目的：比较三株膀胱癌细胞株(EJ-M3,EJ,BIU-87)的增殖、迁移及侵袭生物学特性的不同,探讨SDF-1对三株细胞增殖、迁移和侵袭力的作用,检测CXCR4在三种不同来源的膀胱癌细胞中的表达,研究CXCR4的表达与细胞增殖、迁移及侵袭能力的关系,为寻找膀胱癌新的治疗方法提供实验数据和靶点。方法：应用MTT法检测三株不同膀胱癌细胞增殖能力,观察SDF-1对细胞增殖能力的影响；通过细胞划痕实验检测三株不同膀胱癌细胞迁移力的情况,观察SDF-1对细胞迁移运动性的影响；采用Transwell体外细胞侵袭实验检测三种膀胱癌细胞株侵袭和运动性变化,观察SDF-1对细胞侵袭力的影响；采用半定量RT-PCRC半定量-逆转录聚合酶链反应)检测三株膀胱癌细胞株CXCR4的mRNA表达；用Western Blot(蛋白免疫印迹法)检测三种细胞中CXCR4的蛋白表达。结果：利用MTT法检测：三株细胞应用SDF-1实验组与对照组(不加SDF-1)比较,EJ-M3实验组吸光值(0.424±0.016)大于对照组(0.345±0.015)p<0.01),EJ实验组吸光值(0.393±0.018)大于对照组(0.332±0.023)p<0.05),BIU-87实验组吸光值(0.357±0.014)大于对照组(0.312±0.017)p<0,05),三株细胞增殖细胞数两两比较均有统计学意义(p<0.05)；细胞划痕实验表明：三株细胞应用SDF-1实验组与对照组(不加SDF-1)比较,在12h,24h迁移至划痕区的细胞数：EJ-M3实验组迁移细胞数(32.18±2.65,43.18±3.88)多于对照组(9.00±1.78,19.344±3.40)(p<0.01),EJ实验组迁移细胞数(30.68±2.51,41.82±2.78)多于对照组(8.51±1.51,18.68±1.52)(p<0.05),BIU-87实验组迁移细胞数(23.67±2.81,34.51±2.75)多于对照组(8.18±1.48,17.01±1.42)(p<0.05),且三株细胞之间迁移细胞数两两比较均有显著性差异(p<0.05)；通过Transwell侵袭实验：应用SDF-1实验组与对照组(不加SDF-1)比较,EJ-M3实验组侵袭细胞数(83±6)多于对照组(55±6)p<0.01),EJ实验组侵袭细胞数(52±5)多于对照组(33±4)p<0.05),BIU-87实验组侵袭细胞数(29±5)多于对照组(11±3)(p<0.05),且三株细胞之间侵袭细胞数两两比较均有显著性差异(p<0.05)；通过PCR实验：三株细胞CXCR4的mRNA表达均成阳性,电泳条带相对光密度值EJ-M3(1.3357±0.1435)>EJ(0.7662±0.1338)>BIU-87(0.1658±0.0677),三组细胞之间两两比较均有显著性差异(p<0.05)。应用Western Blot实验：三株细胞CXCR4的蛋白表达均成阳性,电泳条带相对光密度值EJ-M3(0.5257±0.1338)>EJ(0.3246±0.1038)>BIU-87(0.0858±0.0631),三组细胞之间两两比较均有显著性差异(p<0.05)。结论：三株膀胱癌细胞的生物学特性有差异,不同来源的膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力不同,在SDF-1作用下膀胱癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力增强,CXCR4的表达与膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力呈正相关,CXCR4/CXCL12(SDF-1)生物学轴在膀胱癌侵袭转移过程中扮演了重要角色,这为膀胱癌的治疗提供了新的靶点。
