从葵花籽中提取绿原酸与制备功能性多肽的研究

葵花籽多肽论文 蛋白酶水解论文 分离纯化论文
论文详情
本文以葵花籽为原料,首先提取绿原酸;然后采用碱溶酸沉法从中提取分离蛋白,再利用复合酶解法与超声波裂解技术制备小分子葵花籽多肽,经膜技术分离纯化后,对该多肽的抑制亚硝化反应、抗红细胞溶血及抗酒精性肝损伤等作用进行了系统研究。结果表明:1、用醇溶法提取脱脂葵花籽粉中的绿原酸,最佳工艺条件为温度40℃、乙醇浓度50%、pH6.0、料液比1:20浸提时间2h,其得率为2.46%。提取液用正丁醇-冰醋酸-水(4:2:5)作为展开剂进行薄层定性鉴定,发现样品与绿原酸标品在相应位置显现相同的斑点,说明提取物中含有绿原酸。2、试验采用碱溶酸沉法提取葵花籽分离蛋白,然后用碱性蛋白酶和复合酸性蛋白酶两阶段酶解制备葵花籽多肽。在制备过程中结合超声波辅助酶解,可以使该多肽的水解效率明显提高。Tricine-SDS-PAGE电泳和SephadexG-25凝胶层析分析表明,本工艺所得葵花籽多肽的主要成分是小于3.4kDa的多肽,其中3000Da以下的占78.41%。3、前工序得到的葵花籽多肽溶液在操作压力0.3MPa,浓度2%,pH值6.0的条件下依次经过截留量为4000Da和2000Da的超滤膜进行超滤分离,得到4000Da以上(SSP1)、4000~2000Da(SSP2))和2000Da以下(SSP3)三种不同分子量的葵花籽多肽组分。超滤后的样品用纳滤和反渗透组件进行脱盐处理,结果表明,纳滤和反渗透脱盐率均较高,但是反渗透处理对总氮的损失较大,而纳滤总氮损失率仅为12.17%,综合考虑,只选用纳滤装置进行脱盐处理。4、本研究对SSP1、SSP2和SSP3三种不同分子量的葵花籽多肽进行了体外清除亚硝酸盐和阻断N-二乙基亚硝胺合成的作用,以及抑制红细胞自氧化溶血和H202诱导红细胞氧化溶血等抗氧化活性的比较研究。结果表明,分子量在4000-2000Da的葵花籽多肽(即SSP2)在清除NaNO2、抑制亚硝胺合成以及抑制红细胞氧化溶血等方面的效果最强,是制作食源性防癌和抗氧化剂的理想原料。5、用SSP2葵花籽多肽饲喂小鼠,进行抗酒精性肝损伤实验,结果表明,该组分的高剂量组能使小鼠肝脏中丙二醛含量明显下降,还原性谷胱甘肽含量显著提高;血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶活力明显降低;与肝损伤模型组相比,差异显著(P<0.05),说明4000-2000Da葵花籽多肽组分对预防酒精性肝损伤有明显的作用。
中文摘要第11-12页
ABSTRACT第12-13页
第一章 绪论第14-23页
    1.1 概述第14页
    1.2 葵花籽的营养成分及应用价值第14-15页
    1.3 绿原酸的研究进展及概况第15-17页
        1.3.1 绿原酸的结构及理化性质第15-16页
        1.3.2 绿原酸的分布第16页
        1.3.3 绿原酸的提取方法第16-17页
        1.3.4 绿原酸的应用现状第17页
    1.4 植物多肽的研究进展及概况第17-20页
        1.4.1 植物活性肽的研究现状第17-18页
        1.4.2 植物多肽的制备第18-19页
        1.4.3 多肽的分离纯化第19-20页
    1.5 葵花籽多肽国内外研究现状第20-21页
    1.6 本论文的研究意义、技术路线和主要内容第21-23页
        1.6.1 研究意义第21页
        1.6.2 技术路线第21-22页
        1.6.3 主要研究内容第22-23页
第二章 葵花籽中绿原酸的提取及分析第23-30页
    2.1 材料与仪器第23-24页
        2.1.1 主要试剂第23页
        2.1.2 主要仪器第23-24页
    2.2 试验方法第24-25页
        2.2.1 醇溶法提取绿原酸的工艺流程第24页
        2.2.2 绿原酸薄层定性分析第24页
        2.2.3 绿原酸含量的测定第24-25页
    2.3 结果与讨论第25-29页
        2.3.1 薄层层析定性鉴定第25页
        2.3.2 绿原酸特征吸收波长的确定第25页
        2.3.3 绿原酸标准曲线的绘制结果第25-26页
        2.3.4 绿原酸提取的单因素试验结果与分析第26-27页
        2.3.5 正交试验设计第27-29页
    2.4 本章小结第29-30页
第三章 葵花籽活性多肽的制备第30-40页
    3.1 材料与仪器第30-31页
        3.1.1 主要试剂第30页
        3.1.2 主要仪器第30-31页
    3.2 试验方法第31-33页
        3.2.1 测定方法第31-33页
        3.2.2 葵花籽分离蛋白的制备方法第33页
        3.2.3 葵花籽分离蛋白的酶解工艺第33页
        3.2.4 超声波协同辅助酶解制备方法第33页
    3.3 结果与讨论第33-39页
        3.3.1 葵花籽分离蛋白的分析第34-35页
        3.3.2 葵花籽最佳水解工艺的研究结果第35-36页
        3.3.3 超声波协同辅助酶解制备葵花籽多肽第36-38页
        3.3.4 Tricine-SDS-PAGE电泳法分析葵花籽多肽分子量分布情况第38-39页
    3.4 本章小结第39-40页
第四章 葵花籽活性多肽的分离纯化研究第40-46页
    4.1 材料与仪器第40页
        4.1.1 主要材料与试剂第40页
        4.1.2 主要仪器第40页
    4.2 试验方法第40-42页
        4.2.1 葵花籽多肽经多级分离纯化实验流程第40-41页
        4.2.2 微滤处理方法第41页
        4.2.3 超滤处理方法第41页
        4.2.4 纳滤和反渗透处理第41-42页
        4.2.5 SephadexG-25凝胶层析分析方法第42页
    4.3 结果与讨论第42-45页
        4.3.1 不同分子量葵籽多肽超滤分离纯化的研究第42-43页
        4.3.2 超滤膜的清洗结果第43页
        4.3.3 超滤对葵花籽多肽分子量分布的影响第43-45页
        4.3.4 小分子量葵花籽多肽纳滤分离纯化研究第45页
    4.4 本章小结第45-46页
第五章 不同分子量葵花籽多肽的功能特性的研究第46-51页
    5.1 材料与仪器第46-47页
        5.1.1 主要材料与试剂第46-47页
        5.1.2 主要仪器第47页
    5.2 试验方法第47-48页
        5.2.1 体外清除NaNO_2的研究方法第47页
        5.2.2 体外阻断亚硝胺合成的研究方法第47页
        5.2.3 抑制红细胞自氧化溶血作用的研究方法第47页
        5.2.4 抑制H_2O_2诱导红细胞氧化溶血作用的研究方法第47-48页
    5.3 结果与讨论第48-50页
        5.3.1 葵花籽多肽对NaNO_2的清除作用第48页
        5.3.2 葵花籽多肽体外阻断亚硝胺合成的作用第48-49页
        5.3.3 葵花籽多肽抑制红细胞自氧化溶血的作用第49页
        5.3.4 葵花籽多肽抑制H_2O_2诱导红细胞氧化溶血的作用第49-50页
    5.4 本章小结第50-51页
第六章 小分子葵花籽多肽抑制酒精性肝损伤的研究第51-57页
    6.1 材料与仪器第51-52页
        6.1.1 主要材料和试剂第51-52页
        6.1.2 主要仪器第52页
    6.2 试验方法第52-53页
        6.2.1 实验动物分组及造型第52页
        6.2.2 指标观察第52-53页
        6.2.3 统计分析第53页
    6.3 结果与讨论第53-55页
        6.3.1 一般状态观察结果第53页
        6.3.2 血清ALT和AST测定结果与分析第53-54页
        6.3.3 肝脏中MDA和GSH含量测定结果与分析第54页
        6.3.4 肝脏形态学观察结果第54-55页
        6.3.5 肝组织病理学切片分析第55页
    6.4 本章小结第55-57页
参考文献第57-62页
攻读学位期间取得的成果第62-63页
致谢第63-64页
个人简介及联系方式第64-66页
论文购买
论文编号ABS678422,这篇论文共66页
会员购买按0.30元/页下载,共需支付19.8
不是会员,注册会员
会员更优惠充值送钱
直接购买按0.5元/页下载,共需要支付33
只需这篇论文,无需注册!
直接网上支付,方便快捷!
相关论文

点击收藏 | 在线购卡 | 站内搜索 | 网站地图
版权所有 艾博士论文 Copyright(C) All Rights Reserved
版权申明:本文摘要目录由会员***投稿,艾博士论文编辑,如作者需要删除论文目录请通过QQ告知我们,承诺24小时内删除。
联系方式: QQ:277865656