 材料与设备第68-71页
        4.2.1 样本来源第68页
        4.2.2 主要仪器及设备第68-70页
        4.2.3 主要试剂及常用耗材第70-71页
        4.2.4 常用培养基及主要溶液配制第71页
    4.3 实验方法第71-73页
        4.3.1 采用国标法分离鉴定LM第71-72页
        4.3.2 采用PCR法分离鉴定LM第72-73页
    4.4 实验结果第73-74页
        4.4.1 PCR电泳结果第73-74页
        4.4.2 菌株的保存第74页
    4.5 讨论第74-76页
第五章 应用Sau-PCR分型技术对单增李斯特菌分型第76-81页
    5.1 前言第76页
    5.2 材料与设备第76-79页
        5.2.1 实验菌株第76页
        5.2.2 主要仪器及设备第76-77页
        5.2.3 主要试剂及常用耗材第77-78页
        5.2.4 常用培养基及主要溶液配制第78-79页
    5.3 实验方法第79页
        5.3.1 Sau-PCR分型技术第79页
        5.3.2 产物分析第79页
    5.4 实验结果第79-80页
    5.5 讨论第80-81页
结论与展望第81-83页
参考文献第83-95页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第95-96页
致谢第96-97页
附件第97页
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