刺梨水提物抗氧化损伤作用研究

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氧化损伤会导致器官和组织病变,诱发多种疾病如癌症、老化、动脉粥样硬化、糖尿病以及类风湿性关节炎等。刺梨( Rose roxburghii Tratt)自然资源丰富,天然、无毒、富含多种营养成分如Vc、超氧化物歧化酶(SOD)、刺梨黄酮、刺梨多糖、人体必须氨基酸等并具有多种功能活性。本试验通过多个体系测定刺梨水提物的抗氧化损伤作用。结果证明刺梨水提物具有较好的抗氧化损伤能力。刺梨水提物中多酚类化合物的含量223.02±12.89 mg/g,黄酮类化合物含量20.41±1.71 mg/g。刺梨水提物对DPPH·自由基、ABTS+·自由基均有较强的清除能力,其清除DPPH·自由基的IC50值为74.93 mg/L,清除ABTS+·自由基的IC50值为153.83 mg/L。刺梨水提物也具有较强的铁还原能力,其FRAP值为1.363 mmol。刺梨水提物对Phen-CuSO4-Vc诱导的DNA氧化损伤有抑制作用,且抑制作用随刺梨水提物浓度的增大而增强。当浓度为15mg/ml时,刺梨水提物对Phen-CuSO4-Vc体系诱导的DNA氧化损伤有66.9%的抑制率。刺梨水提物对Cu2+/H2O2和AAPH诱导的牛血清白蛋白(BSA)的氧化损伤均具有抑制作用,刺梨水提物浓度为10 mg/ml时,蛋白氧化损伤受到显著抑制。刺梨提取物对Cu2+/H2O2诱导的肝匀浆蛋白氧化损伤具有保护作用。刺梨水提物能够抑制氧化损伤导致的蛋白质羰基化,且抑制作用有剂量依赖效应;刺梨水提物能够保护肝匀浆体系内巯基,增强其抗氧化能力,且保护作用随浓度升高而增强。刺梨提取物对Cu2+/H2O2诱导的肝匀浆脂质氧化损伤具有保护作用,能够抑制脂质氧化损伤过程中丙二醛(MDA)和共轭二烯(CD)的形成,且抑制作用随刺梨水提物浓度升高而增强。综上所述,刺梨水提物中活性成分含量较高,具有较强的自由基清除能力,对DNA和蛋白质损伤有很强的抑制作用,对肝匀浆体系内蛋白质和脂质的氧化损伤具有保护作用。
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-25页
    1.1 氧化应激第10-16页
        1.1.1 活性氧/氮第10-11页
        1.1.2 蛋白质氧化损伤第11-13页
        1.1.3 DNA 氧化损伤第13-14页
        1.1.4 脂质氧化损伤第14-15页
        1.1.5 氧化应激与疾病第15-16页
    1.2 抗氧化剂第16-21页
        1.2.1 抗氧化剂的分类第16-17页
        1.2.2 常见的天然抗氧化剂第17-21页
    1.3 刺梨第21-24页
        1.3.1 刺梨资源简介第21页
        1.3.2 刺梨的营养成分第21-22页
        1.3.3 刺梨的生理功能第22-24页
        1.3.4 毒性研究第24页
    1.4 本试验的研究意义及目的第24-25页
第二章 刺梨水提物清除自由基及抗DNA 氧化损伤作用研究第25-38页
    2.1 试验方法第25-30页
        2.1.1 材料、试剂及仪器第25页
        2.1.2 刺梨水提物的制备第25-26页
        2.1.3 刺梨水提物总酚及总黄酮含量测定第26-27页
        2.1.4 刺梨水提物对DPPH·自由基的清除试验第27-28页
        2.1.5 刺梨水提物对ABTS~+·自由基的清除试验第28页
        2.1.6 刺梨水提物铁还原能力/抗氧化能力测定(FRAP 法)第28-29页
        2.1.7 刺梨水提物DNA 氧化损伤的作用第29-30页
    2.2 结果与分析第30-37页
        2.2.1 刺梨水提物中总多酚及总黄酮含量测定第30-31页
        2.2.2 刺梨水提物体外抗氧化活性研究结果第31-37页
    2.3 小结第37-38页
第三章 刺梨水提物对蛋白质氧化损伤的作用第38-43页
    3.1 试验方法第38-39页
        3.1.1 仪器与主要试剂第38页
        3.1.2 考马斯亮蓝染色法检测蛋白质第38-39页
        3.1.3 Cu~(2+)/H_2O_2 诱导蛋白氧化模型的建立第39页
        3.1.4 刺梨水提物对Cu~(2+)/H_2O_2 诱导蛋白氧化的作用第39页
        3.1.5 AAPH 诱导蛋白氧化模型的建立第39页
        3.1.6 刺梨水提物对AAPH 诱导蛋白氧化的作用第39页
    3.2 结果与分析第39-42页
        3.2.1 Cu~(2+)/H_2O_2 诱导不同处理时间的蛋白氧化作用第39-40页
        3.2.2 刺梨水提物对Cu~(2+)/H_2O_2 诱导蛋白氧化的保护作用第40-41页
        3.2.3 AAPH 诱导不同处理时间蛋白氧化作用第41页
        3.2.4 刺梨水提物对AAPH 诱导蛋白氧化的保护作用第41-42页
    3.3 小结第42-43页
第四章 刺梨水提物对活性氧诱导肝损伤的作用第43-49页
    4.1 试验材料及方法第43-46页
        4.1.1 实验试剂与仪器第43页
        4.1.2 肝损伤诱导模型的建立第43-44页
        4.1.3 BCA 法测定蛋白浓度第44-45页
        4.1.4 羰基(protein carbonyls)的测定第45页
        4.1.5 巯基含量(protein thiol contents)的测定第45页
        4.1.6 丙二醛(MDA)的测定第45-46页
        4.1.7 共轭二烯(conjugated diene, CD)的测定第46页
    4.2 试验结果第46-48页
        4.2.1 刺梨水提物对Cu~(2+)/H_2O_2 诱导的肝匀浆蛋白氧化损伤的作用第46-47页
        4.2.3 刺梨水提物对Cu~(2+)/H_2O_2 诱导肝匀浆脂质氧化损伤的保护作用第47-48页
    4.3 小结第48-49页
第五章 结论与讨论第49-51页
    5.1 结论第49页
    5.2 讨论第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页
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